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2-型猪链球菌保护性抗原ESA的细胞定位及B细胞表位预测: 2016年; 通过生物信息学方法预测2-型猪链球菌（Streptococcus suis serotype 2,SS2）保护性抗原ESA（epidermal surface antigen,ESA）在SS 2中的分布和B细胞表位,为研究SS2的多表位疫苗奠定基础。以ESA推定的氨基酸序列为基础,通过生物信息学软件对ESA进行信号肽、跨膜序列等分析,然后分别以Kyte-Doolittle法、Emini法和Jameson-Wolf法分析蛋白的亲水性、表面可能性以及抗原指数;辅以Garnier-Robson法、Chou-Fasman法和Karplus-Schulz法分析蛋白二级结构中柔性区域,进而预测ESA的B细胞表位。结果表明,ESA为跨膜蛋白,B细胞表位位于N-端第30~35、59~64、178~185、245~253区域。多参数或多个软件联合使用能预测SS2保护性抗原ESA的B细胞表位和细胞定位,为实验研究提供帮助,大大缩减实验时间。; 刘丽娜钟乃凤王赟张洁周静; 关键词：ESA 细胞定位 B细胞表位

半夏块茎腐烂病化学防治药剂的筛选被引量：8: 2016年; 目的:筛选出高效药剂防治半夏块茎腐烂病,为半夏栽培提供依据。方法:对15种化学药剂进行了病原菌拮抗试验和盆栽试验。结果:拮抗试验结果表明,42%三氯异氰尿酸、80%乙蒜素、15%噁霉灵·爱诺助剂、72%农用硫酸链霉素和40%多·福对半夏块茎腐烂病病原菌产生强抑菌作用。抑菌最高稀释倍数分别为15 000倍液、5 000倍液、4 000倍液、500倍液和500倍液。盆栽试验表明,72%农用硫酸链霉素稀释500倍液、80%乙蒜素稀释1 000倍液和42%三氯异氰尿酸稀释1 000倍液,防治效果均可达70%以上。结论:从防治效果和价格综合考虑,建议生产上将42%三氯异氰尿酸、80%乙蒜素和72%农用硫酸链霉素交替使用来防治半夏块茎腐烂病。; 李玉权祝学海石建龙任建国周静刘红美; 关键词：半夏块茎腐烂病药剂筛选三氯异氰尿酸乙蒜素

兴义维蚋蚋卵(胚胎)原代培养细胞核型分析: 2016年; 目的：分析兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代培养细胞核型。方法：应用组织块法处理野外采集兴义维蚋蚋卵（胚胎），以改良Shields and Sang M3为基础培养基，pH 6.0-6.5，置于28℃生化恒温培养箱中进行原代细胞培养，选取10个处于有丝分裂增殖时期的细胞，通过秋水仙素处理，制作中期染色体标本，进行核型分析。结果：显微镜下观察，前中期染色体为3对（2n=6），染色体凝集程度未达最大化呈现长杆状，染色体长度为9.43-13.58μm；中期染色体为3对（2n=6），高度凝集呈现短杆状，染色体长度为2.43-4.67μm，两条中期染色体臂比值〈1.67，属中着丝粒染色体，4条染色体臂比值〉1.67，属亚中着丝粒染色体。结论：初步阐析了兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代培养细胞核型特征。; 周静刘占钰徐旭崔立秋陈汉彬杨明; 关键词：蚋科胚胎原代细胞核型分析

大鼠脑皮质少突胶质细胞培养与鉴定被引量：1: 2016年; 目的:改进少突胶质细胞体外培养方法。方法:取新生24 h内SD大鼠大脑皮质组织,采用机械性吸管吹打的方法获取细胞悬液,进行种植培养,恒温摇床结合无血清培养的方法纯化少突胶质细胞,Galc免疫细胞化学法鉴定少突胶质细胞。结果:纯化后的少突胶质细胞,胞体圆形或椭圆形,折光性强,突起少,经Galc免疫细胞化学染色,阳性细胞胞浆和突起呈棕黄色,少突胶质细胞纯度达95%。结论:采用此种方法培养出的少突胶质细胞纯化度高,且方便简易。; 周静谢骐骥余资江孙宝飞戈果; 关键词：细胞培养少突胶质细胞免疫细胞化学

不同方式构建的单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的活性分析被引量：6: 2015年; 为了研究不同方式构建的单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白原核表达后的生物活性差异,并分析其可溶性表达的影响因素,本研究通过基因工程操作构建含有不同类型的单链抗体-碱性磷酸酶融合基因的表达载体,优化原核表达条件并诱导表达,比较分析宿主菌、连接肽、抗体的单体或二聚体等因素对融合蛋白可溶性表达和生物活性的影响。结果显示不同方式构建的单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的活性差异显著,在单链抗体和碱性磷酸酶之间添加连接肽能够获得更高活性的融合蛋白,而单链抗体二聚体与碱性磷酸酶的融合蛋白的活性明显降低。因此,单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的可溶性表达和活性与单链抗体及其构建方式有关,而抗体自身的特性起着关键性作用。; 王赟周静刘丽娜钟乃凤王玉林胡祖权; 关键词：单链抗体碱性磷酸酶原核表达免疫检测

以手术模拟为基础的局部解剖学教学被引量：2: 2015年; 为了引导学生理论联系实际,将局部解剖知识应用于临床,作者所在人体解剖学教研室通过建立以模拟外科手术为基础的局部解剖学实践教学新体系,使学生在掌握解剖学知识的同时加强外科基本操作技能,促进了基础知识向临床应用的快速转化。; 周静谢骐骥程昊李强明余资江戈果; 关键词：教学方法

新生大鼠嗅鞘细胞的体外培养及鉴定: 探讨新生大鼠嗅鞘细胞的原代培养及纯化方法。取新生3～5 d的Wistar大鼠,在无菌环境下摘除嗅球,置于少量ACSE中(4℃),于解剖显微镜下剥离其神经层、嗅神经及脑膜,用ACSF洗2次,将组织块剪碎;0.25%胰酶(添...; 余资江余彦杨丹决利利周静

金黄色葡萄球菌疫苗候选抗原SirH和StbA及其抗血清的免疫保护作用研究被引量：1: 2016年; 为研究金黄色葡萄球菌疫苗候选抗原SirH和StbA及其抗血清的免疫保护作用,分别用纯化蛋白StbA、SirH以及甲醛灭活的金黄色葡萄球菌为免疫原免疫小鼠,收集抗血清,测定血清效价,然后用致死剂量的金黄色葡萄球菌攻击,评价两种抗原的免疫保护作用。分别用SirH和StbA抗血清免疫小鼠,4 h后用致死剂量的金黄色葡萄球菌攻击,评价抗血清的保护作用。结果显示,StbA和SirH抗血清效价均为1：1 638 400。金黄色葡萄球菌攻击主动免疫小鼠,SirH纯化蛋白免疫组（60%）和StbA纯化蛋白免疫组（70%）存活率均明显高于对照组（0%）（P〈0.05）,金黄色葡萄球菌全菌免疫组（20%）存活率与对照组（0%）差异不具备显著统计学意义（P〉0.05）。SirH纯化蛋白免疫组（60%）和StbA纯化蛋白免疫组（70%）存活率均高于金黄色葡萄球菌全菌免疫组（20%）。将抗血清免疫小鼠后,用金黄色葡萄球菌腹腔内注射攻击小鼠,免疫组小鼠16-18 h内全部死亡,而对照组小鼠在攻毒后12-14 h内全部死亡。结果表明,SirH和StbA是具有潜力的保护性抗原,但其抗血清都不具有保护作用。; 刘丽娜钟乃凤王赟周静张洁; 关键词：金黄色葡萄球菌疫苗抗原抗血清免疫保护

金黄色葡萄球菌基因组表达文库的构建及免疫学初步筛选: 2016年; 为从基因组水平筛选金黄色葡萄球菌疫苗抗原，建立金黄色葡萄球菌基因组表达文库，用患者恢复期血清对表达文库进行血清学筛选，并对获得的阳性克隆进行序列测定及同源性分析。结果显示，构建的金黄色葡萄球菌基因组表达文库共有5x10。个克隆，片段插入正确率为91．67％。对文库进行初步筛选，共获得6个阳性克隆，经测序鉴定和同源性分析发现6个克隆涉及金黄色葡萄球菌基因组6个开放阅读框（ORF）。结果表明，本研究建立的疫苗抗原筛选方法可用于金黄色葡萄球菌疫苗抗原的系统筛选。; 刘丽娜张洁周静钟乃凤胡祖权王赟; 关键词：金黄色葡萄球菌免疫学筛选疫苗抗原

MsrB1对ONOO^-诱导的人晶状体上皮细胞周期的影响: 2015年; 目的探讨蛋氨酸亚砜还原酶B1(methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)基因沉默对过氧亚硝酸根(ONOO-)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)细胞周期的影响和ERK信号通路在其中的调节作用。方法将培养的HLEC分为两组:正常组和MsrB1基因沉默组,分别用0μmol·L-1、100μmol·L-1、200μmol·L-1和300μmol·L-1 ONOO-处理20 min后,继续培养12 h。用RT-PCR法检测MsrB1基因表达水平变化,流式细胞仪检测细胞周期水平变化,Western blot法检测MsrB1基因沉默和ONOO-对pERK表达水平的影响。结果 300μmol·L-1 ONOO-处理HLEC会导致MsrB1表达水平显著下降(P<0.01),当MsrB1基因沉默细胞经300μmol·L-1ONOO-处理后,MsrB1表达水平进一步显著下调(P<0.05)。经200μmol·L-1或300μmol·L-1 ONOO-处理,HLEC细胞周期分别阻滞在G2/M期和S期,当MsrB1基因沉默细胞经200μmol·L-1或300μmol·L-1 ONOO-处理后,更多的细胞阻滞在G2/M期或S期(P<0.05)。pERK检测结果表明,MsrB1基因沉默前后经ONOO-处理导致的细胞周期阻滞和pERK表达水平显著下降有关(P<0.01)。结论 ONOO-可以下调HLEC MsrB1表达水平,MsrB1基因沉默细胞经ONOO-处理,pERK表达水平显著下降,导致更多细胞阻滞在G2/M期和S期。; 贾义钟乃凤周静; 关键词：人晶状体上皮细胞细胞周期细胞外信号调节激酶

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周静

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