陈月秀
- 作品数：30 被引量：131H指数：8
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 嗜酸乳杆菌对螺旋形和球形幽门螺杆菌黏附拮抗作用的研究被引量：6
- 2009年
- 目的研究热灭活状态和活菌状态嗜酸乳杆菌对螺旋形和球形幽门螺杆菌(Hp)的黏附拮抗作用。方法制备人胃上皮腺癌细胞系(AGS)细胞爬片,将两种状态嗜酸乳杆菌和不同形态Hp菌分组按不同顺序加入,作用2h,革兰染色后光镜观察分析Hp黏附指数产生的变化,荧光抗体染色法定性评价黏附于AGS细胞的Hp密度的改变。结果革兰染色后光镜观察分析:排除实验组及竞争实验组与对照组比较,黏附指数均有明显下降(P<0.05)。荧光镜下可见实验组黏附于细胞的Hp密度也明显降低。结论嗜酸乳杆菌对不同形态的Hp均具有黏附拮抗作用。
- 吴小茜佘菲菲李能陈月秀
- 关键词：乳杆菌嗜酸螺杆菌细菌黏附荧光抗体技术
- 在真核细胞中表达的幽门螺杆菌UreC,OipA抗原性的检测及其对细胞的作用被引量：1
- 2005年
- 目的:研究幽门螺杆菌(Hp)UreC、OipA基因重组子转染胃上皮细胞后表达产物的抗原性及其对胃上皮细胞的作用,为两种毒力因子DNA疫苗的研制提供可行性依据及安全性指标。方法:用RTPCR方法从国际标准株NCTC11637中获取UreC、OipA全长基因,克隆入pGEMTEasy载体并测序,以重组T载体为模板,将两种基因的开放读码框架分别定向克隆入pcDNA3.1载体;获得的重组子转染SGC7901细胞,筛选耐潮霉素的细胞克隆,用RTPCR及Immunoblot方法检测细胞内UreC、OipA蛋白的表达和抗原性;用荧光染色技术、MTT、流式细胞术分别检测UreC、OipA对细胞表型、增殖及凋亡的影响。结果:SoipA、SureC细胞(分别转染OipA、UreC重组子)表达相应的产物且具有抗原性。荧光显微镜下观察SoipA、SureC细胞未见明显形态学改变;用MTT法检测细胞增殖:SoipA、SureC细胞与SpcDNA3.1细胞(转染pcDNA3.1)比较,生长增殖无显著性差异(P>0.05),流式细胞技术检测细胞凋亡结果:SoipA和SureC的凋亡率与SpcDNA3.1比较无显著性差异(P>0.05)。结论:OipA、UreC在培养细胞内的表达产物具有抗原性且对细胞的功能无影响,可考虑用于制备DNA疫苗。
- 张静佘菲菲陈豪陈月秀
- 关键词：幽门螺杆菌OIPA细胞增殖基因转染
- 幽门螺杆菌oipA DNA重组质粒的构建及免疫保护作用被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)oipADNA重组质粒在防御Hp感染中的作用。方法:将HpoipA基因的开放读码框架定向克隆入pVAX1载体,获得的重组子pVAX1oipA转染SGC7901细胞,用RTPCR及ELISA方法检测细胞oipA转录及翻译水平的表达。抽提纯化重组质粒pVAX1oipA,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠(100μg/只)每周1次,共3次,以质粒pVAX1(空载组)和生理盐水(空白组)做对照,分别于末次注射1个月和2个月后ELISA法检测血清中相应抗体。在证实有免疫应答的基础上,以HpSS1攻击小鼠(0.5×1090.5ml/只)3次,于末次攻击4周后,取胃黏膜组织作细菌学(包括胃黏膜快速尿素酶试验、细菌培养鉴定)和组织学检测。结果:pVAX1oipA转染的SGC7901细胞在转录水平和翻译水平均有相应的表达;免疫小鼠产生抗oipA抗体。免疫小鼠经细菌攻击后,实验组、空载组和空白组胃黏膜组织快速尿素酶实验阳性率分别为0(0/10)、90%(9/10)和100%(5/5),细菌培养阳性率分别为20%(2/10)、90%(9/10)和100%(5/5),组织学检测结果:空载组和空白组小鼠胃黏膜均出现轻度或重度糜烂,而实验组小鼠胃黏膜80%(8/10)正常,显示oipADNA重组子具有免疫保护作用。结论:oipADNA重组子能有效诱导抗Hp保护性免疫反应。
- 吴小茜佘菲菲丁惠张静陈月秀
- 关键词：幽门螺杆菌OIPADNA免疫保护
- 幽门螺杆菌ureB基因转染胃上皮细胞及其对细胞的作用被引量：1
- 2005年
- 研究幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)ureB基因重组子转染胃上皮细胞后对胃上皮细胞的作用。用PCR方法从Hp标准株NCTC116 37中获取ureB全长基因 ,将其开放读码框架定向克隆入真核表达载体pcDNA3 1;获得的重组子转染SGC 790 1细胞 ,筛选耐潮霉素的细胞克隆 ,用RT PCR方法检测细胞内ureB基因在转录水平的表达 ;分别用荧光染色技术、MTT、流式细胞术检测UreB对细胞表型、增殖、凋亡及细胞周期的影响。UreB阳性表达的细胞 (SureB)胞膜出芽、细胞皱缩 ;用MTT法检测细胞增殖 ,结果表明 ,SureB细胞与SpcDNA3 1细胞比较 (pcDNA3 1转染的细胞 ) ,生长增殖无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,流式细胞术检测细胞凋亡结果显示 ,SureB的凋亡率显著高于SpcDNA3 1(P值为 0 0 0 7) ;细胞周期分析显示 ,SureB细胞有S期比率增高、G2 M、G0 G1 期比率下降的趋势。
- 张静佘菲菲陈月秀陈豪
- 关键词：幽门螺杆菌UREB细胞增殖细胞凋亡基因转染
- 应用DNA探针鉴定临床分离的念珠菌
- 2001年
- 〔目的〕制备念株菌DNA探针并应用于临床诊断。〔方法〕应用聚合酶链反应扩增白念珠菌标准株的EO3 基因 12 5bp片段 ,同时合成EO3 的 2 5bp特异寡核苷酸 ,扩增产物用半抗原地高辛标记 ,合成寡核苷酸用生物素标记制备成探针 ,检测两种探针显色敏感度 ,并与 2 3株临床分离的白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌及大肠杆菌等细菌进行斑点杂交试验。〔结果〕Dig- 12 5bpDNA探针显色敏感度为 0 .0 1pg,仅与白念珠菌杂交 ;Bio - / 2 5bpDNA探针显色敏感度为2 0pg ,与白念珠菌、热带念珠菌及近平滑念珠菌杂交。〔结论〕Dig- / 2 5bpDNA探针 ,可用于白念珠菌鉴定 ;Bio - 2 5bpDNA探针 ,可用于念珠菌初步鉴定。
- 佘菲菲朱苹陈月秀沈建箴吕联煌
- 关键词：白念珠菌念珠菌探针杂交
- 抗生素诱变的球形幽门螺杆菌定居毒力的研究被引量：24
- 1999年
- 目的揭示抗生素诱变的球形幽门螺杆菌（Ｈｐ）与定居有关毒力的变异情况。方法采用亚抑菌浓度抗生素作用，使５株Ｈｐ发生球形变异，检测球形Ｈｐ的尿素酶活性及其对Ｈｅｐ２细胞（喉癌上皮细胞）的粘附性，并用ＰＣＲ法检测其尿素酶Ａ，尿素酶Ｂ及粘附素基因。结果球形Ｈｐ尿素酶活性降低，对Ｈｅｐ２细胞的粘附性降低，电镜下可见球形Ｈｐ侵入细胞内。球形Ｈｐ的４１１ｂｐ尿素酶Ａ，１１５ｂｐ尿素酶Ｂ及３７５ｂｐ粘附素基因的ＰＣＲ均阳性。结论抗生素诱变的球形Ｈｐ与定居相关的毒力减弱，但其有关毒力基因片段未缺失。
- 佘菲菲苏东辉朱苹周琳瑛俞树高陈月秀
- 关键词：幽门螺杆菌抗生素类毒力HP感染
- 球形幽门螺杆菌对SGC-7901细胞增殖的影响被引量：8
- 2004年
- 目的 :了解球形幽门螺杆菌对体外培养细胞增殖的影响。方法 :采用抗生素诱导幽门螺杆菌标准菌株NCTC 116 37球变 ,将弯曲形和球形菌的菌悬液 (1× 10 8个 /ml )作 5倍梯度稀释 ,而后分别加入胃癌上皮细胞SGC 790 1,共孵育 3d后 ,用MTT法检测SGC 790 1细胞增殖的情况。结果 :高浓度的弯曲形和球形幽门螺杆菌 (>8× 10 7个 /ml )可明显抑制细胞的增殖 (P <0 .0 5 ) ;低浓度的球形幽门螺杆菌 (<1 2 8× 10 5个 /ml )可明显促进细胞的增殖 (P <0 .0 5 )。结论 :球形幽门螺杆菌在体外可影响SGC 790 1细胞的增殖。
- 陈豪张静佘菲菲陈月秀
- 关键词：球形幽门螺杆菌SGC-7901细胞增殖
- DNA扩增制备探针并用于临床白色念珠菌感染鉴定被引量：7
- 2004年
- 目的 应用聚合酶链反应技术扩增特异DNA片段 ,并制备成为可应用于临床鉴定白色念珠菌的基因探针。方法 采用聚合酶链反应技术特异地扩增白色念珠菌标准株DNAEO3 12 5bp基因片段 ,然后用半抗原地高辛配基标记 ,在完成基因探针显色敏感度检测之后 ,应用该基因探针分别对血液病病房分离的白色念珠菌、热带念珠菌及大肠埃希菌等多种细菌进行斑点杂交测试。结果 基因扩增制备Dig 12 5bpDNA探针显色敏感度为0 0 1pg,具有白色念珠菌特异性 ,与其他念珠菌和细菌不发生杂交。结论 基因扩增制备EO3 12 5bpDNA探针方法简便可靠 ,具有很强特异性 ,可应用于临床鉴定白色念珠菌感染。
- 沈建箴吕联煌佘菲菲朱苹陈月秀
- 关键词：DNA扩增探针白色念珠菌杂交
- 球形幽门螺杆菌体外细胞粘附性研究球形Hp系列研究之一被引量：2
- 1995年
- 通过采用延长培养时间和亚抑菌浓度抗生素的作用，使幽门螺杆菌（Ｈｐ）发生球形变异。电镜下观察球形Ｈｐ结构，并对球形Ｈｐ进行尿素酶活性测定和Ｈｅｐ－２细胞粘附试验，电镜下计算粘附率、粘附指数、侵袭率、侵袭指数。结果表明球形Ｈｐ具有完整的细胞壁，它不是Ｌ型细菌，尿素酶活性降低或消失，细胞粘附能力减弱，侵袭力与正常Ｈｐ无差异。以上两种方法诱变产生的球形Ｈｐ对细胞的粘附能力无差异。
- 佘菲菲刘延深陈月秀周琳瑛梁平俞树高郑秀芬
- 关键词：幽门螺杆菌细胞粘附尿素酶
- 幽门螺杆菌cagA、oipA、iceA1基因的检测及其意义被引量：20
- 2004年
- 〔目的〕检测分离自胃炎、胃溃疡患者的幽门螺杆菌 (Hp)cagA、oipA、iceA1基因 ,了解这些基因与消化性疾病的关系。〔方法〕取 163份临床胃活检标本 ,用布氏平板分离培养Hp ,分离培养出来的细菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增cagA、oipA、iceA1基因片段 ,用卡方检验进行统计学分析。〔结果〕163份标本中检出Hp 5 8株 ,检出率为 3 5 .6%。ca gA基因的阳性率为 75 .9%(4 4 5 8) ,其中胃炎 66.7%(2 8 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;oipA基因的阳性率为 46.6%(2 7 5 8) ,其中胃炎 2 6.2 %(11 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;iceA1基因的阳性率为 3 1.0 %(18 5 8) ,其中胃炎 2 1.4%(9 42 ) ,胃溃疡 3 3 .3 %(9 16)。卡方检验分析表明胃溃疡患者HpcagA、oipA、iceA1阳性率均显著高于胃炎患者。〔结论〕HpcagA、oipA、iceA1毒力基因在胃溃疡患者的检出显著高于胃炎患者。
- 张静佘菲菲陈月秀陈豪
- 关键词：幽门螺杆菌CAGAOIPA基因检测HP
