顾琴龙
- 作品数：117 被引量：406H指数：11
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学环境科学与工程更多>>
- 沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究
- 2007年
- 目的 初步观察用小分子干扰RNA（siRNA）沉默树突状细胞（DCs）恒定链（Ii）后，DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法 从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞，细胞经100ng／ml GM—CSF和100ng／ml IL-4诱导培养6d后，转染针对DCs Ii链特异的Ii—siRNA，转染后加用50ng／ml TNF—α继续诱导细胞成熟48h，然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力；此外，DCs共转染Ii—siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后，与同种异体淋巴细胞共培养，通过ELISA检测培养上清IFN-γ和IL-4的水平，并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果 Ii—siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力，并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ：（5107±351）pg／ml，IL-4：（65±13）pg／ml，P〈0．05]。淋巴细胞经共转染Ii—siRNA和MFC RNA的DCs激活后，明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞（杀伤百分率：66．94％±2．75％，P〈0．05）。结论 通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。
- 柯山陈雪华蔡劬李建芳俞焙秦顾琴龙朱正纲刘炳亚
- 关键词：RNA干扰免疫细胞树突状细胞
- 胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备
- 2007年
- 目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆笔pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blotting和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blotting和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。
- 王运伟朱正纲顾琴龙
- 关键词：胃癌肿瘤相关抗原融合蛋白多克隆抗体
- SEREX方法鉴定胃癌肿瘤相关抗原基因被引量：8
- 2005年
- 目的采用重组CDNA表达文库血清学分析法(SEREX法)寻找胃癌相关肿瘤抗原的编码基因。方法抽提胃癌细胞株SGC7901和1例胃癌组织标本PolyA+RNA,分别构建2个胃癌cDNA表达文库,用含有抗体的胃癌患者血清对2个文库进行筛选,并对筛选所得到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果经测定2个原始文库滴度分别为1.6×106pfu和2.5×106pfu,重组率为95%和98%。2个文库经3轮筛选共获得14个胃癌肿瘤相关抗原编码基因,其中一个为未知基因。13个已知基因编码产物包括代谢酶、RNA转录和翻译调控蛋白、蛋白代谢相关分子、自身免疫疾病相关抗原及未知功能蛋白分子。结论 胃癌相关肿瘤抗原编码基因的筛选和鉴定,为胃癌的临床诊断和特异性免疫治疗提供了靶点,有助于对胃癌发生机制的深入理解。
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳陈雪华刘炳亚林言箴
- 关键词：胃癌相关抗原SEREX癌肿瘤CDNA表达文库重组率
- Linomide抑制胃癌生长和转移的实验研究
- 2001年
- 目的：探讨Ｌｉｎｏｍｉｄｅ对胃癌生长和转移的作用。方法：将人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１原位种植于裸鼠，制成胃癌模型。在荷瘤鼠饮用水中加入不同剂量的Ｌｉｎｏｍｉｄｅ，于第１０周时处死动物，测定肿瘤体积并检查胃周淋巴结转移情况。结果： Ｌｉｎｏｍｉｄｅ抑制胃癌生长的作用程度与其剂量有关，１６０ ｍｇ／ｋｇ的Ｌｉｎｏｍｉｄｅ对胃癌生长抑制作用明显（Ｐ＜０．０５）；对胃周淋巴结转移的抑制率与对照组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５），但抑制率达到４０％。结论：Ｌｉｎｏｍｉｄｅ是胃癌生长和转移的一种有效抑制剂，其抗肿瘤作用及机制值得进一步研究。
- 顾琴龙陶厚权朱正纲林言箴
- 关键词：胃肿瘤肿瘤生长肿瘤转移LINOMIDE
- 我校十年获奖成果的特点、存在问题及对策
- 回顾了我校十年来科技成果获奖情况，对我校科技工作发展的特点和趋势、已有的优势及存在问题进行分析，提出相应的建议和对策，为进一步获得高层次的奖励提供借鉴。指出在成果数量增加同时更应该注重成果的含金量，同时应加强学科建设及各...
- 董云霓徐鸣华顾琴龙冯漪
- 关键词：统计分析学科建设
- 文献传递
- Tuftsin对荷肝癌小鼠免疫功能的影响被引量：2
- 1992年
- 白细胞介素2、NK细胞活性和淋巴细胞转化率等指标可以反映机体免疫功能及预后。作者观察了荷肝癌小鼠应用tuftsin注射及不用tuftsin时上述三项指标的对比。结果表明,不用tuftsin的荷癌鼠三项免疫指标均明显低于应用tuftsin的荷癌鼠。差异有显著性,实验提示,tuftsin具有抗肿瘤作用,可以提高荷癌动物的抗肿瘤免疫力,tuftsin对三项免疫指标的影响,是其抗肿瘤作用机理之一。作者认为,tuftsin可望作为治疗恶性肿瘤的一部分。同时测定血清tuftsin对预后了解有一定意义。
- 顾琴龙杨永康章仁道刘生光徐振山
- 关键词：TUFTSIN肝肿瘤免疫功能
- 肝癌脾转移2例报告被引量：3
- 1996年
- 肝癌脾转移２例报告长城特殊钢公司总医院（６２１７００）姜淮芜，夏觉中，孙秀华上海第二医科大学附属瑞金医院顾琴龙，陈双转移性脾肿瘤少见。由原发性肝癌转移至脾脏者更为罕见’‘’。１９８８年１０月至１９９１年９月，我们收治２例，现报告如下。例１，女，４８岁...
- 姜淮芜夏觉中孙秀华顾琴龙顾琴龙
- 关键词：肝肿瘤肿瘤转移脾转移
- 胃癌细胞总RNA修饰树突状细胞肿瘤疫苗的初步研究
- 目的:应用肿瘤细胞 RNA 修饰小鼠树突状细胞(dendrtic cell,DC)的肿瘤疫苗免疫小鼠,研究其抗肿瘤免疫作用。方法: CD11c 磁珠抗体标记小鼠脾细胞悬液,磁性细胞分选器(MACS)分选出 CD11c+的...
- 陈雪华刘炳亚李建芳尹浩然朱正纲顾琴龙林言箴
- 文献传递
- 蛋白质组技术在胃癌相关标志物筛查中的应用被引量：17
- 2006年
- 目的建立胃癌组织和正常胃组织双向凝胶电泳图谱,鉴定差异表达蛋白,从中发现有意义的胃癌相关标志物。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)分离胃癌组织和正常胃组织总蛋白,银染显色,PDQuest软件分析,从中选取差异表达蛋白质点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)或MALDI-TOF-TOF-MS鉴定差异表达的蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的胃组织双向凝胶电泳图谱；发现23个差异表达蛋白质,其中15个得到鉴定,在肿瘤组织中高表达的有10个,其余5个在肿瘤组织中低表达。结论建立了胃癌组织和正常胃组织双向凝胶电泳图谱,并应用质谱技术鉴定了15个差异表达蛋白质。
- 李炜刘炳亚李建芳陈雪华李琦蔡劬顾琴龙朱正纲林言箴
- 关键词：蛋白质组双向凝胶电泳质谱胃癌
- 胞嘧啶脱氨酶基因对胃癌细胞的杀伤作用被引量：4
- 1999年
- 目的探讨胞嘧啶脱氨酶基因对胃癌细胞的杀伤作用。方法应用胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因，通过逆转录病毒载体转入人胃癌细胞Ｍ８５中，经０．４ｍｇ／ｍｌ的Ｇ４１８筛选阳性克隆扩增后进行前药５ＦＣ敏感试验。结果转ＣＤ自杀基因的Ｍ８５细胞较亲代Ｍ８５细胞对前药的敏感性显著增高（Ｐ＜０．０５）。体外实验中还观察到，前药在对转自杀基因的Ｍ８５细胞产生杀伤作用同时，还对与其共培养的亲代Ｍ８５细胞产生明显的杀伤作用，即“旁观者效应”。进一步将转基因Ｍ８５细胞和未转基因Ｍ８５细胞接种至裸鼠皮下，发现两者成瘤性无明显差异；前药５ＦＣ对未转基因肿瘤的生长无影响，而对转基因肿瘤的生长明显抑制。结论本研究为ＣＤ基因治疗胃癌向临床过渡提供了依据。
- 崔龙程慧玉林言箴朱正纲朱正纲刘炳亚陈雪华郁宝铭
- 关键词：自杀基因基因治疗胞嘧啶脱氨酶
