刘启富
- 作品数:28 被引量:88H指数:6
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- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 从重组痘苗病毒获得JEV蛋白的分析被引量:2
- 1995年
- 本文报告应用免疫过氧化物酶技术(Immunoperoxidaseassay,IPA)、微斑免疫过氧化物酶技术(Microplaqueimmunoperoxidaseassay,MPIPA)和免疫印迹试验(Immunoblotassay,IBA)对我室构建的3株含有日本脑炎病毒(JapaneseencephalitisVirus,JEV)基因的重组痘苗病毒进行了分析,结果表明,3株重组病毒均可在乳地鼠肾细胞(BHK-21-15clonecell)上表达JEV蛋白。(1)在感染的细胞浆、细胞膜和微孔板培养的单层细胞上显示特异的免疫酶斑。(2)可于感染6h后的单层细胞上检出JEV蛋白。(3)用免疫印迹分析观察到3~4条区带(19KD、37KD、51KD和56KD)。
- 刘启富蹇锐胡晓梅娄元梅朱德钟
- 关键词:重组痘苗病毒蛋白日本脑炎病毒
- 中晚期肝癌导向化疗的初步分析
- 1990年
- 本院自1987年5月起对20例不能切除的中晚期肝癌试用了导向化疗,经肝固有动脉或经胃网膜右动脉插管注入碘油阿霉素混合液。3~4周重复注药。3例在注药后再注入明胶海棉碎块栓塞。结果,甲胎6例转阴,7例肿瘤明显缩小,6例缩小超过50%。半年生存者16/20(80%),一年生存者5/20(25%)。1例再次手术切除肿瘤,生存19个月。另2例至今已分别存活30个月及22个月。且B超已未发现块影。我们认为:1,导向化疗应看作是为再次切除肿瘤作准备的措施。2.应选择适当病例:肿瘤局限于半肝,无广泛播散转移,门脉主干内无癌栓者,肝硬变不严重者。3.药物用量要根据肿瘤大小,可重复用药。
- 方开先王济明罗亿治刘启富马永臣马绍华
- 关键词:肝肿瘤药物疗法导向疗法中晚期
- 旁路活化补体降低宿主抗感染条件与机制的实验研究被引量:5
- 1999年
- 目的为证明旁路活化补体降低吞噬细胞功能,了解宿主抗感染能力下降的条件与机制。方法分离人中性粒细胞(PMN)和大鼠枯否细胞(KC);PMN和KC培养单层加上酵母多糖活化人血清(ZAHS);观测吞噬细胞胞内杀菌力(ICBA)、超氧阴离子(O-2)、酸性磷酸酶(ACP)指标动态水平;以抗人C3C5血清(AHC3C5S)中和阻断ZAHS进行反证。结果007~009mlZAHS处理组,KC胞内O-2水平在3小时前高于对照组值,然后逐渐下降。003~005mlZAHS6小时略有下降。ICBA其动态变化与O-2的相似,但003~005ml4小时后略有下降。ACP水平只降无升,随ZAHS用量增加,下降幅度越低,以上各指标至6小时降至最低。011mlZAHS处理组4小时后约85%~90%KC破裂脱落。ZAHS作用PMN的指标动态基本类似KC的动态,只是PMN指标在2小时之前升高,然后逐渐下降,以005~009mlZAHS对PMN指标影响最大。阻断组O-2、ACP、ICBA在6小时测定值显著高于ZAHS处理组,但仍低于正常对照。结论ZAHS使吞噬细胞功能下降与C3C5碎片作用有关,在大中剂量作用时间较长的条件?
- 汪正清熊杰周善章刘启富
- 关键词:补体枯否细胞抗感染创伤
- 用16S rRNA探针定量测定普氏立克次体在细胞内的繁殖量被引量:1
- 1999年
- 目的以普氏立克次体为研究对象,建立一种定量测定胞内微生物繁殖的方法。方法从立克次体感染细胞提取总RNA为样品或用硫氰酸胍裂解感染细胞,以裂解物为样品,用32P标记的16SrRNA特异探针做RNA酶保护分析。根据探针分子结合数,计算出检测到的靶序列分子数,反映胞内微生物的繁殖量。结果从0.5μl直接裂解物可检测到3.94×104个16SrRNA分子;从6pg的总RNA中可检测到5.82×104个16SrRNA分子。用本法试测立克次体在宿主细胞内的生长曲线,只表现出迟缓期及对数生长期,而无稳定期及衰退期。结论用特异性探针通过RNA酶保护分析法可以定量测定胞内微生物在宿主细胞内的繁殖量。
- 胡福泉金晓琳刘启富俞树荣
- 关键词:普氏立克次体核糖核酸酶类RNA探针
- 乙型脑炎重组痘苗病毒J_3免疫性的研究被引量:6
- 1997年
- 用含有日本脑炎病毒(JEV)结构蛋白PrM、E和非结构蛋白NS1、NS2A基因的重组痘苗病毒J3免疫家兔,能较快地诱生抗JEV抗体,其滴度可随免疫次数的增加和免疫时间的延长而增高。此抗血清可被动保护不同毒株JEV的致死性攻击,该保护作用与其中抗体和血凝抑制抗体有关。
- 刘启富娄元梅朱德钟蹇锐
- 关键词:乙型脑炎免疫原性
- 微斑免疫酶技术在检测肾综合征出血热病毒及其特异抗体中的应用被引量:2
- 1990年
- 本文报道一种简便且快速的方法—微斑免疫酶技术(MPIPA),检测Vero-E6细胞培养的肾综合征出血热(HFRS)病毒及其特异抗体,并与免疫荧光技术(IFA),酶联免疫吸附技术(ELISA)进行比较。结果,本法用于检测HFRS患者血清IgG抗体和抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb),其敏感性介于ELISA和IFA之间;用于检测Vero—E6细胞培养的病毒,阳性结果比IFA和细胞病变(CPE)出现早。MPIPA具有简单,快速、敏感性高、特异性好,结果易判定诸优点,便于基层医疗单位推广应用,适合于临床HFRS血清标本的检测和血清流行病学调查。
- 刘启富朱德钟王宁罗蓉
- 关键词:肾综合征出血热病毒抗体
- 旁路活化补体对枯否细胞吞噬杀菌功能影响的实验研究被引量:1
- 1999年
- 目的:证明一定条件下,旁路活化补体可使KC吞噬杀菌功能失常。方法:观测定量培养的KC在ZAHS作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平;观察大鼠肠系膜注射ZAHS后肝组织的病理改变;以抗人C3、C5血清中和的ZAHS进行反证。结果:①ZAHS处理组,KC的PI和ICBA以及胞内O-2水平先升后降,胞内ACP水平只降无升;ICBA与O-2和ACP的水平均显著相关;各指标至6h降至最低;②阻断组O-2、ACP、ICBA在6h水平保持在正常对照组的97%、83%和79%,显著高于ZAHS处理组;③肠系膜静脉注射ZAHS12h后,大鼠肝组织轻度变性,部分KC线粒体受损,与KC相邻肝细胞出现凋亡改变,阻断组肝组织无明显病变。结论:ZAHS中过量的C3、C5碎片持续作用能使KC吞噬杀菌功能下降,对肝组织结构亦有一定间接破坏作用。
- 熊杰汪正清周善章刘启富
- 关键词:补体枯否细胞
- LVA钙通道的克隆鉴定及一级结构特征
- 2001年
- 目的从大鼠胰腺β细胞中,克隆LVA钙通道(即T-型钙通道)基因,并鉴定其一级结构的特征。方法用RT-PCR,3’-RACE及5’-RACE法,从总RNA中克隆T-型钙通道全长基因;用DNA序列测定与DNA步移实验,分析基因一级结构及外显子剪接。结果克隆了T-型钙通道的全长结构基因,命名为α1G-INS。该基因由6864个碱基组成,编码2288个氨基酸,与从神经组织中克隆的钙通道α1G相比较:在氨基酸水平上有96.3%的同源性,在4个结构域的跨膜区内的氨基酸及Ⅰ、Ⅱ结构域间的胞内环链部分的氨基酸具有高度保守性;两者间具有3个明显不同的结构区段,基因组DNA步移法分析表明,这种差异是由于mRNA前体的不同剪接所致。此外,尚有10个氨基酸替代散在于分子内其它区域,这种替代是由于基因突变造成的。结论成功地从大鼠胰腺β细胞中,克隆到LVA钙通道基因中的1个新亚型(isoform)α1G-INS,对深入研究钙离子所涉及的许多重要的基本生命过程有着重要的意义。
- 胡福泉金晓琳饶贤才张克斌胡晓梅刘启富庄合安Arin Bhattachajee张敏李明
- 关键词:克隆外显子
- 流行性出血热(EHF)病毒间接ELISA抗原制备的研究被引量:1
- 1989年
- 本文报告用硫酸鱼精蛋白结合高浓度盐溶液方法从感染鼠脑组织中提取用于EHF间接ELISA的病毒抗原,对抗原提取条件进行了研究,并成功地将提取的病毒抗原用于检测HFRS病人血清特异性IgG抗体的间接ELISA。
- 张义军朱德钟刘启富
- 关键词:流行性出血热ELISA
- 全文增补中
- 一对检测肺炎衣原体的新引物被引量:1
- 2001年
- 为建立一种更敏感的肺炎衣原体PCR检测方法 ,根据肺炎衣原体种特异性 5 3kDa蛋白基因序列设计一对引物5 3A、5 3B ,用PCR进行肺炎衣原体的检测研究。结果该引物仅能扩增肺炎衣原体DNA ,而与沙眼衣原体 ,鹦鹉热衣原体不反应 ,且对呼吸道常见病原菌之DNA的扩增亦为阴性 ,它能扩增出少至 10fg的肺炎衣原体DNA ,比我们以前合成的一对肺炎衣原体 16srRNA基因检测引物Cpnl、Cpn2更敏感 ,分别用这两对引物检测 30例有呼吸道疾患病人的鼻咽拭子标本 ,PCR的阳性符合率为 86 7%。表明 5 3A、5 3B是一对有效、实用。
- 饶贤才俞树荣胡福泉张光明胡晓梅张克斌金晓琳刘启富
- 关键词:肺炎衣原体PCR引物