王林发
- 作品数：13 被引量：25H指数：4
- 供职机构：华东师范大学更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 安舒克栓酶的工艺及药效学研究
- 吴自荣王林发戚蓓静钱旻黄静彭欣夏方为军彭沂非王劲钮洪光张嘉敏张美华徐频朱欣华谢芳
- 优化发酵工艺，使酶产量提高5-6倍;安舒克栓酶的纯度达99.86%，收率为64%;对安舒克栓酶的药效学进行了体内、体外、口服、静注研究，包括体外溶血块、体外抗栓溶栓、动物体内抗栓、体内、体外对凝血系统的影响试验，体内抗栓...
- 关键词：
- 关键词：血栓栓塞性疾病
- 慢分泌突变基因的构建及其应用研究
- 1992年
- 利用同阅读框插入突变方法,在编码枯草杆菌中性蛋白酶基因(nprE)的前肽部分插入了一段约300bp的人体cDNA顺序。此顺序对nprE基因的体内转译及基因产物的加工,折叠无明显影响,但使蛋白质分泌速率下降了10倍以上。本文还报道应用此慢分泌突变基因通过诱变得到了影响枯草杆菌蛋白酶产量的温度敏感突变体,以及对此突变体初步鉴定的结果。
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- 关键词：枯草杆菌蛋白质分泌中性蛋白酶
- 溶栓剂
- 本发明涉及采用基因工程技术，通过PCR基因扩增从特定枯草芽孢杆菌中“钓”出能强烈分解纤维蛋白的蛋白水解酶基因，再经转化获得基因工程菌，由基因工程菌经培养发酵分离，纯化，获得溶栓酶制剂。经试验，表明本溶栓剂具有溶解纤维蛋白...
- 吴自荣戚蓓静彭欣夏黄静方为军王林发
- 文献传递
- 一种枯草杆菌克隆载体及其构建
- 一种枯草杆菌克隆载体pNC<Sub>3</Sub>及其构建方法，该克隆载体利用枯草杆菌中性蛋白酶基因作指示基因和前肽区域具有可缩性，由去除部分前肽区域或在前肽区域中插入带有多克隆位点的DNA片段构建而成，具有重组体筛选标...
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- 文献传递
- 一种新的免疫-PCR系统的建立和应用研究被引量：7
- 1997年
- 把PCR技术作为指示系统引入免疫检测中，建立了免疫－KR技术。在本研究中，以PEI作交联剂，首次成功地将特异性抗体直接与DNA交联，构建了三种Ab－DNA基因探针，组成新的免疫-PCR检测系统．此三种特异性汕Ab-NDA探针可用于检测三种相应抗原。检测HSA抗原的最低含量可达10－10mg／ml，灵敏度比ELISA高106倍。
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- 关键词：免疫-PCR免疫学检验聚合酶链反应
- 一种新型免疫PCR基因探针的构建及其在诊断中的初步研究被引量：9
- 1998年
- 利用叶绿素分子 (chlorophyll)作为共价连接蛋白质与核酸的中间分子 ,构建了甲胎蛋白 (α fetoprotein ,AFP)抗体的基因探针 ,并用构建的基因探针通过免疫PCR对AFP进行了诊断的初步研究 .结果表明 ,其检测灵敏度比ELISA高 1 0 4～1 0 5 倍 .基因探针的构建方法完全避免了蛋白质与有机溶剂的接触 ,基本保持了抗体的原有活性 ;并且人为地将蛋白质定向地锚定在dsDNA分子上 ,使PCR扩增不受任何影响 .构建的基因探针采用一定的保藏方法 ,室温中活性保存至少 6个月 .构建方法精简 ,成本低 。
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- 关键词：基因探针免疫PCR抗体抗原
- 以叶绿素分子作连接子构建基因探针的方法
- 用叶绿素分子(chlorophyll)作为连接子把蛋白质等生物活性分子与核酸共价交联来构建的基因探针，可广泛地应用于分子生物学研究、生化分析、临床检测等生命科学研究与应用的各个领域。由此法构建基因探针具有操作简便，稳定性...
- 吴自荣乔生军王林发
- 文献传递
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD－1L基因的质粒pET32a(+...
- 赖玉平吴自荣黄静王林发左翼李骏
- 文献传递
- 溶栓剂
- 本发明涉及采用基因工程技术,通过PCR基因扩增从特定枯草芽孢杆菌中“钓“出能强烈分解纤维蛋白的蛋白水解酶基因,再经转化获得基因工程菌,由基因工程菌经培养发酵分离,纯化,获得溶栓酶制剂。经试验,表明本溶栓剂具有溶解纤维蛋白...
- 吴自成戚蓓静彭欣夏黄静方为军王林发
- 文献传递
- 通用型免疫-聚合酶链反应系统的建立及应用被引量：9
- 1997年
- 目的构建基因探针，建立通用型免疫－聚合酶链反应（ＰＣＲ）系统，检测极微量抗原抗体。方法以聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）作交联剂，构建成ＳＰＡ－ＤＮＡ基因探针，直接把生物素（Ｂｉｏ）与ＤＮＡ连接构建成Ｂｉｏ－ＤＮＡ基因探针，应用于免疫－ＰＣＲ中，分别对抗原抗体进行检测分析。结果建立了通用型抗体抗原免疫－ＰＣＲ检测系统。分别用于人血清蛋白（ＨＳＡ）抗体抗原检测，ＨＳＡ抗体检测的最高稀释度可达１１０９，ＨＳＡ抗原检测极限可达１０－１０ｍｇ／ｍｌ，分别比类似条件下的酶联免疫吸附测定灵敏度高１０５和１０６倍。结论建立的免疫－ＰＣＲ系统灵敏度高，可用于各种极微量抗原抗体的检测。
- 吴自荣陈阜东戚蓓静王林发
- 关键词：聚合酶链反应DNA探针生物素抗原抗体
