钟永旺
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 烟草果胶甲基酯酶 (PME)基因的克隆及功能分析(英文)被引量：5
- 2004年
- 为了研究果胶甲基酯酶 (pectinmethyl esterase ,PME) (EC 3.1.1.11)与植物病毒运动蛋白之间的相互作用 ,应用RT PCR方法从烟草 (Nicotianabenthamiana)中克隆了PME基因 ,并测定了全序列 (GenBank登录号AY2 3896 8) .序列分析显示该基因由两个保守的结构域组成 (PMEI和pectinesterase) .DNA印迹结果表明 ,该基因在基因组中存在多个拷贝 ,蛋白质印迹表明 ,植物总蛋白中存在两种形式的PME蛋白 ,但RNA印迹结果显示 ,在烟草细胞中只检测到全长的PME转录产物 .酵母双杂交结果表明 ,PME与水稻矮缩病毒Pns11(具有非特异的核酸结合活性 )之间存在相互作用 ,而没有检测到PME与已知的运动蛋白Pns6之间的相互作用 ,推测Pns11蛋白可能参与了水稻矮缩病毒粒子的运动 .
- 李春波高锋钟永旺魏春红李毅
- 关键词：果胶甲基酯酶酵母双杂交运动蛋白烟草
- 水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白P7-2转录调节活性的鉴定
- 水稻黑条矮缩病毒(Rice black streaked dwarf virus, RBSDV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae),斐济病毒属(Fijivirus)的成员,其基因组由10条双链RNA组成,依次命名为S...
- 钟永旺
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒转录激活转录抑制转录调节
- 水稻黑条矮缩病毒第九号基因片段的克隆和表达被引量：5
- 2003年
- 应用RT PCR技术从表现玉米粗缩病症状的玉米叶片中分离克隆了水稻黑条矮缩病毒 (Riceblack streakeddwarfvirus,RBSDV)的第九号片段S9(GenBank登录号AF540 976) ,并测定了全序列。将该片段的第一个开放读码框 (S9 1 )在原核表达载体pET2 1d中进行了高效表达 ,表达产物进行N端氨基酸序列测定 ,与理论推测的序列完全一致。将表达产物纯化后制备了抗体 ,经Westernblotting从感病玉米叶片中检测到了该蛋白。
- 李春波钟永旺张旭东魏春红李毅
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒克隆
- 水稻矮缩病毒:一种我们认识非常有限的病毒
- ＜正＞水稻矮缩病毒（Rice dwarf virus,RDV）是亚洲特有的一种病毒,侵染水稻等少数几种单子叶植物。曾经引起过水稻的严重减产,是水稻的一个重要的病原。在过去的10多年中,虽然因水稻矮缩病毒引起病害的发病面积...
- 魏春红钟永旺李春波李毅
- 文献传递
- 水稻黑条矮缩病毒第七号片段的cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：18
- 2003年
- 运用RT PCR技术 ,根据玉米粗缩病毒S6的末端序列设计引物 ,从玉米粗缩病感病材料中克隆得到一条 2 2kb长的cDNA片段 ,序列分析表明 ,该片段全长 2 1 93bp ,含两个开放阅读框 ,分别编码 41 0kD和 36 3kD的多肽。序列分析结果表明 ,该cDNA片段及其编码产物与水稻黑条矮缩病毒S7的cDNA序列及编码产物存在最高的相似性 ,推测该cDNA片段为水稻黑条矮缩病毒的S7片段 ,而不是玉米粗缩病毒的S6。分别将该片段的两个阅读框克隆到原核表达载体pET2 1 d及pGEX KG中 ,经IPTG诱导后 ,两种蛋白均得到了高效的表达。表达产物回收后制备并得到了高效价的抗血清。
- 钟永旺周洁庄斌全魏春红李毅
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒CDNA克隆大肠杆菌
