蒋小梅
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的制备与鉴定
- 2010年
- 目的制备抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以人Cu/Zn SOD作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、斑点ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株4H10H4B12,亚型鉴定重链为IgG2a,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水效价为1∶256,000,抗体相对亲和力为1.101×109mol/L。斑点ELISA、Western Blot显示抗体能特异识别免疫原、人肝细胞株HL-7702和人红细胞中的天然Cu/Zn SOD;不与鼠Cu/Zn SOD和人Mn SOD发生交叉反应。免疫组化进一步显示了人Cu/Zn SOD均匀分布于细胞的胞浆中。结论成功制备了抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体,为进一步研究其与腹主动脉瘤的关系奠定了基础。
- 蒋小梅廖婷婷章崇杰张晨阳魏大鹏
- 关键词：SOD单克隆抗体腹主动脉瘤
- 重组人L型丙酮酸激酶N末端单克隆抗体的制备与鉴定
- 2010年
- 目的制备抗人L型丙酮酸激酶N末端(PK-N)的单克隆抗体并对其特异性进行鉴定。方法以PK-N-GST-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此单克隆抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的细胞株,亚类鉴定重链为IgG2b,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水效价分别为1∶409600和1∶102400,抗体相对亲和力分别为3.54×108L/mol和2.72×108L/mol。Western blot显示抗体能特异识别免疫原和人肝细胞株HL-7702中的天然丙酮酸激酶蛋白。免疫组化进一步显示了其在细胞及组织中的定位,均匀的分布于细胞的胞浆中。结论成功制备了抗PK-N单克隆抗体。
- 廖婷婷张晨阳蒋小梅魏大鹏章崇杰
- 关键词：单克隆抗体糖代谢
- 抗人Atg5单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的制备抗人Atg5单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法以人Atg5重组蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Atg5单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及亲和力常数。结果成功筛选到一株能稳定分泌抗人Atg5单抗的细胞株1E7B3H9,亚型鉴定重链为IgG2b,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水抗体效价为1:4.096×105,抗体亲和力常数为7.309×108 mol/L;Western blot显示此单抗能特异性识别人子宫颈癌Hela细胞系中的天然人Atg5蛋白;细胞免疫组化进一步显示Atg5表达在细胞质中。结论成功制备了抗人Atg5单克隆抗体,为进一步研究其与宫颈癌关系及在临床上的应用奠定了基础。
- 张现伟李志广章崇杰张小洪蒋小梅旷兴林魏大鹏罗志娟毕建虹
- 关键词：单克隆抗体HELA细胞株宫颈癌
- 抗人CDC7单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的制备抗人CDC7蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法以GST-CDC7为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗人CDC7单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用间接ELISA,WesternBlot,免疫细胞化学(ICC)对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到1株能稳定分泌抗人CDC7的细胞株1F7D2C9。亚类鉴定为IgG2a,轻链为kappa链,ELISA法鉴定该抗体腹水效价为1:102400,抗体亲和常数为1.558×109L/mol,WesternBlotting分析表明,此抗体能特异识别细胞株的天然CDC7蛋白质。免疫细胞化学进一步显示CDC7分布于细胞核中。结论成功制备了抗人CDC7单克隆抗体,为研究CDC7与细胞癌变的关系建立了基础。
- 李志广张现伟蒋小梅旷兴林魏大鹏章崇杰
- 关键词：单克隆抗体DNA复制
