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C型Niemann-Pick病神经变性机制研究进展被引量：1: 2006年; C型NiemannPick病是一种常染色体隐性遗传的致命性脂质沉积和神经变性疾病。目前认为,npc1或npc2基因突变所致的胆固醇和鞘类脂质代谢异常以及细胞周期依赖性蛋白激酶异常活化引起的神经元骨架损伤参与了该病神经变性过程。对该病神经变性机制的认识与明确,将有助于探明神经元变性的基本分子机制和开发出有效治疗药物。; 丁志刚张旻姜亚平; 关键词：C型NIEMANN-PICK病脂质代谢细胞骨架神经元变性

Roscovitine对C型尼曼-皮克病小鼠球状神经轴突形成的影响被引量：1: 2007年; 目的探讨细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂roscovitine对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠(npc-/-)球状神经轴突形成的影响。方法采用不同浓度的roscovitine(72,144,300 and 600nmoles/day)对5.5周龄的npc-/-小鼠进行两周侧脑室灌注,以DMSO灌注的同龄npc-/-小鼠为对照。抗非磷酸化神经细丝蛋白抗体SMI32和抗有丝分裂期磷酸化表位抗体MPM-2免疫染色检测小鼠脑内球状神经轴突的数量,Western blot检测细胞骨架蛋白磷酸化程度的变化。结果Roscovitine组球状神经轴突数量较DMSO组显著减少,神经细丝和tau蛋白的过度磷酸化程度较对照组明显下降(P<0.05)。结论细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂能明显改善NPC的神经元细胞骨架损害。; 张旻赵娟丁志刚卜碧涛王伟Inez Vincent; 关键词：细胞周期依赖性蛋白激酶 ROSCOVITINE C型尼曼-皮克病

利用Helper-Free系统构建cdk5-siRNA腺相关病毒载体并鉴定被引量：2: 2006年; 目的构建能表达CDK5特异性小干扰RNA(siRNA)(cdk5-siRNA)的重组腺相关病毒(AAV)载体,体外观察其对CDK5基因的沉默作用。方法采用基因克隆技术将合成的特异性cdk5 RNA干扰寡核苷酸序列克隆至AAV Helper-Free System中的表达质粒pAAV-MCS,构建出质粒pAAV-MCS-cdk5-siRNA,通过酶切测序鉴定重组质粒;将该质粒与系统中的控制质粒pAAV-RC、辅助质粒pHelper用磷酸钙法共转染HEK293细胞,包装得到表达cdk5-siRNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-cdk5-siRNA);用斑点杂交法测定重组病毒的滴度,重组病毒感染体外培养的PC12细胞,W estern b lot检测其抑制cdk5表达的效果。结果成功构建并包装出重组腺相关病毒载体rAAV-cdk5-siRNA,病毒滴度达4×1013/m l,重组病毒感染后的PC12细胞cdk5表达明显下调。结论构建的重组腺相关病毒载体rAAV-cdk5-siRNA能明显干扰cdk5的表达,为将其进一步应用于神经变性疾病的治疗研究奠定了基础。; 丁志刚张旻姜亚平卜碧涛王雪贞; 关键词：CDK5 小干扰RNA 腺相关病毒神经变性

细胞周期依赖性蛋白激酶-5在C型尼曼-皮克病神经元变性中的作用: 2009年; 目的确定细胞周期依赖性蛋白激酶-5(cyclin dependent kinases-5,cdk5)在C型尼曼-皮克病(Niemann-Pickdisease type C,NPC)神经元变性过程中的作用,为NPC的临床治疗提供可能的药物作用靶点。方法将针对cdk5基因的si RNA序列克隆入rAAV-2载体,对4周龄npc-/-小鼠进行小脑rAAV-cdk5-si RNA-GFP注射(n=8),以空载体病毒(rAAV-GFP)注射组及非手术的同龄npc小鼠为对照(n=8)。在干预后4周连续观察小鼠脑内cdk5水平及小鼠神经生化和病理的改变。结果注射后1周可见针道附近、小脑深部核团及浦肯野细胞出现绿色荧光蛋白表达。与空载体病毒组相比,注射4周后小鼠脑内cdk5的表达水平降低34.17%(P<0.05,n=6);轴突球状体数量减少30.76%(P<0.05,n=6),存活浦肯野细胞数增加300%(P<0.05,n=8);细胞骨架蛋白磷酸化程度降低16.32%(P<0.05,n=6)。结论rAAV2-cdk5-si RNA小脑注射,能显著减轻npc小鼠神经生化和病理改变。cdk5的激活在NPC神经元变性过程中起到了关键性的作用,有可能成为NPC治疗的新靶标。; 李俐娟张旻王雪贞郝又国魏佳军降风丁志刚张苏明卜碧涛; 关键词：C型尼曼-皮克病神经元变性小分子干扰RNA

新型隐球菌脑膜炎18例临床治疗分析及文献复习被引量：7: 2006年; 目的探讨新型隐球菌脑膜炎(CNM)的治疗及转归。方法对18例CNM患者的临床资料进行回顾性分析并文献复习。结果18例患者均经病原学确诊。单用氟康唑治疗6例,随访观察治愈、好转者3例,死亡3例;两性霉素B(Am B)和氟康唑(FCZ)序贯治疗12例,随访观察治愈、好转者10例,死亡2例。结论联合用药抗真菌效果较好,脑室引流能较快缓解症状、改善预后。; 汪春娟姜亚平丁志刚彭圣威; 关键词：新型隐球菌脑膜炎治疗学

新型隐球菌脑膜炎的诊断探讨及文献复习被引量：7: 2006年; 目的:探讨新型隐球菌脑膜炎(CNM)的临床特点及诊断方法。方法:对18例CNM患者的临床资料进行回顾性分析并文献复习。结果:18例患者均经病原学确诊。大部分CNM患者为亚急性起病,临床表现无特异性,误诊率高,首诊误诊率为72％,其中误诊为结核性脑膜炎的占69％。结论:脑脊液中找到新型隐球菌是诊断该病的重要依据,多种快速检测手段结合可提高早期诊断率。; 汪春娟姜亚平丁志刚彭圣威; 关键词：新型隐球菌脑膜炎

甲状旁腺功能亢进性肌病(附1例报道及文献复习)被引量：6: 2006年; 彭圣威姜亚平宋林丁志刚汪春娟; 关键词：甲状旁腺功能亢进文献复习近端肌无力肌病无感觉障碍双膝关节

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丁志刚