闫广谋
- 作品数：34 被引量：76H指数：5
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种布鲁氏菌抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法
- 本发明公开一种布鲁氏菌抗体免疫胶体金检测试纸条，用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记胶体金制成本发明的胶体金抗体检测试纸条的金胶垫。L7/L12蛋白是布鲁氏菌高特异性、免疫原性蛋白。从牛布鲁氏菌基因组中克隆出L7/L12...
- 闫广谋张楠张西臣李建华宫鹏涛
- 文献传递
- 一种能从菌体外裂解大肠杆菌的融合裂解酶
- 本发明公开了一种能从菌外杀灭大肠杆菌的融合裂解酶，同时还提供了其构建方法，利用生物技术把大肠杆菌素部分转运区域与一种噬菌体裂解酶融合在一起，即将Colicin A的结合区域、识别区（BR）与裂解酶融合在一起，构建成一种从...
- 雷连成闫广谋王爽吕蒙朱日宁马强顾敬敏孙长江冯新韩文瑜
- 布鲁氏菌分子标记、毒力缺失疫苗株△YZ-2的研究
- 当前布鲁氏菌疫苗种类繁多,但各有缺陷。比如不能区分人与动物是人工免疫接种还是野生菌感染,并且病毒强,返祖现象严重,甚至使接种的人与动物发病,而不能广泛应用,致使当前布鲁氏菌病趋年上升。 本研究通过构建自杀质粒,采用定向同...
- 闫广谋
- 关键词：布鲁氏菌分子标记同源重组蛋白纯化
- 文献传递
- 口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。
- 崔丽瑾王兴龙梅英武任林柱闫广谋张辉郎需龙段小宇路浩
- 关键词：口蹄疫病毒绿色荧光蛋白
- 布鲁氏菌分子标记、毒力缺失疫苗株△S19-2的构建被引量：17
- 2007年
- 通过构建自杀质粒,用定向同源重组的方法,把改造的萤火虫萤光素酶报告基因Luc NF+替换布鲁氏菌S19疫苗株Bp26基因部分片段,构建出布鲁氏菌Bp26基因缺失突变株△S19-1。在此基础上,用同样的方法,敲除△S19-1上的毒力基因Bmp18,构建成△S19-2。用PCR与萤光素酶报告基因在布鲁氏菌中表达的方法进行验证,结果表明Bp26基因与Bmp18基因改造成功,△S19-2具有Bp26基因分子标记、Bmp18毒力基因缺失的特点。
- 闫广谋王兴龙任林柱刘锴高建勇王学理张辉李晓燕
- 关键词：布鲁氏菌分子标记同源重组
- 柔嫩艾美耳球虫Rhomboid相关基因重组卡介苗的研制及应用
- 李建华张西臣王秋悦张国才宫鹏涛杨举侯洪烈闫广谋段玲欣邓柏林陈超
- 该研究针对鸡球虫免疫预防中缺乏理想基因工程苗的现存问题，利用基因工程技术首先将柔嫩艾美耳球虫侵入相关基因Rhomboid克隆入重组卡介苗载体，通过PCR、酶切鉴定阳性重组质粒。然后将重组质粒经电穿孔方法转入卡介苗中，45...
- 关键词：
- 关键词：重组卡介苗柔嫩艾美尔球虫病基因工程
- 蜡样芽孢杆菌ATCC14579毒力基因plcR缺失株的构建及其一般特性被引量：6
- 2010年
- 蜡样芽孢杆菌是土壤中的优势菌,具有作为益生菌的潜在能力,同时它也是条件致病菌,能引起食物中毒等。蜡样芽孢杆菌的多种毒力因子受到多效性调控子(pleiotropic regulator,plcR)的调控,在其条件致病性作用中起着重要作用。真养产碱杆菌JMP34(Alcaligenes eutrophus)质粒上的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)单加氧酶(tfdA)基因可以降解2,4-D。本研究利用同源重组技术使tfdA基因置换掉蜡样芽孢杆菌的plcR基因,构建了蜡样芽孢杆菌ATCC14579突变株B.cereus△plcRΩtf-dA,并对其毒性、一般生理生化特性进行分析。研究结果表明,突变株B.cereus△plcRΩtfdA的毒性显著减弱;生理生化实验结果显示突变株与野生株并没有明显区别,且突变株并没有表现出tfdA酶活性。所有的结果表明plcR控制着蜡样芽孢杆菌ATCC14579的致病性,同时剔除plcR并不破坏其酶系统。本研究为今后构建蜡样芽孢杆菌工程菌提供了新的思路和依据。
- 吴威郑经成闫广谋王思洮盛相鹏胡丹张阳阳韩文瑜
- 关键词：蜡样芽孢杆菌同源重组
- 新城疫病毒TL1株P、NP、L蛋白基因表达载体的构建及鉴定被引量：2
- 2007年
- 将新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因通过RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pGEM-Teasy载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,命名为pCI-P、pCI-NP、pCI-L,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确.纯化后的重组质粒单独转染BHK-21细胞,经间接免疫荧光试验检测到了P、NP、L蛋白的表达.新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因的克隆成功,为即将进行的新城疫病毒的反向遗传操作奠定了基础.
- 王学理李晓艳关洪玉任林柱刘锴殷小宇闫广谋王兴龙
- 关键词：新城疫病毒间接免疫荧光
- 新城疫病毒TL1株P基因的克隆及序列分析
- 2007年
- 根据GenBank登陆的新城疫病毒P基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR技术对新城疫病毒内蒙古分离株TL1的P基因进行了扩增。将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出P基因的序列长度为1248bp,该基因的ORF总长为1188bp,编码395个氨基酸。与GenBank下载的12株参考毒株比较P基因编码区全核苷酸序列和氨基酸序列,发现TL1株与鹅源新城疫NA-1株核苷酸的同源性为99.8%,氨基酸的同源性为99.2%;与鹅源新城疫ZJ1株核苷酸的同源性为96.1%,氨基酸的同源性为95.5%,说明TL1株和与鹅源新城疫NA-1株、ZJ1株的同源性极高,它们三者亲缘关系较近,同属于基因VII型新城疫病毒。而与传统疫苗株LaSota核苷酸的同源性为83.4%,氨基酸的同源性81.8%,说明该毒株相对于经典的NDV在P基因上已发生了较大的变异。
- 王学理王兴龙李晓艳任林柱张辉闫广谋
- 关键词：新城疫病毒P基因
- 动物科技实验教学中心建设与改革被引量：5
- 2010年
- 以省实验教学示范中心建设为契机,不断更新实验教学观念,以提高综合素质为根本,强化实践能力为重点,培养创新型人才为目标,从中心实验教学理念、师资队伍建设、实验教材编写、实验教学体系构建、中心管理模式与运行机制等方面进行了探索与实践。
- 成军李颖闫广谋丁雪梅杨举范振勤赵志辉
- 关键词：实验教学中心教学改革
