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芦荟有效成分的提取及鉴定: 本文采用醇浸法和超声波法结合提取库拉索芦荟中的多糖和甙类物质.通过影响因子的正交实验确定醇浸法提取的最佳条件为:提取温度70℃,浸提时间3h,pH6,乙醇倍数为9倍.用苯酚-硫酸改进法进行芦荟多糖的鉴定并计算多糖的含量....; 钟俐刘菲支殷; 关键词：生物工程芦荟多糖分光光度法; 文献传递

拟南芥氮代谢相关基因T-DNA插入突变体低氮响应的初步研究被引量：2: 2009年; 氮代谢相关基因家族的拟南芥T-DNA插入突变体幼苗期对低氮环境有不同的响应。叶绿素含量,干物重,全氮含量测定结果表明:有2个氨转运蛋白基因(ammonium transport gene mutant,AMTm)和8个硝酸还原酶基因(nitrate reduc-tases gene mutant,NRm)的T-DNA突变体与野生型对照相比对外界低氮环境的适应能力存在显著差异。; 刘菲林熊尹辉张富春; 关键词：拟南芥

质粒纳米乳剂的制备与阴离子交换色谱测定方法被引量：1: 2007年; 以纳米乳剂为载体包裹草原兔尾鼠卵透明带3DNA疫苗,制备获得了纳米乳剂DNA疫苗,并对其进行了质量评价。采用界面乳化法制备质粒纳米乳剂,用电子显微镜测定了其粒径及其分布,根据质粒的带电特性,利用强阴离子Q SepharoseTMXL色谱柱分离纳米乳剂和游离质粒,建立了强阴离子交换柱质粒纳米乳剂包封率的快速测定方法。结果表明:制备的纳米乳剂DNA疫苗的平均粒径为(23±10)nm,包封率为80.5%。选择0.05mol/L的Tris-HCl为平衡液,流速为0.7mL/min,紫外检测波长260nm,柱温30℃,进样量为2mL的实验条件,质粒的含量和峰面积的线性关系良好(r=0.9983),加样回收率在95%以上,该方法简便快速、灵敏度高,重复性好,可用于纳米乳剂DNA疫苗包封率的快速测定。; 张爱莲吴道澄刘菲张富春; 关键词：阴离子交换色谱纳米乳剂包封率

草原兔尾鼠卵透明带3蛋白的免疫原性及其抗血清对体外精卵结合的影响: 2008年; 目的:大肠杆菌表达的重组草原兔尾鼠透明带3(Recombinant Luguruszone pellucida3,r-LZP3)蛋白的免疫原性直接影响抗体的滴度,通过对r-LZP3免疫原性的分析,获得特异性的抗血清,并探讨r-LZP3和抗血清对体外精卵结合的影响。方法:在大肠杆菌中以包涵体形式表达r-LZP3,经过变性、复性及纯化后作为抗原,用LZP3DNA疫苗初免小鼠后,再用r-LZP3进行免疫加强,产生特异性的LZP3抗血清;通过EL1SA测定抗体应答的水平;蛋白印迹、间接免疫荧光和免疫组化方法检测抗血清同r-LZP3、鼠卵母细胞表面天然ZP的反应性;精卵结合实验观察r-LZP3、抗血清体外对鼠精卵结合能力的影响。结果:用LZP3DNA疫苗免疫制备的抗血清在免疫鼠中产生了较高的抗体滴度,并且可以识别大肠杆菌表达的r-LZP3以及鼠卵细胞表面天然的ZP,抗血清和r-LZP3也都能在体外抑制鼠的精卵结合。结论:大肠杆菌表达的r-LZP3有较好的免疫原性,r-LZP3和抗血清能够在体外阻止鼠的精卵结合。; 张爱莲庄淑珍刘菲张富春; 关键词：草原兔尾鼠卵透明带3 免疫原性抗血清卵母细胞精卵结合

草原兔尾鼠和昆明白小鼠卵透明带3 DNA疫苗免疫不育效果的研究被引量：3: 2007年; 为探讨不同种类小鼠卵透明带3(zp_3)的免疫不育效果,并筛选高效且具有物种特异性的DNA抗生育疫苗,本研究选择草原兔尾鼠卵透明带3(Lzp_3)和昆明白小鼠卵透明带3(Mzp_3)构建不同的DNA抗生育疫苗表达载体,pcDNA3-mzp_3(pcD-M)、pcDNA3-lzp_3(pcD-L)、pcDNA3-aat- comp-mzp_3(pcD-ACM)和pcDNA3-aat-comp-lzp_3(pcD-ACL)分别免疫NIH小白鼠。研究中用水动力转染技术取代传统的Hela细胞真核转染检测小鼠体内真核表达情况,结果表明四种质粒均能在小鼠肝脏中进行表达:ELISA图示表明重组质粒均能使小鼠激发较高水平的特异性抗体;抗生育结果表明四种DNA疫苗均具有免疫不育的效果(P<0.05),其中pcDNA3-aat-comp-mzp_3(pcD-ACM)的免疫效果最好(P<0.01);卵巢病理切片H.E染色结果显示pcD-M和pcD-L组卵巢结构与对照小鼠区别不大,而pcD-ACL和pcD-ACM组卵巢结构发生病理性变化。结果初步说明草原兔尾鼠和昆明白小鼠卵透明带3对NIH小白鼠均有抗生育效果,但不具有物种特异性。; 张钰李轶杰刘菲陈蓉郭继华张富春; 关键词：草原兔尾鼠昆明白小鼠卵透明带3 免疫不育物种特异性

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刘菲