王毓三
- 作品数：22 被引量：83H指数：5
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- 肺癌组织和支气管切缘p53基因突变研究被引量：7
- 2000年
- 目的 检测肺癌组织和支气管切缘p5 3基因突变 ,以预测肺癌手术切除的效果和局部复发。方法 用PCR SSCP方法 ,检测 5 0例肺癌和 7例肺部良性疾病手术切除标本的支气管切缘 (切缘病理无癌残留 )、病灶组织和正常肺组织中的p5 3基因突变 ,并随访了解术后切缘癌复发与癌复发转移情况。结果 14例 ( 2 8% )肺癌支气管切缘和 2 8例 ( 5 6% )肺癌组织存在p5 3基因突变 ,正常肺组织和良性病变肺组织未发现p5 3基因突变。肺癌组织p5 3基因突变以小细胞癌 ( 10 0 % )最高 ,次为鳞癌 ( 65 % ) ,腺鳞癌 ( 60 % ) ,腺癌 ( 3 8.9% )。p5 3基因突变以TNM分期的Ⅲ期 ( 72 .7% )最高 ,次为Ⅱ期 ( 5 8.3 % ) ,Ⅰ期( 2 5 % )。支气管切缘p5 3阳性者术后随访 3～ 16月 ,6例 ( 4 2 .9% )发生支气管残端癌复发 ;而p5 3阴性者术后无残端癌复发。肺癌组织p5 3阳性者中有 17例 ( 60 .7% )在随访中发现癌复发转移 ;p5 3阴性者中 5例 ( 2 2 .7% )发现癌复发转移 ,两组复发率有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 检测支气管切缘p5 3基因突变能确诊支气管切缘异常的“分子边界” ,从而早期预测部分肺癌的术后残端癌复发。肺癌组织p5
- 许林程梅俞明锋黄建峰薛开先王毓三
- 关键词：肺肿瘤切缘P53基因
- 神经元特异烯醇化酶琼脂糖电泳测定方法被引量：3
- 1990年
- 本法用琼脂糖凝胶电泳分离烯醇化酶同工酶,利用PK-HK-G6PD 醇偶联艮应系统,显示酶活性区带.经先密度计扫描,报告NSE 区带的百分含量.对各反应物的最佳浓度、最适pH、检测精密度进行了实验探讨.58名健康人血清烯醇化醇同工酶电泳,αα似型占88±5.8%。αr型占11.7±5.7%。未检出rr 型区带.初步临床应用表明肺小细胞癌、肺腺癌患者,血清NSE 区带检出率约50%.
- 龚正华王毓三
- 关键词：烯醇化酶NSE
- 3－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性被引量：7
- 1996年
- 探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度：ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，碘乙酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／Ｌ。最适ｐＨ在７．８～８．０，Ｋｍ为７．２×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。批内ＣＶ：酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为５．７％和１．４％；批间ＣＶ：酶活性在１１．８９Ｕ／Ｌ和１００．０８Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为６．０％和３．３％，酶活性线性范围至少可达１８０Ｕ／Ｌ。健康人６０名，ＡＬＤ活性为４．５３±１．１７（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，男女两组均值无显著性差异。本文对ＴＥＡ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）三种缓冲液用于ＡＬＤ活性测定效果进行了评价，结果表明在ＴＥＡ缓冲液中所测ＡＬＤ活性最高；ＴＥＡ和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ两种缓冲液的浓度在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对ＡＬＤ活性无影响，Ｔｒｉｓ缓冲液在５０ｍｍｏｌ／Ｌ时测得酶活性较高，缓冲液浓度过高或过低。
- 陈江华王毓三
- 关键词：血清醛缩酶酶偶联法
- 基质效应被引量：27
- 2002年
- 王毓三
- 关键词：基质效应
- 烯醇化酶活性测定的三种方法及其评价被引量：3
- 1990年
- 本文介绍烯醇化酶总活性测定的三种方法,并作简要评价.直接分光光度法.最适pH7.4,Km4～7×10^(-5)mol/L,适用于层析液中酶活性的检测.PK-LDH 偶联法和PK-HK-G6PD 偶联法均适用于血清烯醇化酶活性的测定.前者工具酶较少,空白反应低,精密度较好,更适用于常规工作.30名健康人血清烯醇化酶总活性为17.7±7.75U/L。
- 王毓三马莹陈江华
- 关键词：烯醇化酶活性测定
- 3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性被引量：2
- 1999年
- 建立血清醛缩酶活性的３磷酸甘油醛脱氢酶偶联测定法。用底物１， ６二磷酸果糖启动酶促反应， 连续监测ＮＡＤＨ生成速率。反应条件： 温度３７°Ｃ， ｐＨ ８３， 各反应物的终末浓度： 三乙醇胺５０ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ， １， ６二磷酸果糖４５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ， 砷酸钠１０ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ，氧化型辅酶Ⅰ６ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ，３磷酸甘油醛脱氢酶２５００Ｕ／Ｌ，磷酸丙糖异构酶５００ Ｕ／Ｌ，乳酸脱氢酶１５００Ｕ／Ｌ，血清与试剂容积比００４３。参考值ｘ＝ ６７６ Ｕ／Ｌ， ｓ＝ １０３ Ｕ／Ｌ， 本法 （Ｙ） 与３磷酸甘油脱氢酶偶联法 （Ｘ） 相关性： Ｙ＝０８Ｘ＋ ３６， ｒ＝ ０９９３１。
- 陈江华王毓三
- 关键词：醛缩酶酶偶联法血清诊断
- 结合胆红素酶法测定的一种新方法被引量：5
- 2003年
- 目的 建立一种特异性更高的酶法血清结合胆红素 (CB)测定的新方法。方法 在pH5 5、有氟化钠 (NaF)和N 乙酰半胱氨酸 (NAC)的存在下 ,胆红素氧化酶 (BOD)选择性氧化CB ,引起 4 5 0nm吸光度下降 ,计算CB的浓度。结果 批内精密度 ,n =2 0 , x =17 6 5 μmol/L ,s =1 15 ,CV =6 5 2 %和 x =30 1 4 9μmol/L ,s =1 0 1,CV =0 33% ;批间精密度 ,n =2 0 , x =31 5 0 μmol/L ,s =3 12 ,CV =9 90 %和 x =184 12 μmol/L ,s =5 0 1,CV =2 72 % ;线性范围至少可达 32 0 μmol/L ;选择性抑制物的最适浓度 ,NaF 2 5mmol/L ,NAC 2 5mmol/L ;与重氮法的相关性 ,Y (酶法 ) =0 839X (重氮法 ) - 7 96 5 ,r=0 96 90。结论 该研究建立的反应条件 ,能有效地抑制BOD对游离胆红素的“非特异性”氧化 ,提高CB测定的准确性。
- 赵建华王毓三
- 关键词：结合胆红素酶法胆红素氧化酶氟化钠N-乙酰半胱氨酸
- 醛缩酶同工酶琼脂糖电泳测定法被引量：4
- 1997年
- 建立分离血清醛缩酶同工酶的方法。利用不连续缓冲体系琼脂糖凝胶电泳进行分离，ＡＬＤ－ＧＬＡＰＤ酶偶联反应与ＰＭＳ－四唑盐递氢呈色系统来显示酶活性区带。２０名健康成人血清醛缩酶同工酶电泳，结果显示两条清晰的酶活性区带ＡＬＤ－Ａ和ＡＬＤ－Ｂ；同时，实验条件的研究也显示：在ｐＨ８．２、终末反应物浓度ＦＤＰ７ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮＡＤ５ｍｇ／Ｌ和ＧＬＡＰＤ３Ｕ／Ｌ时区带显色最佳。该方法简便、可靠、对临床肝癌及肝硬化的诊断有一定的辅助价值。
- 赵建华王毓三
- 关键词：电泳琼脂糖凝胶血清肝癌肝硬化
- 神经元特异烯醇化酶单克隆抗体的制备
- 1993年
- 用NSE粗制品免疫雌性BALB/C小鼠,经免疫小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞SP 2/0的融合,ELISA法筛选,建立了四株持续分泌抗NSE单抗的杂交瘤细胞。免疫沉淀法,单抗素和柱纯化抗原鉴定等方法证实所分泌单抗对NSE 具有良好的特异性,注入同系小鼠腹腔可诱生含较高效价的抗NSE的腹水。这四株细胞分泌IgG_1亚类抗体、且检查其染色体数目均大于90条。
- 赵建华王毓三陈江华季坤元陈育英
- 关键词：烯醇化酶神经元细胞单克隆抗体
- 血清结合胆红素的酶法测定被引量：8
- 2000年
- 目的 建立用胆红素氧化酶 (BOD)作为催化剂 ,选择性地测定血清结合胆红素 (CB)的新方法。方法 测定条件为 :0 1mol/L甘氨酸缓冲液、pH 10 0 ,BOD活性 0 5～ 0 8U/反应管 ,反应时间 2分钟。结果 线性至少可达到 2 2 0 μmol/L ;精密度为批内CV 1 71～ 3 98%、批间CV 8 0～ 9 72 % ;正常参考值范围为 0～ 3 14μmol/L ;与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的CB测定方法具有良好的分析特异性 。
- 许国荣赵建华王毓三
- 关键词：胆红素胆红素氧化酶胆汁郁积BOD
