邵磊
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金黑龙江省农垦总局科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪圆环病毒2型ORF2-ORF1串联基因的原核表达及活性分析被引量：5
- 2010年
- 为探讨原核表达的PCV-2ORF2-ORF1串联蛋白的抗原性及其作为基因工程亚单位疫苗的可能性,以构建好的PCV-2大庆分离株质粒pMD-18T/PCV-2为模板,PCR分别扩增去掉核定位信号的Cap蛋白基因(dNLS-ORF2)和Rep蛋白基因(ORF1),将其串联克隆到原核表达载体pET30a(+)上,经PCR、酶切和测序鉴定,成功构建了重组质粒pET30a-ORF2/ORF1。转化E.coli BL21(DE3)pLysS感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳与Western blot分析。纯化的重组蛋白与PCV-2阳性血清发生特异性反应,并能与免疫小鼠的抗血清发生特异性反应。重组蛋白具有较好的免疫学活性,为基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 闻晓波李冬野李树东冉旭华李晓娟邵磊王密朴范泽杨焕民侯喜林倪宏波
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒新型ELISA试剂盒的研制
- 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS)被认定为猪的最重要传染性疾病之一,以妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪和成长猪的呼吸困难为主要特征。自1...
- 邵磊
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因N基因酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达被引量：4
- 2010年
- 用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因,分析ORF3蛋白的抗原性。根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析,针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物,PCR扩增该基因,并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上,命名为pET32a-ORF3,转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3)pLacⅠ感受态细胞,1.0mmol/L IPTG37℃诱导表达。结果表明,PCR扩增得到315bp的片段,重组蛋白大小约为29ku,与预期大小相符。Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应,不与PCV-2阳性血清发生反应。猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达,但与阳性血清之间没有反应原性,为进一步研究PCV-2ORF3蛋白的功能及特性奠定基础。
- 冉旭华李树东闻晓波王密杨焕民倪宏波侯喜林朴范泽邵磊李晓娟李冬野周恩民
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF3基因原核表达
- 一例成年奶牛肺炎链球菌病诊断报告被引量：1
- 2007年
- 2006年5月,黑龙江省大庆市某牛场发生一起产后奶牛急性死亡病例,以败血症为特征。经过病原分离鉴定以及动物试验等方法最终确诊为肺炎链球菌感染。药物敏感性试验表明,该细菌对青霉素G、先锋霉素Ⅴ和菌必治等高度敏感,对红霉素、乙酰螺旋霉素和林可霉素等具有耐药性。
- 周玉龙邵磊李国军杨毅昌朴范泽侯喜林
- 关键词：奶牛肺炎链球菌病
- 猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株。经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blotting。结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。证明原核表达系统表达的PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白具有良好的反应原性。
- 邵磊冉旭华闻晓波倪宏波王密朴范泽
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒M基因N基因原核表达
