苏婕
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：兰州大学第一医院更多>>
- 发文基金：甘肃省中青年科技研究基金甘肃省中医药管理局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氧化苦参碱对脂多糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖p-STAT1/PIAS1信号分子的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察氧化苦参碱对LPS诱导下HMC增殖时p-STAT1、PIAS1蛋白和mRNA表达情况,探讨其相互关系。方法体外培养HMC,分为空白对照组和LPS模型组及氧化苦参碱干预组,培养12、24、48 h时以MTT法检测HMC的增殖情况,ELISA检测细胞上清Col-Ⅳ含量,收集同时段细胞,提取细胞裂解蛋白和mRNA,采用Western blot检测p-STAT1和PIAS1的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测STAT1和PIAS1 mRNA表达。结果LPS组细胞增殖较对照组显著加快(P<0.01),Col-Ⅳ的表达显著高于对照组(P<0.01);氧化苦参碱干预后细胞增殖和Col-Ⅳ的表达显著较模型组降低(P<0.01)。蛋白和mRNA表达情况:LPS诱导下各时间段p-STAT1表达升高,表达量显著高于对照组(P<0.01),经OM干预后表达显著下降(P<0.01);LPS诱导下PIAS1表达量显著降低(P<0.01),经OM干预,与LPS组相比各时间段均显著上升(P<0.01)。结论氧化苦参碱对LPS诱导的人系膜细胞增殖过程中p-STAT1/PIAS1蛋白及mRNA表达有调节作用,氧化苦参碱可能影响JAK/STAT信号转导通路。
- 党红星金玉李宇宁凌继祖苏婕
- 关键词：人肾小球系膜细胞增殖氧化苦参碱JAK/STAT信号通路
- 苦参素对人肾小球系膜细胞磷酸化信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂表达的影响
- 2009年
- 目的观察苦参素对脂多糖（LPS）诱导下人肾小球系膜细胞（HMC）增殖时磷酸化信号传导和转录激活因子3（p-STAT3）、活化的信号传导和转录激活因子3蛋白抑制剂（PIAS3）蛋白和mRNA表达的影响，并探讨其相互关系。方法体外培养HMC，并分为对照组、LPS模型组及苦参素干预组。培养12、24、48h时以MTF法检测HMC的增殖情况：ELISA法检测细胞上清Ⅳ型胶原蛋白（CollV）含量；同时收集同时间点细胞，采用Western印迹法检测p-STAT3和PIAS3的蛋白表达；实时荧光定量PCR法检测STAT3和PIAS3的mRNA表达。结果LPS组细胞增殖较对照组显著加快（P〈0．01），CollV的表达显著高于对照组（P〈0．01）。苦参素干预后细胞增殖和ColIV的表达显著低于模型组（P〈0．01）。LPS诱导12h时细胞p-STAT3表达开始上调，各时间点P—STAT3表达量显著高于对照组（P〈0，01）。苦参素干预后，与同时间点LPS模型组相比显著下调（P〈0．01）。LPS诱导下PIAS3各时间点表达量显著下调（P〈0．01）。苦参素干预后，与同时间点LPS模型组相比均显著上调（P〈0．01）。结论苦参素对LPS诱导HMC增殖过程中p-STAT3蛋白及mRNA表达有下调作用，对PIAS3有上调作用。苦参素可能影响HMC增殖过程中JAK—STAT信号传导通路。
- 党红星金玉李宇宁凌继祖苏婕
- 关键词：氧化苦参碱肾小球系膜细胞STAT3转录因子信号传导
- 苦参碱对脂多糖诱导人胚肾小球系膜细胞STAT1、3及CTGF、PDGF表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察苦参碱(Ma)对脂多糖(LPS)诱导的肾小球系膜细胞(MC)中信号转导子与转录激活子(STAT)分子1、3,结缔组织生长因子(CTGF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响,探讨苦参碱抑制增殖的机制。方法原代培养人胚肾小球系膜细胞并鉴定。实验分为正常对照组、脂多糖(10μg/ml)组、脂多糖(10μg/ml)+苦参碱(320μg/ml)组,分别于12、24、48h采用Real-TimePCR检测STAT1、3、CTGF及PDGF mRNA表达及Western blot检测p-STAT1、3蛋白表达。结果与正常对照组相比,在12、24、48h时间段,10μg/ml的LPS能够促进人肾小球系膜细胞增殖,320μg/ml的Ma对MC均有抑制增殖作用(P<0.01);在12、24、48h,LPS组STAT1、3、CTGF及PDGF mRNA增高,苦参碱处理组较LPS组表达明显降低,且在24、48h抑制明显(P<0.01);LPS组P-STAT1在12、24、48h蛋白表达均上调,p-STAT3在24、48h蛋白表达明显上调(P<0.01),与LPS组相比,苦参碱处理组p-STAT1、3蛋白表达均下调,但p-STAT3在12h表达下调不明显(P>0.05)。结论苦参碱抑制增殖的机制有可能是通过下调STAT1、3,降低CTGF及PDGF的分泌未实现的。
- 苏婕金玉党红星凌继祖
- 关键词：系膜细胞苦参碱血小板源性生长因子
- 苦参素对LPS诱导的人肾小球系膜细胞中p-STAT3和SOCS-3的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:观察苦参素对LPS诱导的人肾小球系膜细胞(HMC)中磷酸化信号转导和转录活化因子3(p-STAT3)和细胞因子信号抑制因子3(SOCS3)的表达及相互关系.方法:体外原代培养的HMC,分为正常组、LPS(10 mg/L)组、LPS(10mg/L)+苦参素(320 mg/L)组,每组分3个时间点(12,24,48h).采用MTT法检测HMC的增殖,RT-PCR方法检测STAT3和SOCS3 mRNA的表达,Western Blot方法检测p-STAT3和SOCS3蛋白的表达.结果:苦参素能明显抑制LPS诱导的HMC增殖,与正常组相比,p-STAT3和STAT3 mRNA的表达在12,24,48 h均上调,SOCS3蛋白和mRNA的表达也同步上调.与LPS诱导组相比,苦参素组p-STAT3和STAT3 mRNA的表达在12,24,48 h均下调,而SOCS3蛋白和mRNA表达有明显上调的趋势.结论:苦参素能抑制LPS诱导的HMC的增殖,且能上调LPS诱导的HMC中SOCS3 mRNA和蛋白表达,下调P-STAT3和STAT3 mRNA的表达,其作用可能与上调SOCS3、抑制STAT3磷酸化有关.
- 凌继祖金玉李宇宁党红星苏婕
- 关键词：脂多糖类
- 改良法人胎肾小球系膜细胞原代培养被引量：5
- 2009年
- 目的:原代培养和鉴定正常人胎肾小球系膜细胞(HMC),探索和总结最佳培养方法。方法:取4月胎龄的引产胎儿肾,分离皮质后,筛网滤过分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化,接种肾小球时分别采用传统方法(第1组)和预先浸湿瓶底并以胎牛血清中和胶原酶替代离心洗涤(第2组)两种方法,观察系膜细胞生长状态。并采用免疫细胞化学检测第3代肾小球系膜细胞的结蛋白(Desmin)、肌动蛋白(Actin)、波形蛋白(Vimentin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)、Ⅷ因子(FactorⅧ)等相关抗原的表达,鉴定系膜细胞,并绘制其生长曲线,计算倍增时间。结果:两组肾小球贴壁率分别71%和90%,系膜细胞开始爬出时间为11d和7d,次代倍增时间为3.94d和3.52d,细胞生长状况有统计学差异。第2组传代的系膜细胞1d内贴壁,1周后长满。细胞呈三角、梭形、不规则形半透明,树枝状突起。免疫化学鉴定Desmin、Vimentin和Actin阳性,FactorⅧ和Cytoker-atin阴性。结论:两种肾小球接种方法对系膜细胞培养有不同影响,我们总结改进的培养方法肾小球贴壁率高,细胞存活和生长良好,并确定培养的细胞为人HMC。
- 党红星金玉梁耀军凌继祖苏婕
- 关键词：肾小球人肾小球系膜细胞胎肾免疫细胞化学原代培养
