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吴霞: 作品数：56 被引量：157H指数：8; 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>; 相关领域：医药卫生化学工程更多>>

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格列美脲对大鼠下颌骨成骨细胞增殖分化及矿化的影响被引量：1: 2012年; 目的:研究格列美脲对大鼠下颌骨成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。方法:原代培养分离下颌骨成骨细胞,将细胞接种于96孔板中,分两组:5.5mM葡萄糖(5.5mMG)(生理浓度葡萄糖)组,5.5mMG+10μmol/L格列美脲组,继续培养7d,1)MTT法检测大鼠下颌骨成骨细胞的增殖;2)生化法测定7d碱性磷酸酶(ALP)活性;3)Western blots检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达;4)RT-PCR检测骨钙素(OCN)的表达。结果:格列美脲能显著促进成骨细胞的增殖,ALP活性,ColⅠ的蛋白和OCN的mRNA的表达。结论:格列美脲能促进大鼠下颌骨成骨细胞增殖、分化及矿化。; 马攀刘洪臣马军利顾斌鄂玲玲吴霞; 关键词：格列美脲成骨细胞增殖分化

米诺环素对体外培养的成年大鼠牙槽骨成骨细胞生物活性的影响被引量：8: 2007年; 目的:研究不同浓度的米诺环素对体外培养的成年大鼠牙槽骨成骨细胞(mature rat alveolarosteoblast,MRAOBs)增殖、蛋白合成及碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP)的影响。方法:将不同浓度的米诺环素(1、5、10、20、40、100、200mg/L)加入体外培养的第4代MRAOBs中,孵育2d和4d后,倒置显微镜下观察其对细胞形态的影响,并于2d后检测其对细胞的增殖活性及蛋白合成的影响,4d后检测其对细胞的碱性磷酸酶活性的影响。结果:在1-200mg/L的浓度范围内,米诺环素对细胞形态无影响,可显著促进MRAOB的增殖和蛋白合成(P<0.01),1-100mg/L浓度范围内随着浓度的增加,促进细胞增殖和蛋白合成的作用显著增强,至100mg/L时达最大促进效应。1-200mg/L的米诺环素能显著抑制MRAOBs的ALP活性,随浓度的增加抑制作用逐渐增强。结论:一定浓度的米诺环素有促进成骨细胞的增殖、蛋白合成和抑制成骨细胞分化的作用。; 张文怡刘洪臣吴霞鄂玲玲吕燕; 关键词：米诺环素牙槽骨成骨细胞细胞培养

人牙周膜成纤维细胞对甲硝唑替硝唑的跨膜转运被引量：24: 2007年; 目的:研究人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLF)对甲硝唑和替硝唑的转运,为根管全身给药提供实验依据。方法:正畸拔除的前磨牙,组织块法作HPDLF原代培养。甲硝唑和替硝唑孵育HPDLF和MC3T3-E1细胞一定时间后,超声破碎细胞,高效液相色谱法测定胞内药物含量,考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。结果:(1)高效液相色谱法可以精确测量细胞内甲硝唑和替硝唑含量;(2)检测不到HPDLF胞内的甲硝唑,但是可以检测到MC3T3-E1细胞内的甲硝唑;(3)两种细胞胞内的替硝唑的含量存在差异,含量与细胞外液的药物浓度以及药物作用时间有关。结论:甲硝唑不存在人牙周膜成纤维细胞的跨细胞膜转运,但是替硝唑存在,转运与胞外药物浓度有关,甲硝唑与替硝唑的跨细胞膜转运存在细胞特异性。这种差异性为指导临床用药、特别是根管全身给药的筛选提供参考。; 刘宇刘洪臣吴霞鄂玲玲王东胜; 关键词：人牙周膜成纤维细胞甲硝唑替硝唑转运高效液相色谱法

犬外周血基质细胞成骨诱导分化后的超微结构观察被引量：2: 2010年; 目的:利用透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)观察成骨诱导培养前后,犬外周血基质细胞(dog peripheral blood stromal cells,dPBSCs)超微结构的变化。方法:采用密度梯度离心法—贴壁筛选法分离培养dPBSCs,并进行成骨诱导培养,14d后进行TEM观察。结果:经成骨诱导培养的dPBSCs光镜观察显示,形态由长梭形变为短梭形成骨细胞样形态,体积增大,细胞排列较杂乱;透射电镜观察显示,细胞体积增大,胞质中含有丰富的细胞器,还有大量的基质小泡、呈同心圆状或板层状的髓样体和空泡状结构,细胞间连接紧密,带有大量微绒毛样突起。结论:dPBSCs是一种具有成骨潜能的细胞,经成骨诱导培养后,其超微结构具有成骨细胞的特点。; 韩雪刘洪臣王东胜吴霞苏方王照五师占平; 关键词：超微结构成骨分化体外培养

奥硝唑在唾液、龈沟液中的分布与血药浓度相关性研究: 蒋一刘洪臣吴霞

可注射壳聚糖温敏水凝胶对犬骨髓基质细胞生物学行为的影响被引量：2: 2011年; 目的:探讨可注射壳聚糖(chitosan,CS)基温敏水凝胶对犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)生物学活性的影响。方法:利用密度梯度离心法获得犬BMSCs,含10%胎牛血清的L-DMEM培养液进行原代培养并进行初步鉴定。合成壳聚糖温敏水凝胶,光镜下观察BMSCs在凝胶中的存活情况。制备凝胶浸提液,检测其对细胞增殖分化的影响。采用SPSS13.0软件包对实验数据进行单因素方差分析。结果:犬BMSCs可在壳聚糖温敏凝胶中存活。壳聚糖浸提液组对BMSCs的增殖与正常培养液组相比,无显著性差异;但在培养第1、4、7天时,矿化培养液组和矿化浸提液组的细胞增殖率明显低于未矿化的完全培养液组和壳聚糖浸提液组,第10天时,4组间无显著性差异。壳聚糖矿化浸提液组碱性磷酸酶和骨钙素活性明显提高。结论:制备的壳聚糖温敏水凝胶具有良好的生物相容性,可进行水凝胶复合BMSCs的体内外实验研究。; 韩雪刘洪臣王东胜苏方鄂玲玲吴霞; 关键词：壳聚糖温敏水凝胶细胞培养骨髓基质细胞

人牙周膜成纤维细胞对甲硝唑摄取机制的研究被引量：4: 2009年; 目的:研究人牙周膜成纤维细胞对甲硝唑的摄取,探讨摄取的机制及为通过牙根管给药途径提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法研究人牙周膜成纤维细胞与甲硝唑孵育后不同时间细胞内药物的浓度,细胞内药物浓度与细胞外药物浓度的关系,以及温度、pH和转运抑制剂丙磺舒和腺嘌呤对细胞摄取甲硝唑的影响。结果:(1)孵育3min后人牙周膜成纤维细胞胞内甲硝唑浓度即可达到细胞外水平,之后胞内甲硝唑浓度出现逐渐降低,并在15min后达到平稳;(2)细胞内甲硝唑浓度随着细胞外甲硝唑浓度的增加而呈线性增加;(3)温度、pH和转运抑制剂对人牙周膜成纤维细胞摄取甲硝唑无明显影响。结论:人牙周膜成纤维细胞可快速摄取甲硝唑;甲硝唑通过简单扩散方式进入细胞内。; 余立强刘洪臣吴霞鄂玲玲王东胜; 关键词：人牙周膜成纤维细胞给药途径甲硝唑高效液相色谱法

大鼠下颌骨来源的成骨细胞对普伐他汀的摄取: 2009年; 目的:应用SD大鼠下颌骨来源的成骨细胞,观察成骨细胞对普伐他汀的摄取,研究其可能的跨膜转运机制。方法:将成年大鼠成骨细胞与溶于PBS的药物共同孵育后,弃去细胞外液,收集细胞悬液,用高效液相色谱法测定细胞内药物量,用考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量,以细胞内药物含量与细胞蛋白的比值作为药物转运量的观察指标。同时考察时间和药物浓度对成骨细胞摄取普伐他汀的影响,以及普伐他汀对成骨细胞OATP1(Organic anion transporting polypeptide1)转运蛋白表达的影响。结果:(1)高效相色谱法可以准确测定普伐他汀的量。(2)成骨细胞可将普伐他汀转运至细胞内。(3)成骨细胞对普伐他汀的摄取随着药物浓度及给药时间的增加呈现饱和趋势。(4)普伐他汀可上调成骨细胞OATP1的表达。结论:成骨细胞有转运普伐他汀的能力,且可能以OATP1转运载体为介导的主动转运。; 马龙刘洪臣吴霞鄂玲玲王东胜; 关键词：普伐他汀人工种植牙高效液相色谱法

Transwell滤膜上人牙周膜及牙龈成纤维细胞细胞层完整性的研究: 2009年; 目的探讨生长在Transwell滤膜上人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts，HPDLF）及牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts，HGF）细胞层完整性，为研究牙周细胞对药物的跨细胞转运提供依据。方法将原代培养的HPDLF及HGF分别接种到Transwell聚酯滤膜上，在1到4周内行跨膜电阻测定，连续以光学显微镜观察细胞的生长及排列情况，2周时对滤膜纵切面行光学显微镜及透射电子显微镜观察，并以渗漏标志物荧光素钠检测模型的渗漏。结果HPDLF及HGF接种1周后细胞基本汇合，到2周时细胞连接紧密且完整，细胞呈复层生长，跨膜电阻分别达（56．14±7．43）及（57．34±7．62）Ω·cm^-2，并持续到第4周；细胞接种2周后细胞药物转运模型经荧光素钠孵育30min检测细胞旁渗漏小于1％。结论HPDLF及HGF在Transwell滤膜上生长2周后细胞排列情况可模拟体内牙周膜和牙龈生理状态，且渗漏标志物的检测及跨膜电阻等结果显示细胞完整，旁渗漏很低，符合药物细胞转运模型的要求，可作为研究牙周细胞跨细胞转运药物的体外模型。; 余立强刘洪臣鄂玲玲吴霞王东胜; 关键词：成纤维细胞投药途径

Beagle犬脂肪基质干细胞的培养及分化研究被引量：5: 2008年; 目的:体外培养Beagle犬脂肪基质干细胞(dog adipose-derived stromal cells,dADSCs),定向诱导分化为脂肪、成骨细胞,为口腔组织工程提供种子细胞。方法:取Beagle犬皮下脂肪组织,剪碎,经I型胶原酶消化培养犬脂肪基质干细胞,取第3代细胞鉴定其来源及干细胞标记并向脂肪、成骨细胞诱导分化。结果:该细胞波形丝蛋白表达阳性,角蛋白表达阴性,CD44表达阳性;成脂诱导后,经油红O染色可见细胞内脂滴的积累;成骨诱导后,ALP、钙结节、骨钙素、I型胶原均阳性表达。结论:Beagle犬脂肪组织中存在着具有能分化为脂肪、成骨细胞的脂肪基质干细胞,此脂肪基质干细胞可作为口腔组织工程种子细胞来源。; 鄂玲玲刘洪臣苏方王东胜马军利吴霞; 关键词：脂肪基质干细胞分化

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