钟传青
- 作品数:36 被引量:247H指数:4
- 供职机构:山东建筑大学市政与环境工程学院更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程医药卫生农业科学更多>>
- 积磷小月菌调控蛋白Mlp21700的异源表达及其与多聚磷酸盐(Poly-P)代谢基因启动子的结合
- 2018年
- 【背景】积磷小月菌(Microlunatus phosphovorus)是重要的聚磷微生物,在好氧条件下积累聚磷酸盐并在厌氧条件分解聚磷酸盐,这个过程可能受到精细的基因调控。【目的】利用凝胶迁移实验(EMSA)分析调控蛋白Mlp21700结合的多聚磷酸盐(Poly-P)代谢基因启动子,找到Mlp21700可能的调控靶点。【方法】以积磷小月菌JN459菌株的基因组DNA为模板,PCR扩增Mlp21700编码序列,构建重组质粒p ET28a-21700并转化到大肠杆菌Transetta(DE3)菌株,诱导表达后采用非变性方法纯化获得Mlp21700融合蛋白。利用PCR方法分别扩增各个Poly-P代谢基因的启动子,用生物素标记后作为探针。采用EMSA分析Mlp21700在试验条件下是否结合启动子以及结合强度。【结果】DNA测序和酶切验证表明p ET28a-21700携带正确的Mlp21700编码序列。SDS-PAGE分析显示试验条件下Transetta(DE3)菌株大量表达可溶性Mlp21700,纯化的重组Mlp21700蛋白纯度大于90%,含量为0.64 mg/mL。EMSA分析表明在试验条件下Mlp21700能够结合Mlp26610基因ppgk和Mlp44770基因ppx的启动子。【结论】调控蛋白Mlp21700可能参与Mlp26610和Mlp44770基因的转录调控,进而调控Poly-P的分解过程。
- 钟传青王静宗工理姜天翼曹广祥
- 关键词:多聚磷酸盐调控蛋白启动子
- 一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法及构建的菌株与应用
- 本发明公开了一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法,步骤如下:首先构建内源性溶菌酶的超表达载体,然后将超表达载体通过接合转移转入至出发菌株中,筛选得到内源性溶菌酶超表达的基因工程菌。本发明采用超表达技术,通过高表达内源性...
- 钟传青曹广祥付加芳宗工理
- 文献传递
- 大学生专业创新能力培养与第二课堂建设被引量:2
- 2014年
- 高校教育工作者应注重对当代大学生创新能力的培养,提高其综合能力。教师需要尊重学生的思维方式和新想法、新创意,主动地去引导,鼓励学生的创新思维。本文探讨如何合理利用第二课堂,提高学生自主创新的积极性,为学生提供学习、交流、创新的机会和平台,同时拓展学生视野,激发大学生内在潜能,提高学生综合素质,满足现代社会对创新型人才的需求。
- 曹广祥姜媛媛钟传青
- 关键词:第二课堂教学改革
- 乡镇医院污水环境中抗生素耐药细菌的分离与分析被引量:3
- 2021年
- 为分析乡镇医院污水环境中的抗生素耐药细菌,利用麦康凯琼脂培养基分离来自乡镇医院污水样品的耐药细菌,并进行16S rDNA序列分类鉴定、最小抑菌浓度(MICs)检测和质粒分析。本研究从乡镇医院污水中分离出13株耐药细菌,通过分析耐药细菌的16S rDNA序列,确定了13株耐药细菌的种属分类。其中2株气单胞菌(Aeromonas sp.)C64、E62和1株摩根氏菌(Morganella sp.)P63都属于多重耐药菌,且均可检测到质粒。本研究表明,乡镇医院污水管道中存在多重耐药的条件致病菌,具有在环境中散播耐药基因的潜在风险。研究结果可为乡镇医院污水的治理提供依据。
- 于明琪钟传青周英萍王露霏程鹏曹广祥付加芳
- 关键词:抗生素MICS质粒
- 一种养肝护眼固体饮料的制备方法及所得产品
- 本发明提供了一种养肝护眼固体饮料的制备方法及所得产品,步骤为:主要由蓝莓、黑枸杞、苹果、猕猴桃等原料制备而成。将上述原料混合后,加热灭菌,作为发酵基料,然后按照14‑16%的接种量向发酵基料中接入灵芝菌种液,在28℃下发...
- 张超钟传青曹广祥王洪波王乃焜吕铭尹明山
- 文献传递
- 一株高活性克拉维胺酸氨基乙酰化酶的棒状链霉菌及其应用
- 本发明公开了一株高活性克拉维胺酸氨基乙酰化酶的棒状链霉菌,为棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)B02‑246,于2015年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编...
- 曹广祥钟传青
- 文献传递
- 克拉维酸高产菌的诱变育种及发酵工艺研究被引量:3
- 2017年
- 目的为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产菌株的需求,建立一种新的克拉维酸高产菌株筛选方法。方法以克拉维酸生产菌株—棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)SC51为出发菌株,采用紫外-NTG联合诱变方法,以链霉素抗性作为筛选标记,从不断增加链霉素浓度的平板上,筛选链霉素抗性突变菌株,以此突变菌株为实验菌株,对碳源、氮源、前体三油酸甘油酯和发酵条件进行优化。结果在链霉菌浓度60μg/m L的平板上筛选到链霉素抗性突变菌株SCM0943,效价达到2955μg/m L,且遗传性能稳定;优化的发酵条件下,摇瓶发酵120h,克拉维酸效价可达3437μg/m L,较出发菌株提高49.1%。结论棒状链霉菌的链霉素耐受性与克拉维酸的产量存在正相关性,本试验结果对克拉维酸工业化生产具有很好的参考价值。
- 宗工理钟传青王新圆覃荣活曹广祥
- 关键词:克拉维酸诱变育种突变株
- 双组份信号转导系统MprAB和TrcRS协同调控结核分枝杆菌rv1057基因表达的分子机制被引量:1
- 2017年
- 目的探讨结核分枝杆菌rv1057基因受到双组份信号转导系统MprAB和TrcRS协同调控的作用机制。方法采用凝胶阻滞迁移试验分析MprA和TrcR在体外与目标基因启动子片段的特异性结合能力;荧光定量PCR检测目标基因的转录水平,以H37RvSDS处理组的表达值为1个单位进行倍数变化分析;蛋白质免疫印迹法检测目标基因的表达;通过构建lacZ报告基因检测rv1057启动子不同区域启动转录的能力。统计学处理采用t检验。结果MprA结合trcR启动子;无SDS条件下D981、H37Rv菌株的trcR相对表达量分别为H37RvSDS处理组的1.7和2.5倍,差异有统计学意义(t=18.54,P〈0.05);有SDS条件下,D981、H37Rv菌株的trcR相对表达量分别为H37RvSDS处理组的1.0和2.1倍,D981菌株的trcR转录水平显著高于H37Rv菌株,差异有统计学意义(t=15.86,P〈0.05)。H37Rv菌株培养过程中加入SDS后trcR的相对表达量变化倍数显著下降,差异有统计学意义(£一16.99,P〈0.05);MprA和TrcR都可以结合rv1057启动子并调控其表达;MprA激活rv1057的转录,而TrcR阻遏rv1057的转录。结论MprAB和TrcRS协同调控rv1057基因的表达,环境存在SDS时MprA被激活,阻碍trcR表达并激活r口1057的转录,而无sDs时TrcR阻遏rv1057的转录。
- 宗工理张佩佩付加芳马军霞钟传青曹广祥
- 关键词:分枝杆菌结核
- 微生物学实验教学方法改革研究——以山东建筑大学市政与环境工程学院为例
- 2016年
- 为提高大学生微生物学实验课学习效率,拓展微生物学实验教学内容,文章以山东建筑大学市政与环境工程学院为例,分析了微生物学实验教学的实验课与理论课知识脱节、不能有效理论联系实际,教学手段单一、教学内容不系统,学生不思进取得过且过、忽略了对实验课的考察流程等存在的问题及现状;阐述了进行微生物学实验教学方法改革研究的重要性与必要性;提出了注重微生物学理论知识学习,丰富教学手段、提高学生主观能动性,严格微生物学实验课程考察,重视毕业论文环节等改革措施。
- 钟传青曹广祥张春明王珊珊张素
- 关键词:微生物学实验实验教学毕业论文
- 一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法及构建的菌株与应用
- 本发明公开了一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法,步骤如下:首先构建内源性溶菌酶的超表达载体,然后将超表达载体通过接合转移转入至出发菌株中,筛选得到内源性溶菌酶超表达的基因工程菌。本发明采用超表达技术,通过高表达内源性...
- 钟传青曹广祥付加芳宗工理