孙颖
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
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- 人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型重组慢病毒载体的构建及其在人雄激素抵抗型前列腺癌PC3细胞中的表达
- 2020年
- 目的构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达。方法以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pGC-FU-INPP4B,将其与辅助包装原件PHelper 1.0和PHelper 2.0载体经Lipofectamine TM 2000介导共转染293T细胞,包装获得携带人INPP4B基因的重组慢病毒LentiINPP4B,免疫荧光法测定病毒滴度。用Lenti-INPP4B感染PC3细胞(Lenti-INPP4B组),以慢病毒Lenti-GFP(携带GFP基因)感染的PC3细胞为阴性对照,RT-PCR及Western blot检测PC3细胞中INPP4B m RNA水平和蛋白的表达,CCK8法检测PC3细胞增殖;Western blot检测PC3细胞中p-AKT水平。结果经PCR及测序鉴定,重组质粒p GC-FU-INPP4B构建正确;Lenti-INPP4B病毒滴度达2×10-8 TU/mL。与阴性对照组比较,Lenti-INPP4B组PC3细胞中INPP4B m RNA水平显著提高(P<0.05),细胞活力抑制显著(P<0.05),细胞内p-AKT水平降低;INPP4B蛋白在Lenti-INPP4B组细胞中表达,在阴性对照组中未表达。结论成功构建了INPP4B慢病毒表达载体,其在PC3细胞中的表达能显著抑制细胞增殖,可能是通过下调p-AKT水平发挥作用。本文为靶向治疗雄激素抵抗型前列腺癌提供了新思路。
- 丁焕孙颖黎莉
- 关键词:PC3细胞
- 急性心肌梗死误诊8例分析
- 2004年
- 孙颖
- 关键词:急性心肌梗死误诊病例典型症状
- 长程监测剥夺睡眠联合自然睡眠脑电图对癫痫的诊断意义
- 王璐王峰孙颖刘光芝吕传法
- 我们的研究特点主要是要求病人进行剥夺睡眠10-20小时后,先进行常规脑电描记,然后在屏蔽室内进行自然睡眠并连续描记60-90分钟脑电描记,同时禁用水合氯醛、安定类药物。86例患者在初次描高后3-5个月进行重复剥夺睡眠检查...
- 关键词:
- 关键词:癫痫
- 急性重症心肌炎心电图酷似心肌梗死3例
- 2006年
- 孙颖
- 关键词:心肌炎心电图