刘慧萍
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
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- 大肠杆菌硫氧还蛋白基因的克隆及序列测定被引量：3
- 1997年
- 获取大肠杆菌硫氧还蛋白基因（trxA），并进行序列测定，为今后研究其机理及应用创造条件．方法：用PCR法从大肠杆菌DNA中扩增trxA基因编码区，重组入pUC19质粒载体，用双脱氧法测定目的基因序列．结果：从大肠杆菌中成功地扩增到trxA基因，测出的序列与已知基因序列一致．结论：构建了trxA基因的重组克隆，为以后的深入研究奠定了基础．
- 刘慧萍柴玉波赵忠良陈苏民陈南春
- 关键词：大肠杆菌基因扩增硫氧还蛋白
- 含翻译增强子的表达载体pSC34的构建及初步应用
- 1998年
- １９８８年Ｏｌｉｎｓ［１］发现Ｔ７噬菌体基因１０的先导序列（Ｔ７ｇ１０Ｌ）具有明显的促进基因翻译的作用．本文构建了含Ｔ７ｇ１０Ｌ的表达载体ｐＳＣ３４，并尝试表达了几个不同类型的基因．１材料与方法１．１菌株大肠杆菌菌株ＴＡＰ１０６为本室储存．ＴＡＰ１０...
- 柴玉波刘慧萍赵忠良陈苏民陈南春高辉刘新平
- 血小板生成素基因功能区段的体外扩增与序列测定
- 1997年
- 目的：获取具有功能的血小板生成素基因区段．方法：以正常肝组织ｍＲＮＡ为模板，聚合酶链反应扩增所需目的ｃＤＮＡ，克隆入ｐＵＣ１９中，双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列．结果：ＰＣＲ扩增得约４８０ｂｐ片段，经测序证实为血小板生成素功能区段基因．结论：已得到所需血小板生成素功能区段基因．
- 柴玉波赵忠良刘慧萍陈苏民
- 关键词：血小板生成素克隆聚合酶链反应基因功能
- 含原核翻译增强子T7g10L的表达载体pSC34的构建及其初步应用
- 1997年
- 利用大肠杆菌表达系统进行基因表达,获取自然界含量极微的蛋白质,是目前基因工程中较常用的一种方法。1988年Olins在研究T7噬菌体时,发现该噬菌体基因10的先导序列(T7g10L)具有明显的促进基因翻译的作用,并称之为“原核翻译增强子”。本室在构建新型表达载体时,亦将其引入。
- 柴玉波刘慧萍赵忠良陈苏民陈南春高辉刘新平
- 关键词：基因表达表达质粒大肠杆菌表达系统干扰素基因蛋白质二硫键异构酶
- 血小板生成素功能区段基因的克隆与表达
- 1997年
- 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是由巨核细胞产生的一种细胞因子,早期认为它在血小板生成晚期发挥作用。1994年TPOcDNA克隆成功,从而使得对血小板生成素的研究更加深入。TPO cDNA全长1774 bp,其中编码区为1059 bp,编码353个氨基酸,从其结构上看,它可以分为N端区和C端区两部分,其N端区与EPO同源性较高,称为EPO样结构区(EPO-like domain),而且仅此结构区即具有完整TPO分子的功能。
- 柴玉波赵忠良刘慧萍陈苏民
- 关键词：血小板生成素巨核细胞目的基因结构区血小板减少症
- 辅助折叠分子与目的基因的共表达
- 1997年
- 原核表达系统是基因工程中常用的工具之一,但在表达真核生物蛋白时仍具有许多局限性,如产物常常形成不溶性的包含体,使复性变得十分棘手。构建原核共表达系统。
- 刘慧萍柴玉波赵忠良陈苏民陈南春高辉刘新平
- 关键词：目的基因分子伴侣共表达基因工程抗体蛋白质二硫键异构酶
- 重组人蛋白质二硫键异构酶活性片段的克隆与表达纯化策略
- 1997年
- 蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide somerase,PDI)在体内或体外均可以非特异地催化其它蛋白质的二硫键的形成、还原和异构化,进而辅助蛋白的折叠和复性。近来发现PDI还具有非ATP依赖的分子伴侣的功能。鉴于PDI具有的重要功能,拟利用PDI来辅助基因工程产品的复性,如包含体蛋白(尤其是含有二硫键的蛋白),这将为基因工程产品的下游纯化复性,开拓新的思路。PDI含有两个硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)同源区a区和a′区,各含有一个CGHC活性位点,与TRX的CGPC位点同源。
- 刘慧萍柴玉波赵忠良陈南春刘新平陈苏民
- 关键词：蛋白质二硫键异构酶活性片段分子伴侣硫氧还蛋白THIOREDOXIN
- 蛋白质二硫键异构酶结构域的克隆与活性研究
- 本文用基因重组的方法得到了hPDI C端两个结构域的a’c蛋白片段。与bPDI全长相比,仅具有一个活性结构域和一个多肽结合区域的a’c,保留了约1/3的天然酶活力。a’c在硫氰酸酶的热变性中表现为分子伴侣和反分子伴侣的双...
- 刘慧萍柴玉波陈苏民王志珍
- 关键词：基因重组分子伴侣
- 文献传递
- 肥胖基因及其受体被引量：1
- 1998年
- 肥胖与Ⅱ型糖尿病、高血压、高脂血症等关系十分密切,近年来相继发现了肥胖基因(ob)及其受体(OB-R)。小鼠由于肥胖基因突变,导致肥胖表型的出现;而人体中肥胖基因的表达与肥胖呈正相关。小鼠中OB-R存在多种剪接形式,其中短胞内区形式的受体认为与肥胖有关,人体中有关受体的研究还很少。
- 柴玉波刘慧萍陈苏民
- 关键词：肥胖基因受体LEPTIN肥胖
- 人蛋白质二硫键异构酶活性片段基因的克隆及序列测定
- 1998年
- 目的:获取人蛋白质二硫键异构酶活性片段(hPDIf)基因,并进行序列测定,为今后研究其机理及应用创造条件.方法:从人胎肝组织中用反转录PCR方法扩增hPDTf活性片段基因,重组入pUC19质粒载体,用双脱氧法双向测定目的基因序列.结果:从人胎肝组织中成功地扩增到hPDIf基因,测出的序列与已知基因序列一致.结论:构建了hPDIf基因的重组克隆,为以后的深入研究奠定了基础.
- 刘慧萍柴玉波赵忠良陈苏民陈南春刘新平
- 关键词：蛋白质构象氧化还原酶类基因扩增
