马保臣
- 作品数：64 被引量：371H指数：11
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 奶牛乳腺炎的细菌学研究被引量：23
- 2005年
- 在对山东7个地区14个奶牛场临床型和隐性乳腺炎调查的基础上采集234头临床乳腺炎病牛乳样、241个隐性乳腺炎乳样并分别做了细菌学检查,结果表明:泌乳期临床型乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、酵母菌和棒状杆菌为主;干奶期临床型乳腺炎病原菌以大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和酵母菌为主;隐性乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌为主;厌氧菌在隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎和干奶期乳腺炎乳样的捡出率分别为 5．82％,4．17%,10．16％;隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎细菌的共感染率较高,与泌乳期乳腺炎病原菌的差异极显著(P<0．01),隐性乳腺炎与干奶期乳腺炎病原菌共感染率差异不显著(P >0．05)。
- 马保臣牛家华高玉君秦卓明柴同杰李建基王春璈
- 关键词：奶牛乳腺炎细菌学
- 多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用被引量：46
- 2006年
- 参照GenBank发表的序列,在金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌16S rRNA与23S rRNA之间的区域设计了3对引物,参照念珠菌和隐球菌的18S rRNA的序列设计1对引物,建立了检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌4种乳腺炎主要致病菌的多重PCR方法。参照Skladny的方法制备模拟了细菌感染临床标本。结果表明:本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性,多重PCR方法检测乳样中的金黄色葡萄球菌的细菌最小浓度为104CFU/mL,检测无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌的细菌最小浓度分别为102CFU/mL、103CFU/mL和103CFU/mL。通过对采自临床型乳腺炎(46个)和隐性乳腺炎(167个)动物共计213个乳样分别用传统细菌学培养法和多重PCR方法进行检测,多重PCR对金黄色葡萄球菌和酵母真菌的检测具有更高的检出率(P<0.01),但该方法对无乳链球菌和停乳链球菌的检出率与培养法差异不显著(P>0.05)。
- 马保臣秦卓明蔡玉梅董玉兰柴同杰
- 关键词：多重PCR乳腺炎金黄色葡萄球菌无乳链球菌停乳链球菌
- 快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法被引量：1
- 2008年
- 综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法,采用β-巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的DNA,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法。建立双重PCR方法,同时完成对细菌16S rRNA保守区特异性基因片段和真菌18S rRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染。对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重PCR方法对比鉴定。结果表明,双重PCR检测乳样细菌的最小浓度为102CFU/mL,检测乳样真菌的最小浓度为103CFU/mL。双重PCR方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(P>0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(P<0.01)。
- 戈胜强柴同杰马保臣李晓霞蔡玉梅吕静秦梅王炳晓
- 关键词：奶牛乳腺炎细菌真菌双重PCR
- 手术治疗奶牛真胃积食
- 2002年
- 对一头体重约为 60 0 kg的患有真胃积食的奶牛进行手术治疗 ,由于牛体过大不能采用左肷部中切口 ,而采用右侧肋骨弓下斜切口行真胃切开术 ,手术成功。作者认为体重超过50 0 kg的奶牛 ,如果体质良好 ,左侧倒数第二肋骨处切口行瘤胃切开术是诊断及治疗真胃积食的有效方法 ;
- 马保臣曹杰王春王敖董玉兰王荣迁
- 关键词：奶牛真胃积食手术治疗
- 奶牛真胃积食的诊疗被引量：1
- 2002年
- 马保臣曹杰王春璈王龙胜
- 关键词：奶牛真胃积食症状
- 奶牛乳腺炎防治的思考
- 2003年
- 防治失败的原因抗生素对乳腺炎防治失败的原因与分析抗生素是防治奶牛乳腺炎首选药物,但是许多抗生素在防治乳腺炎的过程中效果不佳或治疗不久又复发,一般有以下几种原因:①抗生素在乳腺的分布较差。例如,氨基糖苷类药物链霉素、新霉素等脂溶性较差,而且乳腺的水肿和凝乳块又阻碍了抗生素的吸收;一些抗生素,如四环素,一旦与乳汁结合,抗菌活性明显降低;有些抗生素,如青霉素类,半衰期较短,有效药物浓度维持时间不足或用药时间间隔太长,难以达到杀灭细菌的目的。②细菌耐药性的形成。长时间使用1种或2种抗生素,会引起细菌的耐药性或交叉耐药性。例如,大多金黄色葡萄球菌对青霉素有耐药性;凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、四环素、甲氯苯青霉素、先锋霉素等有耐药性;大多数革兰氏阴性菌表现出对链霉素、四环素、氨苄青霉素、羟氨青霉素等有耐药性。另外,细菌在乳中可形成一层荚膜多糖,该荚膜多糖可防止细菌被抗生素浸透。
- 马保臣张玉利
- 关键词：奶牛乳腺炎耐药性抗生素抗药性
- 疫苗佐剂的研究进展被引量：11
- 2006年
- 王传强马保臣秦卓明袁小远
- 关键词：疫苗佐剂破伤风类毒素分子生物学技术免疫佐剂抗原肽生物化学
- 奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白配基结合区基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2008年
- 运用PCR方法扩增出奶牛乳腺炎分离株10A的Fnbp配基结合区基因,该片段大小为350bp左右,将其与PGEM-T载体连接,转化到受体菌DH5α中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板筛选出含有重组子的菌株,鉴定成功后,测序结果表明:奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌10A的Fnbp配基结合区基因的序列与金黄色葡萄球菌Mu50、N315、MSSA476、MW2、RF122、COL以及NCTC8325的相应区域序列同源性分别为97%、97%、95%、95%、96%、94%和94%。将重组克隆载体质粒进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切回收后的DNA,定向插入到融合表达载体PET-32a中,构建了重组质粒PET-Fnbp,并转化到宿主菌BL21(DE3)株中,经IPTG4h诱导后,SDS-PAGE电泳表明,重组蛋白得到高效表达,重组蛋白主要以分泌形式存在,分子量35000左右,Ni柱纯化后的蛋白经Western-blotting检测,具有良好的抗原性和特异性。
- 马保臣秦卓明董玉兰柴同杰袁小远
- 关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌FNBP
- 奶牛乳腺炎的研究
- 该研究对奶牛临床型乳腺炎病原进行了分离鉴定,药敏试验并对临床病例进行了治疗试验;研制了乳头中药消毒剂并对其进行了临床应用,对隐性乳腺炎病牛的乳腺作了病理学观察,该研究主要由八个实验组成:试验一:奶牛乳腺炎的调查报告;实验...
- 马保臣
- 关键词：奶牛乳腺炎病原菌消毒剂
- 奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌Fnbp和Cnap基因的调查及Fnbp基因的克隆与原核表达
- 金黄色葡萄菌是奶牛乳腺炎的重要病原。近些年来，抗生素的广泛应用，金黄色葡萄球菌的抗菌谱逐渐扩大，给临床治疗和预防金黄色葡萄球菌乳腺炎提出新的挑战。国内用黏附素来预防奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌研究还未见报道，本实验对奶牛乳腺...
- 马保臣秦卓明王春璈柴同杰
- 关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌原核表达
