谢晨
- 作品数:6 被引量:12H指数:2
- 供职机构:山东农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划山东省教育厅科技计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium1301的转座诱变被引量:2
- 2008年
- 本研究通过原生质体法、电击法和转座诱导方法,建立了携带转座子Tn917的质粒pTV1对野生巨大芽孢杆菌B1301菌株的转化体系与转座子突变技术,获得1000多个转座插入突变子。通过细胞分裂素生物测试法对这些突变子进行测定,筛选到2个突变子B1301-6与B1301-22。B1301-22突变子分泌的细胞分裂素比B1301有显著提高,而B1301-6突变子分必和细胞分裂比1301有显著降低。抑菌试验结果表明这2个细胞分裂素产量发生改变的突变子抑制率显著低于野生菌株,说明转座子Tn917的插入不仅使野生B1301菌株编码控制细胞分裂素产量的基因发生了改变,同时也改变了与编码抑菌功能相关的基因也受到了影响。
- 齐勇黄玉杰李茹美谢晨丁爱云杨合同
- 关键词:TN917突变巨大芽孢杆菌
- 嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus热稳定几丁质酶的克隆表达及活性研究被引量:5
- 2010年
- 研究通过RT-PCR和Tail-PCR技术从嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus中克隆了一个几丁质酶同源基因。该基因全长1,253bp,包含一个由1,197个碱基构成的开放阅读框,编码398个氨基酸。序列比对分析表明,该基因编码蛋白属于糖苷水解酶18家族的几丁质酶。利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体,并转化毕赤酵母。在甲醇的诱导下,重组蛋白得到了高效表达,第6天的表达量最高,达到0.433g/L,酶活力为28.96U/mg,同时对表达的几丁质酶进行了纯化,SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为43.9kDa。该几丁质酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为8.0,70℃处理30min仍有45%的相对酶活,具有较好的热稳定性及工业应用价值。
- 张婕谢晨郭晓红李多川
- 关键词:几丁质嗜热真菌嗜热酶
- 表达嗜热子囊菌光孢变种tapro基因的毕赤酵母工程菌株
- 本发明是一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro的毕赤酵母工程菌Pichia pastorisGS-TAPRO-18。通过...
- 李多川李安娜谢晨张婕张佳
- 文献传递
- 嗜热子囊菌光孢变种热稳定蛋白酶的基因克隆和表达及性质研究
- 蛋白酶是一类在生理学和商业领域中具有广泛应用价值的酶,其在食品和清洁剂中的应用具有悠久的历史。微生物来源的蛋白酶,由于培养简便,产量丰富,适于工业化生产而得以广泛应用。但一般的蛋白酶热稳定性较差,在应用中易于失活,因此热...
- 谢晨
- 关键词:嗜热子囊菌光孢变种丝氨酸蛋白酶基因克隆基因表达
- 文献传递
- 表达嗜热子囊菌原变种chit-taa基因的毕赤酵母工程菌株
- 本发明是一种表达嗜热子囊菌原变种(Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus)热稳定几丁质酶基因chit-taa的毕赤酵母工程菌GS-CHIT-TAA-176。通过RT-PCR及RAC...
- 李多川张婕谢晨郭晓红
- 文献传递