郭志林
- 作品数：9 被引量：38H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：河南省杰出人才创新基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小鼠、兔和牛胚胎干细胞分离培养及其向神经样细胞的分化
- 胚胎干细胞能在体外维持未分化状态与正常核型、具有无限增殖能力，注入囊胚可形成嵌合体，可分化为来自三个胚层的各种细胞类型。ES细胞被广泛应用于生产转基因动物和克隆动物，构建医学动物模型，研究人类基因功能。利用ES细胞可研究...
- 郭志林
- 关键词：胚胎干细胞细胞分离条件培养液EG细胞定向分化
- 文献传递
- 生长因子和体细胞共培养对牛体外受精的影响被引量：4
- 2011年
- 为研究表皮生长因子(EGF)和胰岛素(Insulin)对牛卵母细胞体外发育的影响以及体细胞共培养对体外受精胚胎体外发育的影响,将获取的牛卵泡卵母细胞在含有30μg/L EGF或50 mg/LInsulin或30μg/L EGF+50 mg/L Insulin的成熟培养液中进行成熟培养,比较不同生长因子对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响;将受精卵用颗粒细胞单层培养系统或牛输卵管上皮细胞单层培养系统进行体外培养,比较体细胞共培养系统对体外受精胚胎体外发育的影响。结果表明,成熟培养液中添加30μg/L EGF或者30μg/L EGF+50 mg/L Insulin可以显著提高卵母细胞的成熟率和受精后的卵裂率(P<0.05);输卵管上皮细胞共培养系统可以显著提高受精后的囊胚发育率(P<0.05),可以用于牛体外受精胚胎的体外培养。
- 丁向彬王轶敏郭志林张涌
- 关键词：EGF胰岛素体外受精共培养
- 绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用被引量：5
- 2006年
- 研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用，确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量，并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果进行了比较。结果表明，绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用，最佳注射剂量为每个绵羊卵母细胞注入2～4pL浓度5～6mg／mL的绵羊精子提取物；绵羊精子提取物的孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果差异不显著。
- 赛务加甫张立彭新荣郭志林杨丽李向臣何宽军安志兴张涌
- 关键词：绵羊卵母细胞孤雌激活显微注射
- 山羊-绵羊种间体细胞核移植重构胚构建被引量：2
- 2006年
- 以山羊皮肤成纤维细胞为供体细胞,绵羊去核卵母细胞为受体细胞进行种间体细胞核移植,构建山羊-绵羊重构胚,并对其采用离子霉素联合6-DM AP法和胞质注射绵羊精子提取物法进行激活,比较两种不同激活方法对山羊-绵羊种间体细胞核移植重构胚的激活效果。结果表明,共构建获得山羊-绵羊重构胚238枚,重构胚在体外能够发育至囊胚阶段;离子霉素联合6-DM AP法激活的卵裂率为58.33%(70/120),囊胚发育率为4.28%(3/70);胞质注射绵羊精子提取物法激活的卵裂率为63.55%(75/118),囊胚发育率为6.66%(5/75),两种方法的激活效果差异不显著。
- 赛务加甫张立杨丽彭新荣郭志林李向臣权富生安志兴郑月茂赵雪张涌
- 关键词：异种核移植成纤维细胞山羊绵羊
- 小鼠EG细胞体外分化为神经细胞的一种简单有效方法
- 2008年
- 【目的】探讨一种简单有效的小鼠EG（Embryonic germ cells,EG）细胞体外分化为神经细胞的方法。【方法】将昆明小鼠EG细胞在老化饲养层上培养3-4周,使EG细胞在高密度条件下向神经细胞分化,研究不同浓度维甲酸（Retinoic acid,RA）对EG细胞分化的诱导效果。【结果】小鼠EG细胞在高密度培养条件下向神经细胞分化,可获得较高比例的神经细胞样克隆,nestin染色阳性率达62.9%;经检测EG细胞分化产生的神经细胞样克隆外层细胞,以及从克隆中迁出的细长细胞均表达神经前体细胞标志nestin;在相同RA浓度下,随着EG细胞分化时间的延长,TH^＋（tyrosine hydroxylase,TH）神经细胞的比例增加;而在不同RA浓度下,随着RA浓度的升高,TH^＋神经细胞的比例呈增加趋势,经RA诱导14 d,最高可获得（2.3±0.2）%的TH^＋神经细胞。【结论】昆明小鼠EG细胞在老化饲养层上高密度培养条件下,能自发分化为神经细胞,RA诱导可显著提高分化细胞群体中TH^＋神经元细胞的比例。试验建立的这种简单有效方法可用于EG细胞体外分化为神经细胞。
- 郭志林王新庄张涌王木王轶敏胡文举
- 关键词：EG细胞神经细胞体外分化昆明小鼠
- EGF和不同血清对牛卵母细胞成熟及核移植胚体外发育的影响被引量：4
- 2007年
- 分离牛卵母细胞,分别用添加表皮生长因子(EGF)和发情牛血清(发情当天血清(OCS(0 d))和发情第7天血清(OCS(7 d)))的培养液进行成熟培养后去核,构建牛体细胞核移植胚并进行体外培养,研究EGF和OCS对卵母细胞成熟及核移植胚体外发育的影响。结果表明EGF添加组和OCS(0 d)添加组卵细胞的成熟率及核移植胚的卵裂率和囊胚率分别为74.5%,84.6%,25.9%和83.9%,78.8%,31.3%。在牛卵母细胞成熟液中添加EGF、OCS(0 d)更有利于牛核移植胚胎的发育。
- 王亚刚隋丽娜彭新荣赛务加甫郭志林李向臣王勇胜张涌
- 关键词：表皮生长因子胎牛血清
- 影响昆明小鼠和BALB/c小鼠胚胎干细胞分离、克隆、传代的若干因素被引量：16
- 2006年
- 对昆明小鼠和BALB/c小鼠2种胚胎的研究表明,2种品系小鼠胚胎均可用作胚胎干细胞(ES)分离建系的材料,两者在ES分离、传代上无显著差异(P>0.05);大鼠心肌细胞条件培养液与添加L IF的ES常规培养液相比,显著提高了小鼠ES细胞F1、F2出现率(P<0.05);采用低浓度消化液使形成ES克隆的比率分别从14%、16%提高到35%、32%,使ES传到第5代的比率分别从1.7%、0提高到5%、7.1%;而采用连续消化法使形成ES克隆的比率从15%、17%提高到40%、50%,使ES传到第5代的比率从0、1%提高到10%、20%;对ES进行伊红染色、核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的ES符合小鼠ES的一系列特征。
- 郭志林王新庄王木张涌王轶敏
- 关键词：昆明小鼠BALB/C小鼠胚胎干细胞克隆
- 大鼠心肌细胞条件培养基对兔胚胎干细胞分离培养效果的影响被引量：3
- 2007年
- 采用大鼠心肌细胞条件培养基对兔胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)进行分离、传代培养,研究大鼠心肌细胞条件培养基对兔ESC分离培养效果的影响。结果显示,用SD大鼠心肌细胞条件培养基培养的兔ESC集落呈岛屿状生长,碱性磷酸酶染色呈强阳性,体外分化可形成类胚体状结构,贴壁的类胚体周边会出现许多分化的上皮样细胞或单个散在的细胞;常规冻存后再传代的兔ESC集落具有较为一致的生长特征,并呈现胚胎干细胞集落所特有的岛屿状生长形态;传至第5代的兔ESC集落核型正常率>75％。表明SD大鼠心肌细胞条件培养基可用于兔胚胎干细胞分离培养。
- 郭志林王新庄张涌王木王轶敏胡文举
- 关键词：细胞培养
