王端明
- 作品数：10 被引量：50H指数：3
- 供职机构：石河子大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 巢式PCR检测乳中布氏杆菌被引量：15
- 2008年
- 本研究建立了检测乳中布氏杆菌omp22基因的巢式PCR方法,经过反复操作验证该检测方法有较好的重复性和稳定性。对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、棒状杆菌、绿脓杆菌等羊常见菌及羊基因组检测阴性,表明此方法有很好的特异性。该方法有较强的敏感性,羊乳中布氏杆菌的检测灵敏度可达到40CFU/mL乳汁。
- 徐军陈创夫刘建平张辉王远志盛金良曹旭东王端明
- 关键词：布氏杆菌巢式PCR
- Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化状态被引量：3
- 2013年
- 目的研究Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向诱导分化中的甲基化状态。方法全骨髓贴壁筛选法培养小鼠BMSCs,通过形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。骨块接种培养法培养小鼠成骨细胞,采用碱性磷酸酶(AKP)及茜素红进行鉴定。诱导小鼠BMSCs向成骨细胞分化,采用间接免疫荧光染色和RT-PCR法观察Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达情况,甲基化特异性PCR检测Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的甲基化状态。结果分离培养的小鼠BMSCs在体外能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,培养细胞的CD29、c-Kit和CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。诱导10d后的细胞及从小鼠颅骨中分离、培养出的成骨细胞,AKP及茜素红染色呈阳性。间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在小鼠BMSCs定向诱导分化中表达下调。小鼠BMSCs定向诱导分化中Oct-4基因启动子区的CpG岛出现了甲基化。结论成功在体外培养了小鼠BMSCs及小鼠成骨细胞,Oct-4基因可能参与了成体干细胞多潜能性的维持,Oct-4基因在小鼠BMSCs定向诱导分化中的表达下调可能是其启动子区CpG岛甲基化的缘故。
- 王菊符毓豪王维山王端明周宗瑶
- 关键词：OCT-4小鼠骨髓间充质干细胞分化甲基化
- 羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 目的构建羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。方法培养的绵羊肺泡巨噬细胞经羊种布鲁菌05/43株侵染后,以Trizol试剂提取其总RNA,用cDNA文库构建试剂盒构建巨噬细胞的cDNA文库。随机选取cDNA文库中的18个克隆进行表达序列标签(EST)序列测定,测序结果用BlastX和BlastN软件在GenBank蛋白质库和核酸库中进行序列同源性比对。结果构建的cDNA文库的库容量为1.192×106,重组率为95.65%。18个EST测序,12个与CD抗原基因、细胞因子基因、蛋白酶基因等已知功能的基因序列相关,6个为未知功能基因的EST序列。结论成功构建了羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,这将有助于阐明该菌株的致病机制。
- 王远志陈创夫曹旭东盛金良张辉任艳高剑峰王端明
- 关键词：基因文库
- 绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库达到建库要求;所测序列与牛的基因组编码序列同源性最高。在绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞过程中,以50∶1(细菌∶细胞)的个数比,侵染3.5h,能有效构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。
- 王远志陈创夫盛金良张辉曹旭东任艳高剑峰王端明
- 关键词：CDNA文库
- 针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞的抑制作用被引量：3
- 2012年
- 转录因子Oct-4和Survivin是细胞增殖的关键调控因子,构建针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA,并研究其对肝癌细胞及移植瘤的生长抑制作用。合成Oct-4和Survivin基因的shRNA序列,插入腺病毒穿梭载体pDC312,含有shRNA的穿梭载体与腺病毒骨架载体pBHGloxdeltaE13Cre共转染HEK293细胞,经Cre/LoxP位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA;腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1,经Western blotting检测Oct-4和Survivin基因的表达情况,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐染色法(MTT实验)和裸鼠荷瘤实验检测对肿瘤细胞生长的影响。研究结果显示,双靶向重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1能够有效沉默Oct-4与Survivin基因的表达,并且在MTT实验和裸鼠荷瘤试验中都显示出较单一靶向的shRNA腺病毒载体Ad5-Surv-shRNA、Ad5-Oct4-shRNA具有更为明显的肿瘤细胞生长抑制作用。实验结果表明,特异性双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA是一种更为高效的靶向肿瘤基因治疗载体。
- 王端明王敬晗李林芳陈静波苏长青
- 关键词：OCT-4SURVIVINSHRNA肝癌腺病毒
- 肝胆肿瘤细胞中Survivin和Oct-4基因表达相关性及调控机制的研究
- 背景与目的 细胞凋亡是所有组织用来去除受损或多余细胞的必要生理过程。在对恶性肿瘤的深入研究中，人们发现正常上皮细胞的存活需要细胞外基质(ECM)的支持并给予存活信号。若上皮细胞脱离了ECM，细胞则会发生凋亡，这种形式的...
- 王端明
- 关键词：凋亡抑制蛋白SURVIVIN失巢凋亡
- 文献传递
- 基于RU486调控系统的重组腺病毒Ad-NRF2的构建及其体外分析被引量：2
- 2011年
- 目的 构建RU486调控系统介导的重组腺病毒Ad-NRF2,并在H460细胞中进行表达,验证NRF2基因表达是否可调控及表达效率.方法 在腺病毒载体的基础上,引入携带RU486（米非司酮）诱导调控系统的Nrf2基因;用LUC基因及Dsred基因对RU486调控系统进行验证,并通过免疫印迹和RT-PCR技术检测Nrf2的表达情况.结果 LUC和Dsred的表达都随RU486呈剂量依赖性增加;Ad-RUNrf2腺病毒感染H460细胞后,通过RT-PCR及免疫印迹结果显示Nrf2的表达量随着RU486剂量的增加而增加,去除RU486后,Nrf2的表达也随之减弱.结论 携带RU486可调控式Nrf2基因腺病毒构建成功,并且在细胞内RU486能够调节Nrf2因子的表达.
- 蔡旗旗洪广亮邱俏檬李林芳卢中秋吴红平王端明梁欢
- 关键词：氧化性应激腺病毒科基因表达调控
- 肝胆肿瘤细胞转录因子Oct-4的表达对Survivin抗凋亡作用的调控被引量：2
- 2010年
- 对临床原发性肝癌、胆囊癌、胆管癌标本Oct-4和Survivin的表达进行了免疫组化鉴定;进一步建立肝癌、胆囊癌、胆管癌细胞系EHBH-H1、EH-GB1和EH-CA1,利用腺病毒携带Survivin-shRNA或Oct-4基因感染癌细胞系,并利用流式细胞术观察细胞周期和细胞凋亡的变化,探讨转录因子Oct-4与Survivin之间的相互调控及对癌细胞遗传特性的影响。结果表明,临床原发性肝癌、胆囊癌、胆管癌标本Oct-4阳性率达60.7%,Survivin阳性率达75.0%,且两者之间存在明显的正相关关系;特异性shRNA沉默EH-CA1癌细胞Survivin的表达后,其Oct-4表达没有变化,但诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡;EH-GB1癌细胞获得Oct-4表达后,Survivin表达增强,促进细胞周期运行并下调细胞凋亡。实验证实Oct-4可以增强癌细胞Survivin的表达,从而发挥促进细胞周期运行、抑制细胞凋亡的作用,此研究为建立并优化肿瘤基因治疗的策略提供了新的靶点。
- 王端明刘辰姜小清谭蔚锋王敬晗李林芳钱其军苏长青
- 关键词：肝胆肿瘤SURVIVIN细胞周期凋亡
- 大学生科研训练计划存在的问题及对策建议被引量：21
- 2013年
- 大学生科研训练计划(SRTP)是针对在校本科生开展的科学研究训练项目,是在本科教育阶段实施实践教学改革的一项措施。在国外,美国的麻省理工学院鼓励和支持达到一定条件的本科生,参与教师的科学研究项目并且实施运行,这种将科研与教学相结合的培养过程,为学生的创新和开拓能力的施展提供了广阔的舞台。在国内,众多大学借鉴麻省理工学院,从1996年开始创建并实施SRTP。但是,目前,许多高校开展大学生科研训练计划的过程中存在较多问题,本文在计划开展大学生科研训练计划的实践中总结了学生对科研的认识、教师的指导及管理制度等存在的问题,提出了改革人才培养模式、提升教师人才培养能力等对策建议。
- 王菊周宗瑶慕晓玲李思源姜玉峰魏红王端明裴学莲
