许剑锋
- 作品数：36 被引量：144H指数：7
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市委属高校高水平特色发展项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学农业科学更多>>
- 东紫苏化学成分研究概述被引量：5
- 2016年
- 东紫苏具有食用和药用价值,全草中含芳香油、黄酮、三萜、酚类、β-胡萝卜素、维生素C及无机元素,具有明显的抑菌、抗氧化和降血脂等活性。目前对东紫苏有效成分提取及其活性研究很少,本文现对东紫苏的化学成分研究作一综述,以期为进一步研究和开发提供参考。
- 毛媛刘克武刘克海许剑锋吕慧
- 关键词：化学成分
- 3种植物挥发油抑制食源性细菌生长活性成分及机理被引量：16
- 2017年
- 采用无水乙醇浸法提取柠檬花、茶树叶、留兰香叶挥发油,用抑菌圈法及微量肉汤稀释法测定挥发油对大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonellas enteritidis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和李斯特菌(Listeria monocytogenes)的抑菌效果,并通过气相色谱-质谱联用分析其有效成分,抑菌机理通过实验菌菌液的电导率及扫描电子显微镜验证。结果表明:柠檬油、茶树油中有效抑菌成分分别为柠檬烯、1,8-桉叶素,其含量分别为65.50%、48.67%,留兰香油中有效抑菌成分为柠檬烯与左旋香芹酮,其含量分别为16.33%、35.67%。其中抑菌广谱性及抑菌效果最好的为留兰香油及其有效活性成分左旋香芹酮。实验中的有效活性物质可能是通过改变实验菌细胞膜的通透性,且可使细菌细胞发生皱缩破裂,以此起到抑菌及杀菌的作用。
- 潘旭迟许剑锋傅昱晟吕留庄于晓巍
- 关键词：金黄色葡萄球菌沙门氏菌扫描电子显微镜气相色谱-质谱
- 人参果的活性成分研究进展
- 本文对人参果的营养成分、化学成分的提取分离以及抗炎、预防糖尿病、抗高血压的活性进行了综述，并对人参果的抗肿瘤活性机制进行了推测，为后续研究打下一定基础，未来的研究将主要集中在活性物质的进一步分离纯化，并对这些物质的抗肿瘤...
- 许倩倩岳恒许剑锋
- 关键词：人参果纯化抗炎抗肿瘤
- 17种植物挥发油对食源微生物抑菌活性研究被引量：11
- 2016年
- 采用抑菌圈实验研究17种天然源植物挥发油对大肠杆菌(E.coli),沙门氏菌(S.a.),金黄色葡萄球菌(S.aureus)和李斯特菌(Lis)的抑菌效果,通过Matlab的评价,筛选得到10种具有广谱抑菌性且抑菌效果较好的产品进行最小抑菌浓度(Minimum Iinhibitory Concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC)实验,并利用气相色谱-质谱法(Gas Chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析得到效果最好的留兰香油的有效活性成分。结果表明:留兰香油对4种实验细菌均有较强的抑制作用,其MIC均在6.25 mg·m L^(-1),MBC均在50 mg·m L^(-1),有效活性成分为柠檬烯(13.71%)和左旋香芹酮(71.34%),其中左旋香芹酮对E.coli和S.aureus具有更强的抑菌效果,MIC及MBC均在12.5μg·m L^(-1)。佐以扫描电镜实验,发现加入左旋香芹酮后培养的细菌会产生皱缩或破裂现象,说明左旋香芹酮可抑制实验细菌的生长繁殖,最终导致细菌死亡。初步表明在留兰香油中左旋香芹酮是主要抑菌成分。
- 潘旭迟傅昱晟许剑锋朱靖豪
- 关键词：金黄色葡萄球菌沙门氏菌扫描电镜气相色谱-质谱MATLAB软件
- 代谢型谷氨酸受体5的纯化及纳米抗体的筛选
- 2023年
- 文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行表达纯化,然后对野生单峰驼进行7次免疫,对抽取骆驼的外淋巴细胞总RNA进行提取,经过反转录的方式转为c DNA,将用巢式PCR对VHH片段进行扩增并与p MECS噬菌粒载体进行连接,并电转化至TG1大肠杆菌中构建纳米抗体噬菌体展示文库;其三通过M13噬菌体展示技术对文库进行淘选,淘选出多个互补决定区3序列不同的纳米抗体;最后纯化出纯度较高的m GluR5蛋白,构建出库容量为5.47×10^(8)CFU/mL的噬菌体文库菌,经过两轮液相淘选,获得了12个互补决定区3序列不同的纳米抗体。研究成功筛选出12个与m GluR5特异性结合较高的纳米抗体,为m Glu R5的靶向药物研发和G蛋白偶联受体的信号通路研究奠定了基础。
- 王辉马梦洁许剑锋
- 关键词：代谢型谷氨酸受体5
- 新型冠状病毒特异性纳米抗体的筛选和鉴定被引量：2
- 2022年
- 目的通过噬菌体展示技术,从骆驼外周血中筛选针对SARS-CoV-2 RBD结构域的特异性纳米抗体,并对纳米抗体的亲和力、结合表位和中和活性进行评估。方法利用重组RBD免疫骆驼,从骆驼外周血中分离淋巴细胞,提取RNA并逆转录为cDNA,接着通过巢式PCR扩增VHH基因,电转化至pMECS噬菌粒载体中,构建噬菌体展示抗体库并进行免疫淘选,鉴定可以与RBD特异性结合的纳米抗体。分别利用Octet Red96e和HPLC测定纳米抗体与重组RBD的亲和力和结合表位,通过SARS-CoV-2假病毒中和实验测定纳米抗体的中和活性。结果从外周血淋巴细胞中成功扩增出VHH基因,构建的噬菌体展示抗体库库容为1.33×10^(8) CFU/ml;经过2轮免疫淘选,鉴定出2株特异性纳米抗体——NB2D11和NB4E9,K_(D)值分别为2.21和0.31 nmol/L;NB2D11和NB4E9具有非竞争性的结合表位,中和SARS-CoV-2假病毒的IC_(50)值分别为340.7和35.5 nmol/L。结论筛选到的2株高亲和力特异性纳米抗体可以有效地地阻断SARS-CoV-2假病毒与ACE2的结合,为COVID-19的诊断和治疗奠定了基础。
- 史震中徐晓驰吴文惠许剑锋
- 关键词：RBD噬菌体展示技术
- 丁香精油对鲜切杭白菜保鲜效果的影响被引量：7
- 2020年
- 该文以新鲜杭白菜为试验材料,进行鲜切处理(7~8 cm小段),使用一次性透明塑料盒包装并以保鲜膜封口,模仿日常超市售卖状态放置在温度为4℃湿度为65%的条件下贮藏。通过测定感官品质、VC含量、叶绿素含量、可溶性固形物含量、微生物数量等理化指标,研究不同浓度丁香精油(0. 5、1、2 mL/L)处理的保鲜效果。结果表明,3组实验组均比对照组保鲜效果明显。0. 5 mL/L和2 mL/L处理的鲜切杭白菜,货架期延长了3 d。1 mL/L丁香精油处理效果最好,货架期延长了6 d,能最有效抑制微生物的滋生,菌落数增长最为缓慢,各营养成分损失最低,而且没有异味残留。
- 徐双双许剑锋
- 关键词：鲜切丁香精油保鲜
- 一种香瓜茄酸性多糖及其提纯方法和用途
- 本发明公开了一种香瓜茄酸性多糖及其提纯方法和用途，所述酸性多糖为均一酸性杂多糖，其化学结构含有吡喃环和糖醛酸，由包括鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸的单糖组成；包括将香瓜茄经过(1)烘干、粉碎和除杂和(2)水...
- 吴文惠岳恒许倩倩许剑锋苏攀峰马子宾王锋
- 文献传递
- TAB1——基于蛋白质组学的卵巢癌紫杉醇耐药的潜在生物标志物探讨被引量：1
- 2021年
- 目的:探究卵巢癌对紫杉醇(PTX)耐药的潜在靶点及其相关机制。方法:体外培养卵巢癌A2780细胞和A2780PTX耐药细胞(A2780/T),采用不同浓度(2,4,8,16,32,64,128,256μmol·L^(-1))PTX分别干预24 h或48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测PTX对A2780细胞和A2780/T细胞存活率的影响,利用液相色谱质谱/质谱(LC-MS/MS)非标记(Label-Free)定量蛋白质组学方法鉴定和筛选两组细胞中表达差异的蛋白,通过基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,筛选卵巢癌细胞对PTX耐药的潜在生物标志物。以正常培养的A2780细胞作为空白组,采用0,1,4μmol·L^(-1)的PTX处理A2780/T细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测验证潜在靶点转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1(TAB1)及其下游相关分子转化生长因子-β活化激酶1(TAK1),p38有丝分裂活化蛋白酶(MAPK)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,PTX干预组的A2780和A2780/T细胞的活力均降低。PTX对A2780细胞的抑制率明显高于A2780/T细胞。A2780细胞中,PTX处理48 h的半抑制浓度(IC50)为0.002μmol·L^(-1),A2780/T细胞中,PTX的IC50>设置的最高浓度128μmol·L^(-1),与A2780细胞相比,A2780/T细胞对PTX具有耐药性。通过非标记定量蛋白质组学分析筛选出A2780/T和A2780细胞之间有441种差异表达蛋白和421种特殊差异表达蛋白。GO功能富集分析显示,在差异表达的蛋白质中,结合蛋白占大多数(80%)。根据KEGG通路分析结果和表达位点分析,TAB1被认为可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物。与A2780细胞比较,A2780/T细胞的TAB1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),与TAB1相互作用的TAK1 mRNA和p38 MAPK mRNA亦明显降低(P<0.05,P<0.01),但蛋白表达无显著变化。结论:TAB1可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物,其机制可能与TAB1/TAK1/p38 MAPK通路有关。
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- 关键词：卵巢癌紫杉醇耐药生物信息学
- 蓝莓提取物的生物活性研究
- 我国的蓝莓资源丰富，在大、小兴安岭山区有野生蓝莓。蓝莓不仅有很高的食用价值，还具有许多营养保健功能。蓝莓的提取物中有许多活性物质，有花青素、黄酮、多酚以及多糖等多种活性成分。本文介绍了蓝莓提取物的主要活性成分以及国内外对...
- 岳恒许倩倩许剑锋
- 关键词：蓝莓花青素活性成分多糖多酚
