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熊伟民: 作品数：15 被引量：49H指数：4; 供职机构：解放军第455医院更多>>; 发文基金：南京军区医药卫生科研基金上海市自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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次级淋巴组织趋化因子(SLC)转染树突状细胞抗肝癌细胞特异性免疫的实验研究: 2009年; [目的]构建携带次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因的重组腺相关病毒载体并转染肝癌患者外周血来源的树突状细胞(DC),探讨其对肝癌细胞特异性的免疫作用。[方法]采用PCR法扩增出SLC基因,将SLC基因片段克隆至腺相关病毒PAG-AAV载体上,GFP作为成功转染的示踪蛋白。经HEK293T细胞的包装扩增后得到携带SLC基因的重组腺相关病毒体外转然DC,制备AAV-SLC-DC疫苗,流式细胞仪检测感染率,免疫荧光、RT-PCR法检测SLC表达。并以MTT法检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力(MLR)及对肝癌细胞株HepG2的CTL效应。[结果]成功得到SLC基因,并将SLC基因片段克隆至PAG-AAV载体上,可检测到序列正确的SLC基因的正确表达,经HEK293T细胞包装出病毒颗粒;测定病毒滴度为6.3×1010μg/ml。重组腺相关病毒PAG-AAV-SLC体外感染DC,流式细胞仪检测感染率达48.37%。SLC基因转染不影响DC的表型表达,与对照组无显著差异(P>0.05);转染后DC较对照组有较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;并可诱导出特异性的CTL效应,不同效靶比与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。[结论]构建的重组SLC腺相关病毒可将SLC基因导入树突状细胞(DC)内并正确表达,并可诱导出对肝癌细胞特异性的CTL效应,为进一步研究SLC基因修饰的树突状细胞疫苗抗肿瘤作用提供了实验基础。; 李明峰侯静熊伟民邸立军任军; 关键词：次级淋巴组织趋化因子树突状细胞腺相关病毒

内镜下缩瘤术治疗老年晚期胃癌的临床疗效被引量：1: 2016年; 目的回顾性分析106例老年晚期胃癌病例,评价内镜下缩瘤术对老年晚期胃癌预后的影响.方法将收集的老年晚期胃癌病例分为采用内镜下缩瘤术治疗的治疗组和仅接受最佳支持治疗的同期对照组,主要观察指标为有效率和生存期.完成4疗程以上缩瘤术治疗后评估短期疗效及不良反应.采用Cox多因素分析方法 ,在基线均衡的条件下比较两组胃癌病例的生存期,Kaplan-Meier法估算中位生存时间.结果收集中国人民解放军第455医院消化肿瘤科2010-01-01/2015-06-30诊治的老年晚期胃癌患106例,治疗组为51例,对照组为55例,治疗组和对照组的近期有效率分别为76.5%和27.3%(P<0.05).C o x多因素回归分析示:内镜下缩瘤治疗(P=0.000)、肿瘤大小(P=0.000)是影响老年晚期胃癌病例生存期的独立的预后因素,在组间基线均衡的条件下,治疗组(51例)的中位生存期较对照组(55例)延长(12.496 mo vs 8.384 mo,P=0.000),采用内镜下缩瘤治疗的相对危险度:0.430(95%CI:0.274-0.675).治疗组1、2年生存率较对照组明显延长(52.8%vs 29.1%、22.9%vs 2.8%).结论内镜下缩瘤术对晚期胃癌具有较好临床疗效,可延长老年晚期胃癌患者的生存期,使其生存获益.; 李朝燕顾剑锋丁威席素娟岳海燕熊伟民李明峰; 关键词：晚期胃癌老年生存期预后

脑损伤后大鼠NAAG肽酶基因沉默的神经保护: 2013年; 目的:探索沉默NAALADase基因的方法对骨髓间充质干细胞(BMSC)静脉移植,评价其对大鼠脑损伤后的神经保护作用。方法:体外分离培养BMSC,应用小分子干扰RNA转染方法沉默NAALADase基因的表达。建立脑损伤模型后,48 h处死动物取脑组织进行Fluom-Jade B组织荧光染色以及HE染色。结果:HE染色显示沉默NAALADase基因BDNF数目明显增多并且损伤后神经元退变也减少。结论:沉默NAAG肽酶的表达后能有效实现对神经的保护作用。; 刘信龙李明峰熊伟民胡健徐正平; 关键词：脑损伤 RNA干扰

IL-17F、IL-17A在大肠癌组织中的表达: 2014年; 目的探讨IL-17F、IL-17A与大肠癌发生发展的关系。方法对72例大肠癌组织中的IL-17F、IL-17A的表达水平进行免疫组化法检测,分析不同病理因素中,IL-17F、IL-17A的表达水平。结果癌组织中的IL-17F、IL-17A的表达水平均显著高于癌旁组织(P<0.05);多因素回归分析结果显示,IL-17F、IL-17A的表达水平与淋巴结转移、分化程度以及TNM分期有关(P<0.05)。结论大肠癌组织中的IL-17F、IL-17A的阳性表达率高,二者的表达均与患者的淋巴结转移、大肠癌分化程度以及TNM分期有关。; 熊伟民李明峰席素娟; 关键词：大肠癌病情

替吉奥联合奥沙利铂治疗老年晚期胃癌的临床研究: 2016年; 探究老年晚期胃癌应用替吉奥联合奥沙利铂的治疗效果。方法:选取本院2011 年7 月~2012 年5 月期间收治的79 例胃癌患者分为实验组与对照组,实验组49 例,给予单纯替吉奥药物治疗,对照组30 例,给予替吉奥联合奥沙利铂治疗,观察两组临床疗效与不良反应。结果:实验组治疗总有效率为91.83%,对照组为63.33%,差异具有统计学意义,P<0.05, 实验组不良反应发生率低于对照组,P<0.05。结论:应用替吉奥联合奥沙利铂治疗老年晚期胃癌临床效果显著,不良反应较常规治疗少,值得临床实践应用。; 席素娟熊伟民顾剑锋李明峰; 关键词：奥沙利铂晚期胃癌

长链非编码RNA H19促进肝癌细胞增殖和侵袭被引量：16: 2013年; 目的:肝癌是严重危害人类健康的一类恶性肿瘤,但其发病机制目前仍不明确。虽然长链非编码RNA的异常表达与多种肿瘤的发生密切相关,但在肝癌中的报导尚不多见。因此,本文将探讨长链非编码RNA H19在肝癌组织和正常组织中表达差异,进一步检测其对肝癌细胞增殖和侵袭活性的调控及其分子机制,为开发长链非编码RNA的临床诊断试剂提供实验依据。方法:收集20例肝癌手术患者的癌变组织和20例正常组织,通过real time PCR检测H19的表达差异。在转染或干扰掉该H19后,采用MTT的方法检测HepG2细胞的增殖活性,通过Transwell小室的方法检测HepG2细胞的侵袭活性。结果:real time PCR检测发现H19 mRNA在肝癌组织中高表达,而在正常组织中低表达。过表达H19导致HepG2细胞过度增殖,敲除该lncRNA,细胞增殖和侵袭活性被抑制。结论:H19在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织,并且过表达H19导致肝癌细胞增殖活性增加,而敲除H19会导致肝癌细胞的增殖和侵袭活性明显减弱。该LncRNA在肝癌组织中的过量表达有助于肝癌的临床诊断,同时H19在肝癌的恶性肿瘤生物活性中发挥着重要的作用,因此,H19是一个潜在的治疗肝癌的药物作用靶点,为开发新的抗肿瘤药物提供了新的治疗靶点。; 熊伟民李明峰宋佳鸿岳海燕席素娟李朝燕; 关键词：H19 长链非编码RNA 肝癌 HEPG2细胞增殖

基因重组幽门螺杆菌HspA—Zot融合蛋白质口服疫苗的研制被引量：1: 2003年; 目的制备幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位(HspA)和霍乱弧菌封闭小带毒素(Zot)的重组融合蛋白质HspA—Zot(HZ)；观察融合蛋白HZ经口服免疫后在小鼠小肠内的吸收情况；观察HZ经口服免疫后诱发小鼠产生的特异性免疫应答反应。方法①用PCR方法扩增HspA和Zot两个目的基因片段，将它们分别克隆至pSK(+)质粒上，然后插入含T7启动子pET一28a(+)的表达载体中，构建含双基因的表达质粒pET—hz，转化E，coli BL21(DE3)，经IPTG诱导表达高效的融合蛋白HZ；②融合蛋白经镍离子柱纯化、复性后，与HspA重组蛋白质共同标记同位素^125I，经小鼠灌胃实验观察其在小鼠小肠内的吸收情况。结果①经测序，hspA-zot(hz)融合基因片段由1 575bp组成，为编码515个氨基酸残基的多肽。经SDS—PAGE检测发现，融合基因表达的蛋白质相对分子质量(M)r约为65×10^3。②标记同位素^125I的HZ和HspA，经小鼠灌胃实验观察不同时间段的吸收，情况，结果发现在5～10min时间段，HZ组出现吸收峰值，约为对照组的8．65倍(P<0．001)，且吸收峰值时问明显提前。结论融合蛋白质HZ经口服后可以在小鼠小肠内迅速被大量吸收，经口服免疫后可以刺激机体产生较高滴度特异性抗体。HZ可以作为预防和治疗幽门螺杆菌感染的候选口服疫苗株。; 李明峰程军何志勇熊伟民吴祥甫; 关键词：基因重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位口服疫苗免疫应答

NAAGS基因修饰神经干细胞在创伤性颅脑损伤治疗中的研究被引量：1: 2013年; 目的:探讨移植NAAG合酶(NAAG synthetase,NAAGS)基因修饰的神经干细胞(Neural Stem Cells,NSCs)能否促进创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的恢复。方法:利用电穿孔转染大鼠NSCs,通过脑立体定向仪分别将PBS(模型组)、NSCs(NSCs组)、转基因NSCs(NAAGS+NSCs组)移植到创伤性颅脑损伤(Traumatic Brain Injury,TBI)大鼠局部损伤灶边缘,通过NSS评分评价移植后大鼠神经功能的变化以及用TUNEL法检测NSCs的凋亡情况,并采用放射免疫法分析脑组织中促炎因子水平。结果:NSS评分结果显示NAAGS+NSCs组和NSCs组在第7、14、21天神经功能评分均低于模型组(P<0.05);NAAGS+NSCs组在第14和21天神经功能评分低于NSCs组(P<0.05);在各时间点细胞移植组比模型组的神经细胞凋亡数明显减少;转基因NSCs移植能明显降低TBI脑组织中促炎因子水平。结论:转基因NSCs移植后可以合成NAAGS促进TBI大鼠神经功能的恢复。; 李明峰刘信龙顾剑锋熊伟民徐正平; 关键词：神经干细胞创伤性颅脑损伤

三维适形放疗同步化疗对中晚期食管癌患者生存质量影响的临床研究被引量：14: 2014年; 目的比较三维适形放疗同步化疗与单纯三维适形放疗对中晚期食管癌患者生存质量的影响,治疗期间并发症及临床疗效。方法选取206例中晚期食管癌患者作为研究对象,将其中106例行单纯三维适形放疗患者列为对照组,100例行三维适形放疗同步化疗患者为观察组,比较2组患者治疗期间及治疗结束后生存质量各维度的改变,并发症发生率及临床疗效。结果 1治疗结束时对照组躯体功能、角色功能、总体症状明显好于观察组(P<0.05)。但治疗结束后3个月,观察组躯体功能、角色功能、情绪功能、社会功能以及总体症状均显著优于对照组(P<0.05)。22组患者均未发生严重的4级不良反应,放射性食管炎和放射性肺损伤组间差异不明显(P>0.05);观察组患者白细胞降低、血小板减少、肝功能异常、心脏毒性的发生率显著高于对照组(P<0.05)。观察组临床疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论三维适形放疗同步化疗方案治疗期间会影响患者的生存质量评分,但治疗后短期内生存质量即可逐渐恢复,相对于单纯放疗的患者获益更多。; 熊伟民李明峰席素娟; 关键词：三维适形放疗化疗食管癌

Sirt1促进肝癌细胞增殖和侵袭活性的分子机制被引量：3: 2013年; 目的:探讨Sirt1基因在肝癌组织和癌旁组织中表达差异,进一步检测其对肝癌细胞增殖和侵袭活性的调控。方法:收集30例肝癌手术患者的病变组织和癌旁组织,通过Real time-PCR检测Sirt1基因的表达差异,并对其中6例组织通过western blot验证。在转染Sirt1基因或干扰掉该基因后,采用MTT的方法检测HepG2细胞的增殖活性,通过Transwell小室的方法检测HepG2细胞的侵袭活性。结果:Real time-PCR检测发现Sirt1 mRNA在肝癌组织中高表达,同样,Western blot检测也发现Sirt1在肝癌组织中高表达,而在癌旁组织中表达较低。过表达Sirt1导致HepG2细胞过度增殖,侵袭能力增加;相反,敲除该基因,细胞增殖和侵袭活性被抑制。结论:Sirt1在肝癌组织中高表达并且介导肝癌细胞增殖和侵袭活性。该基因在肝癌组织中的过量表达有助于肝癌的临床诊断,同时Sirt1在肝癌的恶性肿瘤生物活性中发挥着重要的作用,因此,Sirt1是一个潜在的治疗肝癌的药物作用靶点,为开发新的抗肿瘤药物提供了新的治疗靶点。; 熊伟民李明峰宋佳鸿岳海燕席素娟李朝燕; 关键词：SIRT1 肝癌 HEPG2细胞增殖

熊伟民

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