王健美 作品数:51 被引量:118 H指数:6 供职机构: 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 文化科学 医药卫生 更多>>
转录因子AtWRKY28亚细胞定位及在非生物胁迫下的表达分析 被引量:5 2012年 WRKY转录因子在调控植物逆境诱导反应、生长发育及信号转导等方面发挥着重要的分子生物学功能。对转录因子AtWRKY28进行了亚细胞定位,并采用荧光定量PCR技术,对其进行表达分析。结果表明:AtWRKY28在细胞核中行使功能且其表达受多种非生物逆境胁迫因子的影响,其中受机械损伤、高盐的诱导尤为明显,说明该基因可能在响应逆境胁迫中发挥一定的功能。此外,对启动子序列的生物信息学分析发现,AtWRKY28基因的启动子包含多个与非生物逆境反应相关的顺式作用元件。 钟贵买 伍林涛 王健美 杨毅 李旭锋关键词:亚细胞定位 非生物胁迫 启动子分析 AtVDAC2参与拟南芥盐胁迫信号应答过程 被引量:3 2012年 为了探索VDAC在盐胁迫信号传递途径中可能的传递关系,以AtVDAC2转基因拟南芥过量表达和抑制表达株系为材料,初步探索盐胁迫过程中该基因参与信号传递的方式.实验分析了NaCl处理对种子萌发的影响、Ca^(2+)对NaCl胁迫下种子萌发的影响,以及NaCl对气孔运动的影响和盐胁迫相关基因的表达水平.实验结果指出,AtVDAC2基因表达水平变化影响了拟南芥对NaCl的敏感性:高表达的AtVDAC2使得拟南芥种子对NaCl敏感性提高,种子萌发率降低,气孔关闭较快;而低表达的AtVDAC2使得拟南芥对NaCl敏感性降低,种子萌发率高,气孔不易关闭.在NaCl胁迫下添加Ca^(2+),提高了敏感株系种子的萌发率,因而推测Ca^(2+)帮助AtVDAC2转基因拟南芥过量表达株系平衡下游的胁迫应答.用实时荧光定量PCR检测盐胁迫应答相关基因SOS1,SOS2的表达水平,发现AtVDAC2的高表达引起了下游应答基因SOS1,SOS2表达水平的相应提高;相反AtVDAC2的抑制表达则导致SOS1,SOS2表达水平下降.由此说明,AtVDAC2参与了拟南芥盐胁迫应答过程. 文国琴 刘志斌 李旭锋 王健美 杨毅关键词:拟南芥 NACL 信号传递 以培养创新人才为目标的学分制指导老师工作体系建设与实践 被引量:5 2012年 培养创新人才,是民族进步和国家振兴的需要。建立学分制指导老师制度符合培养创新人才的基本特征。本文就建立学分制指导老师的目的意义、体系构建等开展研究,并就实施效果及出现的问题进行讨论。 唐琳 赵欣平 王健美 吴羽纺关键词:学分制 指导老师 转录因子AtWRKY28在拟南芥与甘蓝链格孢菌(Alternaria brassicicola)亲和性互作中的功能分析 被引量:2 2012年 WRKY是植物特有的一类转录因子,是一个超级大家族,与植物多种逆境胁迫应答密切相关,在植物防御病原菌的侵染中发挥十分重要的作用。拟南芥转录因子WRKY28属于WRKY家族的成员,包括一个WRKYGQK核心序列和一个Cys2His2锌指型结构。为了鉴定拟南芥WRKY28的功能,构建了反义抑制表达株系和转基因过表达株系并进行抗病性鉴定。研究表明,反义抑制表达株系降低了对腐生型真菌甘蓝链格孢菌(Alternaria brassicicola)的抗性,而转基因过表达株系提高了对甘蓝链格孢菌的抗性。由此可见,转录因子WRKY28参与了拟南芥对甘蓝链格孢菌的免疫应答,是其抗病反应中的一个正调控因子。 伍林涛 钟贵买 王健美 李旭锋 宋旭 杨毅关键词:拟南芥 WRKY转录因子 油菜BnRCH基因提高转基因拟南芥的耐盐性研究 被引量:6 2013年 为探索本实验室从甘蓝型油菜中克隆到的BnRCH基因在植物耐盐中的作用,比较了NaCl胁迫下转基因与野生型拟南芥在萌发及幼苗生长的差异.结果表明:在100 mMNaCl处理下,BnRCH转基因拟南芥种子萌发率比野生型高3~5倍;盐胁迫后野生型拟南芥幼苗首先表现出枯萎、白化现象;除去盐胁迫后,转基因拟南芥幼苗恢复生长状况明显优于野生型.本实验结果表明BnRCH基因能够提高转基因拟南芥的耐盐性. 陈凤莲 刘志斌 王健美 李旭锋 杨毅关键词:盐胁迫 拟南芥 萌发率 幼苗生长 苦荞蛋白磷酸酶2C家族的鉴定及表达分析 被引量:2 2021年 为了研究苦荞蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的成员和分类,及后续探究其在苦荞生长发育中的功能,本文利用生物信息学方法对苦荞PP2C家族进行鉴定、分类,并对其基因结构、保守基序、分子进化等进行分析.结果表明,苦荞PP2C家族有81个成员,划分为A-K的11个亚族,并且在同亚族中序列特征相似,而不同亚族间序列特征有一定差异;苦荞PP2C家族有14次基因重复事件.此外,qRT-PCR分析结果表明其A亚族基因在苦荞根、茎、叶、花、果中均有表达,除FtPP2C44外的8个基因在苦荞花、果中表达量较高;在苦荞幼苗中,除FtPP2C08外的8个基因均受ABA诱导表达量上调.上述结果揭示了苦荞PP2C家族的成员组成、序列特征、扩增和其A亚族基因的组织表达模式及受ABA诱导表达情况. 刘耀东 肖书雅 王安虎 刘宇 方阳 李小意 刘志斌 李旭峰 王健美 杨毅关键词:苦荞 蛋白磷酸酶2C 脱落酸 拟南芥AtHHR2与DREB2C的相互作用研究 2018年 已有研究表明拟南芥Highly Homologous RING domain 2(At5g43200,命名为AtHHR2)基因在盐胁迫中起正调控作用,并且其同源基因AtHHR3基因在酵母双杂交实验筛选中与DREB2C基因有相互作用.本研究利用体外、体内蛋白质相互作用实验以及生物化学方法进一步探究了AtHHR2的功能性.体外Pull-down实验证实了AtHHR2与DREB2C有体外的相互作用.体外泛素化实验进一步验证了它们之间的相互作用,且AtHHR2起到E3连接酶的作用.为了进一步确定它们的关系,我们用双分子荧光互补实验,在体内分别验证了AtHHR2与DREB2C之间确实有相互作用.综上所述在拟南芥中AtHHR2与DREB2C有相互作用关系,且AtHHR2起到E3连接酶的作用. 蔡潇潇 刘志斌 王健美 李旭锋关键词:RING FINGER E3连接酶 拟南芥 芸苔EPSPs基因cDNA的克隆和表达载体的构建 被引量:4 2004年 作者从芸苔(Brassicacampestris)中用RT PCR方法获得了EPSPs基因的cDNA 与其他物种中的EPSPs基因进行了比对和分析发现:芸苔EPSPs基因的cDNA与欧洲油菜的同源性最高,为93%,与水稻同源性最低,仅为64% 将芸苔EPSPs的ORF片段插入到GTK融合表达载体中。 游大慧 骞宇 王健美 郭经宇 杨毅 李旭锋关键词:芸苔 草甘膦 RT-PCR 油菜细胞质雄性不育相关基因的筛选 被引量:7 2008年 甘蓝型油菜波利马(Brassica napuspol.)细胞质雄性不育系是一种很有实用价值的油菜不育类型.目前关于其分子机制的研究已证实,线粒体ATP合成酶的一个亚基ATP6与其雄性不育相关.本实验以ATP6作为诱饵蛋白,应用酵母双杂交共转化的方法筛选与ATP6相互作用的蛋白质.在获得的阳性克隆中,发现了一个与tAPX基因及其表达的蛋白都具有较高同源性.它是活性氧清除的重要酶类,很可能与细胞质雄性不育间建立起了某种联系. 向俊蓓 刘志斌 王艳 岳渝飞 王健美 李旭锋 杨毅关键词:酵母双杂交 细胞质雄性不育 ATP6 H2O2 利用酵母双杂交系统研究甘蓝型油菜APX和ATP之间的相互作用 被引量:1 2009年 抗坏血酸过氧化物酶(APX)是植物中抗坏血酸-谷胱甘肽(ASA-GSH)循环中清除逆境条件下产生的H2O2的关键酶之一。为探索APX在细胞质雄性不育(CMS)中的作用机理,本实验通过构建含不同长度的APX cDNA序列的pGADT7融合载体,利用酵母双杂交系统分析ATP6和APX之间的相互作用及其作用位点,结果显示APX的C端250~439位氨基酸序列与ATP6的氨基酸序列具有相互作用。 李志 刘志斌 向俊蓓 岳渝飞 王艳 王健美 杨毅 李旭峰关键词:酵母双杂交 ATP6 抗坏血酸过氧化物酶