何鑫
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶的表达、复性及鉴定
- 2014年
- 目的通过原核表达细粒棘球蚴(中国大陆株)线粒体苹果酸脱氢酶(EgmMDH),获取高纯度的可溶性的重组细粒棘球蚴线粒体苹果酸脱氢酶(rEgmMDH)。方法从细粒棘球蚴(中国大陆株)中获得基因mdh并克隆到原核表达载体pET28a;通过IPTG诱导表达线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH),进而采用亲和层析的方法纯化该包涵体目的蛋白并复性,获得可溶性目的蛋白rEgmMDH;利用细粒棘球蚴(中国大陆株)攻击感染家兔后获得血清;分别采用抗原头蚴兔血清和抗His-Tag鼠单克隆抗体对可溶性rEgmMDH进行Western blot鉴定。结果①成功构建原核表达载体pET28a-mMDH/BL21;②通过亲和层析及复性,获得高纯度可溶性目的蛋白rEgmMDH;③Western blot结果表明,抗原头蚴兔血清和抗His-Tag鼠单克隆抗体可分别特异性鉴定该复性可溶性rEgmMDH。结论通过本研究获得高纯度可溶性rEgmMDH,为进一步研究其在细粒棘球蚴感染宿主过程中的作用奠定基础。
- 王玉姣王浩赵嘉庆何鑫王程铖王强赵巍
- 关键词：细粒棘球蚴蛋白纯化WESTERN
- 小鼠细粒棘球蚴感染慢性期小肠IEL中γδT细胞的变化
- 2015年
- 目的观察细粒棘球蚴慢性感染小鼠小肠上皮细胞内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocyte,IEL)中γδT细胞的变化。方法收集包虫患者手术摘除的包囊,BALB/c小鼠分为对照组与感染组,对照组小鼠腹腔注射PBS,感染组每只小鼠腹腔注射2000个活原头蚴,建立细粒棘球蚴继发感染BALB/c小鼠模型。饲养8个月后,检测建立的模型;处死小鼠,Percoll比重离心法提取小肠中IEL,流式细胞仪分别检测IEL与γδT细胞数量,统计分析感染组与对照组之间的γδT细胞、IEL数量的变化。结果经检测表明,细粒棘球蚴继发感染BALB/c小鼠模型建立成功;感染组IEL细胞数量较对照组明显减少(P<0.05);小肠IEL中γδT细胞亦显著减少(P<0.05)。结论在细粒棘球蚴慢性感染中小肠γδT细胞数量下降。
- 何鑫黎明张晓霞王浩赵嘉庆
- 关键词：ΓΔT细胞小鼠细粒棘球蚴
