高剑峰
- 作品数：131 被引量：376H指数：9
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程文化科学更多>>
- 菊粉酶产生菌的筛选及^(60)Co诱变选育
- 2014年
- 目的:从新疆石河子盐碱地菊芋生长根际土壤中分离筛选高产菊粉酶活力菌株。方法:通过稀释平板涂布法分离微生物;利用60Co诱变选育,96孔板筛选突变菌株;采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定菊粉酶酶活。结果:分离到12株具有菊粉酶活力的菌株,复筛得到1株高产菊粉酶活力菌株,将其命名为G-60;以此菌株为出发菌株进行60Co诱变,利用96孔板对诱变菌株进行筛选,经摇瓶发酵酶活测定,得到1株高产菊粉酶酶活的突变株,酶活达46.62 U/mL,是未诱变菌株酶活的2.72倍。结论:经诱变得到1株高产菊粉酶活力的突变菌株。
- 苟亚峰王丹李建华朱军保葛娟高剑峰
- 关键词：菊粉酶菌株筛选
- NO/ADMA在布鲁菌侵染小鼠机体过程中的响应特征被引量：1
- 2016年
- 本试验旨在研究布鲁菌侵染小鼠过程中一氧化氮(NO)的作用,以及NO和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在此过程的相互作用关系。以布鲁菌标准疫苗株M5侵染小鼠,首先用小鼠的血清进行虎红平板凝集(RBPT)和试管凝集试验(SAT),再用Griess试剂法和ELISA法测定对照组和侵染组不同组织和血清中的NO和ADMA含量,对小鼠肝脏和脾脏的各个侵染时间段进行CFU计数观察。结果显示,用布鲁菌M5侵染小鼠后,RBPT和SAT在14d时检测到有阳性反应。侵染组和空白对照组NO总含量上变化不大,但侵染组血清中的NO含量随时间出现下降,而肝脾中NO含量随时间出现上升,其他各组织NO含量波动不明显。而ADMA的总趋势与NO相反。CFU计数结果显示,小鼠肝脾内布鲁菌的数量在14d时一直处于增长状态,28d时布鲁菌的数量下降,表明布鲁菌的分裂繁殖和机体NO的含量存在一定的关系。
- 胡梦薇许万云刘朋涛严国汪文伦高剑峰
- 关键词：一氧化氮非对称性二甲基精氨酸
- 基因组文库的构建和池化筛选被引量：3
- 2010年
- 作为物种保护策略的重要部分,建立濒危畜禽的基因组文库,可有效保存濒危畜禽种质资源。BAC(bacterialartificial chromosome)文库具有高容量、遗传特性稳定和嵌合体少等优点,因而被用于畜禽基因组文库的构建。对BAC文库的构建方法和文库池化筛选系统作一综述。
- 陈献伟娜日苏朱超王会雷娜高剑峰关伟军马月辉
- 关键词：基因组文库
- 小拟南芥chitinase基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2005年
- 以野生资源小拟南芥(Arabidopsis pum ila)chitinase基因的cDNA为基础,采用基因重组技术,将该基因按正确的阅读框架定向克隆于原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS—PAGE分析。结果表明:重组小拟南芥chiti-nase基因在大肠杆菌中获得高效表达,其分子量约为40 KD。小拟南芥chitinase基因原核表达载体的成功构建和重组小拟南芥chitinase蛋白在大肠杆菌中的高效表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 朱新霞田丽萍高剑峰祝建波
- 关键词：小拟南芥CHITINASE大肠杆菌基因表达生物学功能
- 加强实验中心建设,提高实验教学质量被引量：3
- 2009年
- 本文从实验室管理、建设和实验教学团队建设等方面,探讨了实验中心建设的重要性,是提高实验教学质量的根本保障。
- 李予霞李桂芳高剑峰
- 关键词：实验室管理实验教学
- 黄瓜芽黄突变体叶片的蛋白组学研究被引量：7
- 2010年
- 为筛选影响芽黄现象的差异表达蛋白,采用双向电泳-质谱技术研究黄瓜芽黄突变体与正常黄瓜的蛋白表达差异。提取相同生长时期的芽黄突变体黄瓜yh与正常黄瓜的叶片组织的总蛋白,进行双向凝胶电泳,其结果应用PDQuest软件分析。共选取22个蛋白进行MALDI-TOF质谱分析,结果表明,22个蛋白中芽黄突变体中上调表达的有7个,正常黄瓜中上调表达的有6个,无明显差异的蛋白9个。本实验成功建立了黄瓜芽黄突变体双向电泳分析体系,并筛选出差异蛋白,为黄化突变体分子机制研究奠定了一定基础。
- 胡丹凤李鸿彬陈远良陈芳高剑峰
- 关键词：黄瓜芽黄突变体蛋白表达双向电泳质谱
- 人乳铁蛋白的沙漠小球藻表达系统的构建与鉴定被引量：1
- 2017年
- 为获得人乳铁蛋白的沙漠小球藻(Chlorella sp.GTD8A1)的表达系统和稳定的小球藻GTD8A1-h LF工程藻种,将人乳铁蛋白基因导入小球藻细胞中进行表达鉴定。以人血c DNA为模板,RT-PCR扩增得到人乳铁蛋白基因(Gen Bank登录号NM-002343.4),经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后,连接到植物表达载体p CAMBIA2300-35S-OCS中,获得重组质粒载体p CAMBIA2300-35S-h LF-OCS,将重组质粒电击转入GTD8A1中,通过菌落PCR鉴定后扩大培养,在DNA和RNA水平分析人乳铁蛋白基因的整合和转录,SDS-PAGE和Western Blot分析获得70 ku的目的蛋白;将转基因藻种(GTD8A1-h LF)在BBM培养基中进行培养周期优化。结果表明,重组人乳铁蛋白在沙漠小球藻细胞中表达成功;通过Elisa测其人乳铁蛋白表达量在20 d时达到最大,浓度为13.28 mg/L。
- 牟云汪文伦许万云胡梦薇王丹严国王会敏高剑峰
- 关键词：小球藻人乳铁蛋白SDS-PAGEWESTERNBLOT
- 中国美利奴羊OLA-DQB1基因exon 2遗传多态性与布鲁氏菌病易感性的关联分析被引量：2
- 2015年
- 本试验采用PCR-SSCP方法对148只布鲁氏菌阴性和60只布鲁氏菌阳性中国美利奴羊白细胞表面抗原DQB1(OLA-DQB1)基因exon 2单核苷酸多态性(SNPs)进行了检测,之后挑选不同等位基因进行PCR产物测序,旨在确定该基因的多态性位点,并对每个SNP位点的等位基因频率、基因型频率进行统计分析,从而分析其多态性与布鲁氏菌病易感性的相关性。测序结果表明,在270bp的序列内共检测到43个SNPs,其中G196A位点的等位基因频率在病例组和对照组中的分布存在极显著差异(P<0.01),其基因型频率存在显著差异(P<0.05);C211T位点的等位基因频率在病例组和对照组中存在显著差异(P<0.05)。由此表明,OLA-DQB1基因exon 2多态性与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性呈显著相关。
- 王文文许万云胡梦薇李建华刘朋涛高剑峰
- 关键词：PCR-SSCP中国美利奴羊
- 黄瓜芽黄突变体的超微结构分析被引量：9
- 2007年
- 利用电镜技术,对黄瓜芽黄突变体yh叶片的超微结构进行了分析。结果表明:黄瓜芽黄突变体yh与正常体在叶绿体的基粒片层数、基质、嗜锇滴的数量和线粒体的嵴等方面存在明显差异。
- 陈福龙高剑峰李景富陈远良闫洁陈季恂
- 关键词：黄瓜芽黄突变体超微结构
- 黏红酵母色素产量主要影响因子筛选及色素初步分离鉴定被引量：1
- 2010年
- 在单因素研究的基础上,选定蔗糖、蛋白胨、酵母提取物、MgSO4.7H2O、Na2HPO4、接种量、装载量、最佳初始pH值8个因素,进行初步优化得到色素产量比优化前的基础培养基(YPS)中的色素产量(3.8μg/mL)提高了75.6%(15.56μg/mL)。运用Plackett-Burman实验对影响红酵母产色素能力的主要因素进行筛选,研究发现,蔗糖(p=0.010084)、蛋白胨(p=0.03035)、酵母提取物(p=0.018828)、接种量(p=0.048469)对红酵母色素的影响显著,经TLC和HPLC鉴定结果显示红酵母色素至少含有4种组分,其中1种色素成分为β-胡萝卜素。
- 王林刚周斌李海军陈芳高剑峰
- 关键词：红酵母色素Β-胡萝卜素
