公共文化服务平台

陈琳: 作品数：14 被引量：48H指数：5; 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>; 发文基金：山东省科技发展计划项目国家水禽产业技术体系建设项目山东省高等学校科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

合作作者

鸭圆环病毒Cap基因在昆虫细胞—杆状病毒表达系统中的表达及鉴定: 通过PCR方法扩增完整的Cap基因，按正确的阅读框架将其克隆入pFastBacTM HTB杆状病毒载体中，将筛选的阳性重组载体pF-CP，转化至含有杆状病毒穿梭载体和辆助载体的DH10Bac大肠杆菌感受态细胞中，经过蓝白...; 邹金峰相琪旺陈琳雷战孙慧魏宗王鑫姜世金; 关键词：鸭圆环病毒

鸭圆环病毒Cap基因在昆虫细胞杆状病毒系统中的表达及鉴定被引量：4: 2012年; 通过PCR方法扩增完整的鸭圆环病毒Cap基因,按正确的阅读框架将其克隆入pFastBacTM HTB杆状病毒载体,将筛选的阳性重组载体pF-CP转化至含有杆状病毒穿梭载体和辅助载体的DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,经过蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBacmid-CP。在脂质体的介导下转染Sf9昆虫细胞,72h后获得重组杆状病毒。Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验结果表明,表达的蛋白与原核表达Cap蛋白免疫小鼠采集的血清具有良好的反应原性,为进一步研究Cap蛋白的功能奠定基础。; 张兴晓邹金峰相琪旺王鑫陈琳谢之景姜世金; 关键词：鸭圆环病毒 IFA

1株B亚型禽偏肺病毒的分离与鉴定被引量：8: 2014年; 从山东省多个地区的商品肉鸡养殖场采集64份疑似病料，通过RT—PCR方法检测出37份禽偏肺病毒阳性病料，以此作为病毒分离材料接种SPF鸡胚，盲传至第7代时鸡胚生长明显迟滞。取阳性尿囊液在CEF中培养，呈现禽偏肺病毒典型细胞病变（CPE）：细胞变圆、悬浮，有合胞体形成。将分离株接种于Veto细胞及DF-1细胞均出现类似病变。对分离株F基因进行测序，并与GenBank中发表的部分代表序列比较。结果显示，与B亚型禽偏肺病毒的核苷酸同源性最高，为97．4％～99．3％；与A亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性较低，为77．4％～78．1％；而与C亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性最低，为69．5％～69．7％。基因分型显示分离株为B亚型禽偏肺病毒，将该毒株命名为禽偏肺病毒SDWF株。; 薛聪唐熠陈琳崔京腾欧全宾孙晓艳裴苹苹刁有祥

B亚型禽偏肺病毒重组G蛋白间接ELISA方法的建立及应用被引量：4: 2013年; 以纯化的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白作为包被抗原,对各项条件进行优化,确定判定标准,建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA方法。将构建好的重组质粒转入Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得重组G蛋白。利用亲和层析法对表达产物进行纯化,并用Western-blotting对表达产物进行鉴定。以纯化后的重组G蛋白作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测B亚型aMPV抗体的间接ELISA诊断方法。结果显示,成功表达并纯化了B亚型aMPV疫苗株(VIR-115B)重组G蛋白,Western-blotting检测结果证明表达产物具有良好的反应原性。以重组G蛋白作为诊断抗原,建立了间接ELISA诊断方法。交叉试验结果表明重组G蛋白与新城疫、禽流感(H9N2)、传染性支气管炎和传染性法氏囊阳性血清均不发生交叉反应。该方法与法国IDEXX公司生产的aMPV抗体检测试剂盒符合率为96.0%。采用本试验建立的间接ELISA方法对山东省7个地区鸡场的1 139份鸡血清进行了检测,结果表明,山东省部分地区aMPV的抗体阳性率为37.05%。本试验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,利用该方法初步证实山东省部分地区存在aMPV感染现象。这一研究为aMPV诊断试剂盒的研制奠定了基础,并为该病的诊断与流行病学调查提供有效的技术手段。; 陈琳刁有祥邹金峰唐熠程彦丽欧全宾薛聪崔京腾鞠小军孙晓艳裴萍萍; 关键词：B亚型间接ELISA

山东省鸡鼻气管鸟杆菌的分离与鉴定被引量：4: 2010年; 【目的】对山东省鸡鼻气管鸟杆菌进行分离鉴定。【方法】采集山东省不同地区有呼吸道症状的病(死)鸡,进行鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)的分离,根据培养特性及生化试验和玻片凝集试验结果对分离的菌株进行鉴定;应用PCR方法对分离菌株16SrRNA基因的一段保守序列进行扩增,应用琼脂扩散沉淀试验(AGP)对分离菌株的血清型进行鉴定,并对分离株进行药敏试验。【结果】试验共分离到5株ORT,所有分离菌株均能扩增到1条长671bp的特异性片段,而阴性对照菌株的扩增结果为阴性;5株ORT分离菌株可分为3个血清型,其中血清A型3株、血清B型1株、血清D型1株;分离ORT菌株对羟氨苄青霉素、头孢曲松、丁胺卡那、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星高度敏感。【结论】从山东省病死肉鸡中分离鉴定到5株ORT。; 吴海洋刁有祥李瑶瑶李建侠孙静刘霞陈琳; 关键词：鼻气管鸟杆菌

禽偏肺病毒检测方法的建立及应用: 禽偏肺病毒（Avian metapneumovirus，aMPV）于1978年首次在南非报道，主要引起火鸡和鸡的上呼吸道或中枢神经系统疾病，如火鸡鼻气管炎(Turkeyrhinotracheitis，TRT)和肉鸡的肿头...; 陈琳; 关键词：病毒检测 RT-PCR法核酸探针检测间接ELISA检测

鸭源新城疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立被引量：3: 2011年; 【目的】建立鸭源新城疫病毒逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法,为鸭源新城疫病毒的快速诊断提供支持。【方法】选取鸭源新城疫病毒NP基因的相对保守区序列,利用Primer Explorer V4在线软件设计了3对RT-LAMP引物,以鸭源新城疫病毒SDFCH株RNA为模板进行RT-LAMP反应,通过对反应温度、时间及反应体系各组分浓度的筛选,优化反应体系和反应条件,然后对该方法的灵敏性和特异性进行检测(以RT-PCR方法为对照),并将其应用于临床病料检测。【结果】优化的RT-LAMP反应体系能够在63℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,反应结果可直接用肉眼判断;建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法特异性较强,灵敏度较高,与其他病毒,如H9N2亚型禽流感病毒(AIV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、禽偏肺病毒(aMPV)、传染性支气管炎病毒(IBV)等的核酸无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标RNA(0.1pg/μL),较普通RT-PCR的灵敏性高10倍;利用建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法对24份疑似鸭源新城疫样品的阳性检出率为41.7%。【结论】建立的鸭源新城疫病毒的RT-LAMP检测方法,具有快速、准确、特异性强、灵敏度高的特点。; 鞠小军刁有祥唐熠程彦丽陈琳李建侠宋晓娜; 关键词：新城疫病毒

B亚型禽偏肺病毒核酸探针的制备与应用: 目的：为探明山东省禽偏肺病毒(aMPV)的流行情况，制备B亚型禽偏肺病毒棱酸探针对我省部分地区的商品肉鸡进行病原检测。方法：根据GenBank中已经发表的B亚型禽偏肺病毒基因的保守序列，设计合成一对引物，利用...; 陈琳刁有祥孙静邹金峰刘霞鞠小军; 关键词：商品肉鸡; 文献传递

禽偏肺病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：19: 2012年; 根据GenBank中已经发表的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)F基因的保守序列设计并合成1对引物,利用RT-PCR可以扩增出1条725bp的片段,进行特异性试验和敏感性试验,建立了禽偏肺病毒病的RT-PCR检测方法。特异性试验表明,建立的RT-PCR检测方法能够从禽偏肺病毒疫苗毒株VIR 115-B中扩增到725bp的特异性片段,而对H9N2亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒的扩增结果均为阴性;敏感性试验表明,该方法最低检出量的cDNA质量浓度为1.45μg/L;对山东省492份病料进行检测,阳性检出率为43.09%(212/492),随机挑取11份进行克隆测序及序列分析,结果显示所扩增到的阳性产物均为B亚型的禽偏肺病毒。建立的禽偏肺病毒的RT-PCR检测方法具有快速、准确、特异性强、敏感性高的特点。; 陈琳刁有祥邹金峰

鸭瘟与鸭副黏病毒混合感染种鸭的诊治被引量：6: 2011年; 2010年7月，山东省潍坊市某种鸭场暴发疑似鸭瘟与鸭副黏病毒混合感染。临床症状主要表现为：头颈肿大，流泪；咳嗽，呼吸困难；下痢，排绿色或灰白色稀便，泄殖腔周围羽毛被粪便污染；并引发产蛋明显下降症状。; 张坤刁有祥陈琳; 关键词：副黏病毒种鸭场鸭瘟诊治白色稀便

陈琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

陈琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈