牛宪立
- 作品数：28 被引量：110H指数：6
- 供职机构：遵义医学院珠海校区更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金教育部重点实验室开放基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 应用ITS序列对中药材红芪进行鉴定的有效性分析被引量：4
- 2013年
- 目的应用ITS序列对中药材红芪进行鉴别,以验证DNA条形码技术从分子水平鉴定中草药的可行性。方法提取中药材红芪的总DNA,扩增其rDNA中ITS序列并测序,采用软件CodonCode Aligner对测序峰图进行校对拼接。以相似性搜索法,K-2P进行比对分析及用MEGE5.1软件计算种间遗传距离,并构建NJ系统聚类树直观获得鉴定结果。结果中药材红芪与同属物种K-2P遗传距离在0.004,中药材红芪与黄芪的K-2P遗传距离为0.153;所构建的NJ系统发育树能将中药材红芪与其他相关物种进行有效区分。结论中药材红芪的ITS序列可作为其分子水平鉴定依据,验证了ITS条形码技术对中药材鉴定的有效性。
- 魏妮娜王晓明牛宪立姬可平
- 关键词：红芪RDNAITS序列
- 贵州地道药材淫羊藿rDNA ITS序列的分析研究被引量：2
- 2013年
- [目的]通过对贵州桐梓淫羊藿rDNA ITS序列(包括ITS1、5.8S和ITS2)的测序分析,获得地道药材淫羊藿在分子水平上鉴定的参考标准。[方法]用改良的CTAB法提取淫羊藿总DNA,PCR扩增ITS序列后直接测序,并与Genbank中其他地区淫羊藿种的ITS序列进行序列同源性分析。[结果]淫羊藿rDNA ITS序列长约703 bp,其中ITS1长249 bp,ITS2长247 bp,序列间共有16个变异位点。[结论]淫羊藿rDNA ITS序列的确定可应用于地道药材淫羊藿的鉴定,可作为从分子水平进行鉴定中药淫羊藿的分子标记之一。
- 张建新牛宪立
- 关键词：淫羊藿分子标记ITS序列
- 分子遗传标记技术在中药材鉴定中的应用被引量：1
- 2011年
- 分子遗传标记技术在中药材品种鉴别中的应用是中药现代化研究的一个重要方面,本文回顾国内外中药分子标记鉴定研究的历史及现状,分析了目前分子标记在中药鉴定应用中存在的问题并提出建议,进而展望这项技术应用的前景。中药材质量的规范化,为中药材遗传图谱的建立指明方向。
- 梅露露姬可平牛宪立吕国庆
- 关键词：中药材分子遗传标记中药鉴定
- 黄连水煎液对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用被引量：3
- 2015年
- 为了探究黄连水煎液对小鼠脑组织急性缺血再灌注损伤的保护作用,我们将50只小鼠随机分为5组分别是:假手术对照组、模型对照组(用玻璃分针分离两侧颈总动脉和迷走神经,结扎法同时结扎颈总动脉,造成小鼠急性脑组织缺血再灌注损伤)、黄连水煎液治疗组(25 mg/m L,50 mg/m L,100 mg/m L)。各治疗组分别灌胃给予上述浓度黄连水煎液,模型对照组和假手术对照组给予生理盐水,上述各组均灌胃7 d;在灌胃结束后,断头取出脑组织,制备脑组织匀浆,测定脑组织中Evan's蓝含量及抗氧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:缺血再灌注后小鼠脑组织Evan's蓝含量升高,SOD活性降低,MDA含量增高。用药后小鼠脑组织Evan's蓝含量降低,SOD活性升高,MDA含量降低。因此,黄连水煎液能改善小鼠脑组织缺血区的血流量,减轻急性脑缺血的损伤,对脑缺血再灌注损伤有保护作用。
- 许朋牛宪立魏妮娜姬可平
- 关键词：黄连脑缺血再灌注SODMDA
- ITS序列作为DNA条形码在中药鸡骨草中的应用被引量：6
- 2012年
- 以广西和广东的九种中药鸡骨草（Abrus cantoniensis）为材料,利用改良的 CTAB 法进行总 DNA 的提取,应用通用引物对其 rDNA 的内转录间隔区（ITS）序列进行 PCR 扩增,得到9种植物的 ITS 序列,对所得序列进行分析并申请登录到 GenBank,已获得登录号.结果表明,序列的全长为692~702 bp,其中 ITS2为211~212 bp;中药鸡骨草的混淆品小叶黑面神（Breynia vitis-idaea）和其同科同属植物相思子（Abrus precato-rius）的 ITS2序列与中药鸡骨草差异很大;用遗传距离和建立邻接树这两种方法对序列进行分析,都证明了ITS2序列可以作为豆科植物的 DNA 条形码序列;ITS2序列的种间差异为豆科植物的种间鉴别和建立比较合理的 DNA 条形码体系提供较好的依据.
- 王晓明牛宪立魏妮娜姬可平
- 关键词：中药鸡骨草ITS序列DNA条形码
- 硕士研究生分子生物学实验技术教学改革初探被引量：2
- 2012年
- 为提高硕士研究生分子生物学实验技术的教学质量,在教学内容的选择、教学方法的改进、实验设施的分配与利用、考核体制的建立等方面进行改革,取得了较好效果,为研究生今后的科学研究和实际应用奠定基础。
- 邵敏王燕吕延成钟世军牛宪立
- 关键词：分子生物学实验教学教学改革硕士研究生
- 贵州苗药头花蓼的rbcL序列分析被引量：1
- 2018年
- 为头花蓼的分子生物学鉴定提供依据,用改良的CTAB法提取贵州不同产地野生和栽培的头花蓼基因组DNA,采用通用引物对不同来源的头花蓼的rbcL序列进行PCR扩增,对扩增产物进行碱基序列测定,运用Clustal X和DNAMAN软件对目的序列进行序列比对和聚类分析。结果表明:改良的CTAB法可有效提取植物总DNA(OD260/OD280为1.1~2.0),rbcL序列长度为979~985bp,目的序列具有高度同源性;测序结果提交NCBI获得GenBank序列号为GP215865-870。rbcL序列信息可作为分子水平鉴定头花蓼的参考依据。
- 牛宪立魏妮娜梅露露彭冬冬曾婷婷
- 关键词：头花蓼RBCL序列聚类分析
- 人蔗糖酶蛋白在大肠杆菌的诱导表达与纯化被引量：3
- 2015年
- 目的构建人蔗糖酶(h SUC)基因原核表达载体,诱导表达获得融合蛋白。方法采用反转录PCR法扩增得到h SUC基因片段,并将其克隆到表达载体p ET-28a(+)中,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导在大肠杆菌中表达,采用Ni柱亲和层析纯化重组蛋白,对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果克隆得到1482 bp目的基因,酶切和测序证实h SUC基因片段成功插入到p ET-28a(+)表达载体。表达的融合蛋白质相对分子质量(Mr)为61 240,Western blot结果显示融合蛋白可以与h SUC抗体特异性结合。结论成功在大肠杆菌中表达和纯化h SUC融合蛋白。
- 邵敏王新颖张青峰牛宪立王燕周鹤峰葛正龙
- 关键词：蔗糖酶Α-葡萄糖苷酶大肠杆菌蛋白纯化
- 不同地区毛鸡骨草与鸡骨草rbcL序列差异分析被引量：2
- 2013年
- 应用改良CTAB法提取不同产地毛鸡骨草与鸡骨草的总DNA,PCR扩增其rbcL序列并测序,应用MEGE5.1软件作序列同源性分析,计算遗传距离并构建系统发育邻接树。结果表明,毛鸡骨草与鸡骨草各具为一支,有亲缘关系,可见rbcL序列可成功区分两者。因此,rbcL序列可以作为鸡骨草的DNA条形码。
- 魏妮娜王晓明牛宪立姬可平
- 关键词：鸡骨草毛鸡骨草RBCL序列
- 贵州苗药头花蓼rDNA ITS序列分析被引量：1
- 2013年
- 以改良CTAB法提取头花蓼的基因组DNA，采用通用引物对不同来源头花蓼的rDNAITS序列进行PCR扩增、测序和聚类分析。结果表明，不同来源头花蓼有13处变异位点，序列长度变异范围为661--666bp，序列差异主要集中在ITSl区与ITS2区。rDNAITS序列可作为分子水平鉴定头花蓼的参考依据。
- 牛宪立梅露露姬可平王晓明魏妮娜
- 关键词：头花蓼RDNAITS序列聚类分析
