蒋世卫
- 作品数：8 被引量：7H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大鼠转铁蛋白受体单链抗体和芋螺毒素SO3的融合蛋白在大肠杆菌中的表达
- 2005年
- 人工合成了芋螺毒素SO3的基因片段,通过链延伸方法获得了SO3的全长基因。在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体的单链抗体基因的pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因的重组表达载体,转化大肠杆菌BL21穴DE3雪和Origmia穴DE3雪/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在。为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础。
- 蒋世卫周晓巍颜冰黄培堂
- 关键词：转铁蛋白受体单链抗体血脑屏障融合蛋白包涵体镇痛药物
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒NS1基因的克隆及其序列分析
- 2007年
- 目的:克隆H5N1亚型禽流感病毒的NS1基因,并分析其序列特性。方法:通过RT-PCR方法克隆H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并对该基因片段进行测序,将此序列与数据库中不同时间、地点、宿主来源的H5N1亚型流感毒株NS1基因序列进行同源性比较。结果:获得了678 bp的NS1全长基因,可编码225个氨基酸;其与毒株A/chicken/Jilin/hq/2003的同源性最高,二者的核酸和氨基酸的同源性分别为99.7%和99.1%。比对分析发现,该毒株NS1基因在第238-252位有15个核苷酸的缺失;进化树分析表明,它与1997年香港流行的H5N1亚型禽流感病毒毒株分别属于2个不同的分支。结论:克隆了一株H5N1亚型禽流感病毒的NS1基因,并初步分析了其序列特性,为进一步研究NS1基因的功能奠定了基础。
- 张传福蒋世卫杨予涛杨志新朱恒奇赵丽霞许龙王荣于孟斌周晓巍黄培堂
- 关键词：禽流感H5N1亚型NS1基因
- 特异识别HIV-1序列的锌指蛋白的表达纯化及其在Biacore CM-5芯片上的固定
- 2007年
- 目的:为了更好地利用Biacore 3000研究锌指与核酸的相互作用,将特异性识别HIV-15′端一段保守序列的三锌指蛋白固定在CM-5芯片上。方法:将特异性识别HIV-15′端一段保守序列5′-CTGTGTTTG-3′的三锌指基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达重组三锌指蛋白,超声碎菌进行SDS-PAGE分析;包涵体形式的表达产物用盐酸胍溶解后,经一步凝胶柱复性并纯化;随后摸索适宜固定的pH值并通过化学方法进行固定。结果:表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化及柱复性后的蛋白纯度为98.8%,并在CM-5芯片上成功固定。结论:本研究为利用Biacore实时定量研究锌指蛋白与其识别DNA的相互作用进行了尝试。
- 刘娟赵兴卉蒋世卫朱旭东黄培堂
- 关键词：锌指HIV-1包涵体BIACORE
- 抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定被引量：4
- 2006年
- 根据转铁蛋白受体和转铁蛋白特异性结合的性质,利用亲和纯化的方法从胎盘中提取转铁蛋白受体。以转铁蛋白受体为抗原包被免疫管,从全合成人源噬菌体单链抗体库中筛选其抗体。对筛选到的抗体进行特异性鉴定后,将抗体基因插入表达载体pET22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后获得可溶性表达。HeLa细胞的免疫组化结果显示,表达的抗体可以与转铁蛋白受体结合。表达产物经Ni-NTA金属螯和层析柱纯化、脱咪唑后,从尾静脉注射小鼠。1h后,去除血液及毛细血管的干扰,在脑实质中检测到了抗体的存在,说明该抗体可以通过血脑屏障。
- 赵莉霞颜冰许龙蒋世卫张莹莹杨志新周晓巍黄培堂
- 芋螺毒素SO3的治疗性应用
- 本发明涉及芋螺毒素SO3或其类似物或衍生物在神经损伤的治疗或缓解中的应用。
- 周晓巍黄培堂蒋世卫刘凤云
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及其诱导肺腺癌细胞A549凋亡的研究被引量：1
- 2007年
- 通过RT-PCR的方法克隆H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并构建了真核表达载体pCMV-Myc/NS1。将此真核表达质粒转染肺腺癌细胞A549,48 h后,经Western印迹检测,NS1基因能在细胞中正确表达。经荧光显微镜、透射电镜观察和流式细胞仪检测,发现该株流感病毒的NS1蛋白可诱导肺腺癌细胞A549凋亡。
- 张传福蒋世卫朱恒奇杨予涛杨志新许龙赵莉霞周晓巍黄培堂
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型NS1基因肺腺癌细胞A549凋亡
- 芋螺毒素MⅦA研究进展被引量：1
- 2003年
- 来自芋螺(Conus)的芋螺毒素(conotoxin)是一类具有独特神经药理活性作用的多肽,它们能够高特异选择性识别、作用其受体,这是在五千万年进化史中与其受体相互作用形成的。其中,ω-芋螺毒素MⅦA来自致幻芋螺(Conusmagus),是一种高选择性的N-型电压敏感型Ca2+通道阻断剂。研究表明它具有强大的镇痛活性,并对脑缺血所造成的神经损伤具有保护作用。本文综述芋螺毒素MⅦA的相关基础、临床前及临床研究。
- 蒋世卫周晓巍黄培堂
- 关键词：芋螺毒素阻断剂镇痛神经保护
- 芋螺毒素SO3对大鼠海马神经元缺氧后胞内游离钙离子浓度的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:研究芋螺毒素SO3对培养大鼠海马神经元缺氧后胞内游离钙离子浓度的影响。方法:运用激光共聚焦显微镜(CLSM)测定缺氧后大鼠海马神经元胞内游离钙离子浓度的变化。结果与结论:芋螺毒素SO3可以明显抑制因缺氧所致原代培养大鼠海马神经元胞内游离钙离子浓度的上升。
- 蒋世卫周晓巍丁爱石范明黄培堂
- 关键词：芋螺毒素缺氧海马神经元钙离子
