郭延华
- 作品数：72 被引量：86H指数：5
- 供职机构：新疆农垦科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 绵羊体细胞核移植融合效率影响因素的研究被引量：3
- 2014年
- 【目的】提高克隆胚胎融合率。【方法】从受体卵母细胞的细胞松弛素处理组与对照组,供体细胞的梯度差速选择(胰酶浓度0.1%、0.25%,消化时间3 min、1 min)和4组电脉冲融合参数(100 V、120 V、130 V、150 V)等3个环节对绵羊体细胞核移显微操作进行了优化,以重构胚胎的融合率和卵裂率作为检测指标。【结果】未经细胞松弛素的卵母细胞组融合率显著高于试验组(P<0.05),而胚胎卵裂率差异不显著(P>0.05);胰酶梯度差速消化供体细胞具有初选作用,各组融合率为71.71%、75.86%、78.75%、75.56%,融合压为130 V时融合率最高。【结论】优化后的程序更适合克隆胚胎的膜融合。
- 郭延华王立民唐红张译元周平
- 关键词：细胞松弛素胰酶膜融合
- 一种青贮饲料贮藏窖
- 本实用新型公开了一种青贮饲料贮藏窖，包括基面和窖墙体，所述基面和窖墙体固定连接，所述窖墙体的顶部卡接有密封板，所述窖墙体的内部滑动连接有筛板，所述基面的底部等间隔开设有多个落水口，所述基面的底部开设有集水腔，所述落水口和...
- 刘长彬卢春霞李守江陈宁卢守亮倪建宏郭延华林祥群晁旭东
- 文献传递
- 绵羊母源基因TRIM28克隆、表达及生物信息学分析
- 2017年
- 为了研究TRIM28基因在绵羊早期克隆胚胎发育过程中基因组去甲基化与重新甲基化及其维持的机制,探索母源关键基因在体细胞克隆效率中的作用,本研究通过提取中国美利奴细毛羊卵巢组织RNA,经反转录获得cDNA,利用特异性引物扩增TRIM28基因编码区序列,测序后采用生物信息学软件对编码区序列及氨基酸序列进行相关生物信息学分析和结构预测,进一步采用RT-PCR对绵羊不同组织中TRIM28表达量进行检测。结果显示:克隆获得了绵羊TRIM28基因编码区序列全长2441bp,编码811个氨基酸。生物信息学分析结果表明,不同物种TRIM28基因编码区核苷酸和氨基酸序列具有较高保守性。组织表达谱结果显示,TRIM28 mRNA在中国美利奴细毛羊肺脏、脾脏和卵巢中高丰度表达,且与Zfp57表达情况一致。结论:TRIM28基因结构和进化方面高度保守,推测其在不同组织中行使转录中介因子这一特定的生物学功能相关,TRIM8与ZFP57复合体在分化组织中对基因组甲基化的维持起着重要作用。
- 罗健王立民张译元郭延华唐红周平刘守仁
- 关键词：DNA甲基化生物信息学
- 一种载玻片扣染染色支架
- 本实用新型涉及试验装置,尤其是一种利用扣染法染色时所使用的一种载玻片染色支架。一种载玻片扣染染色支架，其特征在于主要包括托板、支架Ⅰ、支架Ⅱ，支架Ⅰ、支架Ⅱ大小不等，所述支架Ⅰ、支架Ⅱ间隔一定距离设于托板上，所述托板为水...
- 唐红周平王立民张宾郭延华张译元皮文辉万鹏程代蓉张昕羊秀美
- 文献传递
- 一种提高基因编辑后绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复频率的方法
- 本发明公开了一种提高基因编辑后绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复频率的方法。本发明提供了抑制含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞中Lig4基因表达的物质在制备促进含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞同源重...
- 皮文辉周平郭延华王伟黄兰兰韩猛立简子健王新华刘守仁
- 文献传递
- 用CRISPR-Cas9在绵羊成纤维细胞ACTG1导入荧光标记基因
- 2021年
- 【目的】在绵羊成纤维细胞中,针对ACTG1基因羧基端,定点导入荧光蛋白标记基因,将外源基因定点导入绵羊基因组中,建立有效的方法。【方法】CRISPR-Cas9系统在绵羊成纤维细胞基因组特定区域引起DNA双链断裂,从而诱导细胞修复断裂的的基因组。通过NHEJ修复途径,在特定位点导入外源基因,改善定点导入效率。【结果】采用CRISPaint通用供体模板,结合CRISPR-Cas9系统,在绵羊成纤维细胞ACTG1基因导入荧光标记效率达1.4%,获得了外源基因定点导入的单克隆细胞株。【结论】CRISPR-Cas9系统结合NHEJ,能够有效的将大的外源DNA序列导入绵羊成纤维细胞的预定基因组位点。
- 郭延华皮文辉
- 关键词：绵羊成纤维细胞
- 一种便于试管取用的胚胎冷冻箱
- 本实用新型涉及冷冻装置技术领域，公开了一种便于试管取用的胚胎冷冻箱，包括冷冻箱本体以及转动连接在冷冻箱本体顶部的密封盖，冷冻箱本体的一侧转动连接有第一旋钮，第一旋钮的另一端延伸至冷冻箱本体的内部并固定连接有转轴，转轴的另...
- 万鹏程赵学明石文艳刘昱成傅祥伟刘长彬张振良卢守亮倪建宏郭延华王晶晶白佳琛李厚儒刘伟俊杨杨
- 利用CRISPR/Cas9n系统编辑绵羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因被引量：2
- 2022年
- 成纤维细胞生长因子5(FGF5)是影响毛囊周期性活动及毛发生长的重要生长因子。本研究利用CRISPR/Cas9n系统靶向编辑绵羊成纤维细胞中FGF5基因。首先利用Gibson Assembly法将U6启动子引导表达单导向RNA(sgRNA)的原件构建至pX461质粒中,获得pX461-U6质粒;再将设计并合成好的1对靶向FGF5基因第3外显子的sgRNA及其互补链,经退火连接形成sgRNA-sg1和sgRNA-sg2双链后,分别克隆至带有BbsⅠ和BsaⅠ黏性末端的pX461-U6质粒。构建好的重组质粒pX461-U6-sg1+sg2经测序鉴定后,以电转染的方式转入绵羊成纤维细胞,72 h后收集细胞进行检测分析。经T7E1酶切检测分析表明,成功获得1对具有靶向效果的sgRNA,PCR扩增的FGF5基因片段经TA克隆后进行测序鉴定,结果sgRNA-sg1+sg2在靶位点的打靶效率为100%;缺失的核苷酸数从10到64个不等;基于预测的3D模型和RT-PCR结果显示,FGF5基因的突变将会影响FGF5蛋白与其受体的结合,导致FGF5蛋白失去其生物学功能。本研究构建了可以在同一载体中同时表达2条sgRNA和Cas9n以及绿色荧光蛋白(GFP)的质粒,瞬时转染至绵羊成纤维细胞后,成功获得了高效靶向绵羊FGF5基因的sgRNA位点,为精确和高效的靶向基因工程提供了科学依据。
- 蒙亚琦姚旭东任秀美奥郭延华唐红张译元王立民周平
- 关键词：绵羊基因敲除
- 绵羊双肌表型性状相关的分子标记、引物对、试剂盒及鉴别方法
- 本发明公开了绵羊双肌表型性状相关的分子标记、引物对、试剂盒及鉴别方法。本发明所要保护的一个技术方案是检测绵羊基因组中SNP位点的多态性或基因型的物质在制备鉴定或辅助鉴定绵羊双肌表型性状产品中的应用；所述SNP位点是绵羊基...
- 甘尚权徐梦思张云峰杨鹏周平代蓉王立民唐红郭延华张译元杨杨
- 一种羊用阴道置入式采精装置
- 本实用新型涉及家畜繁殖技术领域，尤其是一种羊用阴道置入式采精装置，包括乳胶通道，乳胶通道的左侧固定设有外阴固定环，乳胶通道的右侧固定设有膣息内固定环，膣息内固定环的右侧套接有乳胶帽，乳胶帽的一侧固定设有集精囊，外阴固定环...
- 刘长彬卢守亮张振良倪建宏卢春霞张译元刘昱成万鹏程郭延华王立民
