王刚 作品数:38 被引量:107 H指数:6 供职机构: 青海大学附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 青海省科技厅应用基础研究项目 青海省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
低氧促进人脐带血间充质干细胞向神经细胞分化 2013年 目的探讨低氧环境对脐带血间充质干细胞诱导分化成神经细胞的促进作用。方法收集4例志愿者脐带血,分离获得间充干细胞,体外扩增培养。研究分为常氧组、常氧诱导组、低氧组、低氧诱导组。研究低氧诱导培养的脐带血间充质干细胞组与对照组比较在细胞生物学特征、诱导分化能力等方面的差异。结果在5%含氧量条件下细胞的增生能力不同程度的提高;在诱导成神经细胞的过程中,低氧诱导的间充质干细胞向神经细胞的分化能力增强。神经细胞表面标记Nestin、NF-M表达阳性。与常氧诱导的脐带血间充质干细胞组比具有显著性差异(P<0.05)。结论低氧条件可以提高脐带血间充质干细胞向神经细胞分化的产率。 王海燕 王刚 张晓岩 李菊英 贺菊香关键词:低氧 脐带血间充质干细胞 神经细胞 分化 雪灵芝粗多糖对小鼠免疫细胞增殖与功能的体外激活作用 被引量:8 2017年 为观察雪灵芝粗多糖(Arenaria kansuensis crude polysaccharide,AKCP)对体外培养的小鼠脾淋巴细胞、NK细胞和腹腔巨噬细胞增殖与功能的影响。以不同浓度AKCP作用于体外培养的上述细胞48 h,采用中性红吞噬实验及NO释放实验检测巨噬细胞功能,MTT法检测脾淋巴细胞增殖及NK细胞杀伤活性,流式细胞术检测脾淋巴细胞CD3^+、CD4^+、CD8^+亚群,ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-2和IFN-γ水平。结果显示,AKCP各浓度组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性和NO释放量、脾淋巴细胞刺激指数及培养上清中IFN-γ水平、NK细胞杀伤活性均高于空白对照组(P<0.05);AKCP中浓度组脾淋巴细胞CD3^+、CD4^+亚群及培养上清中IL-2水平也明显升高(P<0.05)。提示AKCP对小鼠免疫细胞的增殖与功能具有体外激活作用。 高笑笑 王刚 张华 贾霜凯 张海燕 连紫宛关键词:雪灵芝 多糖 免疫 体外 柴达木黑果枸杞花青素对中波紫外线照射后体外培养人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及机制研究 2023年 目的:研究柴达木黑果枸杞花青素对中波紫外线(UVB)照射后体外培养人皮肤成纤维细胞(HSF)衰老的保护作用及衰老相关基因p53、p21、微RNA(miR)-34c和沉默信息相关调节因子(SIRT)1 mRNA表达水平的影响。方法:取对数生长期的HSF,分为对照组、UVB照射组,柴达木黑果枸杞花青素低剂量组(0.1 g/L)、柴达木黑果枸杞花青素中剂量组(0.5 g/L)和柴达木黑果枸杞花青素高剂量组(1.0 g/L)。UVB照射前24 h用不同浓度的柴达木黑果枸杞花青素预处理HSF。UVB照射后72 h,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测衰老细胞比例,定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中衰老相关基因p53、p21、miR-34c及SIRT1 mRNA的表达水平。结果:与对照组相比,UVB照射组细胞SA-β-gal染色阳性率及p53、p21、miR-34c和SIRT1 mRNA表达水平均升高(P<0.05)。与UVB照射组相比,柴达木黑果枸杞花青素(0.1 g/L、0.5 g/L和1.0 g/L)组细胞SA-β-gal染色阳性率,p53、p21、miR-34c及SIRT1 mRNA的表达水平,均呈剂量依赖性降低(P<0.05)。结论:黑果枸杞花青素可能通过下调p53/miR-34c正反馈调节来减轻HSF的照射损伤,进而发挥抗衰老作用。 王丽雯 燕华玲 张美红 李喃欣 魏丽 万光梅 张钦宁 王刚关键词:花青素 中波紫外线 人皮肤成纤维细胞 藏雪莲水提取物减轻中波紫外线辐射后HaCaT细胞凋亡的体外研究 被引量:4 2016年 目的:研究藏雪莲水提取物减轻中波紫外线(UVB)照射人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)后细胞凋亡的机制。方法:MTS法检测细胞增殖活性,台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况,酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力、细胞丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)含量,Western Blot及免疫荧光法检测细胞凋亡相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内钙离子(Ca2+)含量。结果:藏雪莲水提取物可以促进Ha Ca T增殖,降低细胞蓝染数量,降低SOD、CAT活性及GSH含量,增加MDA含量(P<0.05),升高B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)蛋白,降低Bcl-2相关x(Bax)蛋白及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达(P<0.05),降低UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度,升高线粒体膜电位。结论:藏雪莲水提取物能够降低Ha Ca T细胞凋亡来减轻UVB辐射后Ha Ca T细胞的凋亡。 王丽雯 孙娟 燕华玲 王刚 焦阳 郭砚关键词:中波紫外线 细胞凋亡 雪灵芝粗多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响 被引量:29 2017年 目的探讨雪灵芝粗多糖(arenaria kansuensis crude polysaccharide,AKCP)对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法将小鼠随机分为5组:空白对照组、环磷酰胺(CTX)模型组、AKCP高、中、低剂量组。除空白对照组外其他4组采用腹腔注射CTX建立小鼠免疫低下模型。各组分别给予蒸馏水、不同剂量AKCP灌胃,10 d后处死小鼠,检测体质量增率、胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖活性和CD3^+/CD4^+/CD8^+亚群、NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、血清中IL-2和IFN-γ水平。结果 CTX组除NK细胞杀伤活性外的上述各项指标均较对照组明显降低(P<0.05),不同剂量AKCP作用可减轻CTX所致的各项指标下降,其中AKCP高、中剂量组体质量增率、胸腺指数、脾淋巴细胞CD3^+及CD3^+CD8^+亚群、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数均较CTX模型组明显升高(P<0.05),AKCP低剂量组脾脏指数、脾淋巴细胞增殖指数以及IL-2和IFN-γ水平显著高于CTX模型组(P<0.05)。结论 AKCP对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的免疫功能有保护作用。 高笑笑 王刚 杨歆睿 贾霜凯 张海燕关键词:雪灵芝 多糖 环磷酰胺 免疫抑制 小鼠 血清D-二聚体、PAF-AH在皮肤血管炎辅助诊断和疗效评判中的作用 2024年 目的探讨皮肤血管炎(CV)患者血清D-二聚体、血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)水平在治疗过程中的变化,评价其辅助诊断和疗效评判价值。方法选取2020年2月至2023年2月该院收治的84例CV患者作为观察组,其中变应性CV 31例,过敏性紫癜32例,结节性CV 21例,选取同期体检的50例健康人作为对照组,比较两组血清D-二聚体、PAF-AH水平。观察组治疗2周后评估疗效,并比较不同疗效患者D-二聚体、PAF-AH水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析D-二聚体、PAF-AH诊断CV及评估疗效的效能。结果与对照组比较,观察组D-二聚体水平更高,PAF-AH水平更低(P<0.05)。变应性CV、过敏性紫癜、结节性CV患者D-二聚体水平高于对照组,PAF-AH水平低于对照组(P<0.05)。D-二聚体、PAF-AH诊断CV的曲线下面积(AUC)值为0.754、0.712(P<0.05),二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗2周后痊愈11例(13.10%),显效23例(27.38%),有效27例(29.76%),无效23例(27.38%),临床有效率为72.62%。与治疗前比较,治疗后观察组D-二聚体水平降低,PAF-AH水平升高(P<0.05)。与无效患者比较,痊愈、显效、有效患者D-二聚体水平更低,PAF-AH水平更高(P<0.05)。D-二聚体、PAF-AH评估疗效的AUC值为0.785、0.718(P<0.05)。结论CV患者存在血清D-二聚体升高,PAF-AH降低,二者可作为CV辅助诊断、疗效判断的参考依据。 罗文娟 王刚关键词:皮肤血管炎 血小板活化因子乙酰水解酶 疗效 ROC曲线 多形性日光疹患者负性情绪与神经生长因子和P物质水平的相关性 被引量:4 2012年 目的探讨多形性日光疹(PLE)患者焦虑和抑郁负性情绪与血清神经生长因子(NGF)和P物质(SP)水平的关系。方法应用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对多形性日光疹患者进行问卷测评,双抗夹心酶联免疫吸附法测定其血清中NGF和SP水平,并与正常人作比较。结果 PLE患者焦虑和抑郁评分高于正常人,且与血清NGF和SP水平呈正相关。结论 PLE患者焦虑和抑郁负性情绪对病情影响与血清NGF和SP水平变化可能有关联。 王刚 燕华玲 冶娟 王永 李生存 哈筱梅 朱世文 马文宇 郭砚关键词:多形性日光疹 抑郁 神经生长因子 P物质 雪灵芝水提物对人胃癌MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:6 2013年 目的探讨雪灵芝水溶性提取物(arenaria kansuensis aqueous extract,AKAE)对人胃癌细胞株MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养的MGC-803细胞经不同浓度AKAE处理,采用MTT法检测受试细胞增殖水平;应用流式细胞术检测AKAE处理12h后各组细胞的细胞周期;Western blot检测不同浓度、不同时间AKAE处理组MGC-803细胞中cyclin D1蛋白表达水平;实时定量PCR检测各组MGC-803细胞中cyclin D1、p16和p21基因的mRNA相对表达量。结果AKAE对体外培养的MGC-803细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用(P〈0.05),IC50为(0.134±0.005)mg/ml;经AKAE处理12h,0.8mg/ml组MGC-803细胞的G1期细胞比例高于对照组、S期细胞比例低于对照组(P〈0.05);(0.2~0.8)mg/ml浓度的AKAE处理,对MGC-803细胞中cyclin D1的蛋白及mRNA表达具有明显抑制作用(P〈0.05);AKAE促进MGC-803细胞中p16、p21基因mRNA表达,0.2mg/ml处理组p16、p21mRNA相对表达量分别为对照组的3.3倍和18.5倍。结论雪灵芝水提物(AKAE)对MGC-803细胞增殖具有抑制作用,其机制与G1期阻滞和对G1期相关因子表达的影响有关。 王刚 张华 杨歆睿 王海燕 贺菊香 吉利宾关键词:雪灵芝 增殖 细胞周期 青海枸杞多糖对黑色素瘤A375细胞株生物学行为影响研究 马文宇 王刚 郭砚 冶娟 朱世文 王永 哈筱梅 李生存 吴邓婷 王丽雯 陈晓昱 该课题立足青海实际,采用细胞培养工作模型,观察不同浓度青海产枸杞多糖干预后A375细胞增殖抑制率、细胞形态变化,检测其凋亡指数、黏附抑制率和侵袭抑制率的改变等实验观察其对黑素瘤A375细胞侵袭转移的作用,探讨青海产枸杞多...关键词:关键词:枸杞多糖 肿瘤治疗 中药治疗 藏药雪灵芝体外肿瘤抑制与淋巴激活效应的分子机制及量效关系 王刚 王海燕 张华 贺菊香 梁宏 杨歆睿 吉利宾 该研究成果为青海省科技厅应用基础研究项目(2010-Z-722),通过体外研究途径,采用细胞生物学研究方法,观察雪灵芝水提物对肿瘤细胞、正常组织来源细胞及淋巴细胞的细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,采用分子生物学方法,...关键词:关键词:藏药 雪灵芝 抗肿瘤成分