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卵清蛋白基因表达放射免疫分析法: 1993年; 应用竞争结合原理建立了卵清蛋白基因表达的放射免疫分析法。采用氯胺T法标记卵清蛋白,^(125)Ⅰ-OA比活度达32～43μCi·μg^(-1),冻干后在常温下保存,有效期2～3个月;以(鸡)卵清蛋白作免疫原制备出的抗血清特异性强,与其他生物大分子无交叉反应,亲和常数为3.8×10~9L/M,50％结合率为1:1.6×10~5(最终稀释度);用双抗-PEG作分离剂沉淀免疫复合物,其方法灵敏度为0.17ng,可检范围为0.25～16ng,批内、批间变异系数分别为2.99％和8.96％。该方法能有效地直接检测类卵清蛋白含量,可作为一种特异、灵敏、简便、可靠的分析技术,应用于卵清蛋白基因表达生物基因工程研究。; 朱献玳王公金严建民张德玉; 关键词：卵清蛋白基因表达放射免疫测定

利用近缘种属创造小麦抗白粉病新种质（2）八倍体小簇麦与普通小麦杂交导入抗病基因: 1995年; 应用八倍体小麦－簇毛麦和普通小麦杂交、回交，试图将其抗白粉病基因导入普通小麦。通过细胞学分析和染色体分带分析证明双二倍体小簇麦含有５６条染色体，其染色体组为ＡＡＢＢＤＤＶＶ，其与普通小麦的杂种Ｆ＿１代减数分裂的中期Ｉ二价体数目常少于２１对，单价体数目常多于７个，并出现三价体、四价体和少量五价体。应用生物素标记的簇毛麦总ＤＮＡ探针对小簇麦杂种进行染色体原位杂交，能够清楚检测出簇毛麦的染色体，双二倍体小簇麦含有１４条簇毛麦染色体，９４００９—５—４含有Ｖ＿２，Ｖ＿３和Ｖ＿４３条簇毛麦染色体，９４００９－５－９含有１条簇毛麦的Ｖ＿６染色体。目前已选育了优良抗病品系，经温室和田间人工接种鉴定，表现高抗小产白粉病。; 姚景侠钟少斌张德玉李浩兵; 关键词：小麦白粉病基因导入近缘种属

稻螟染色体C带核型研究被引量：2: 1993年; 应用C带技术分析二化螟Chilo suppressalis(Walker)、三化螟Tryporyza incertulas (Walker)和纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis (Guenée)[Lepi-dotera:Pyralidea]细胞有丝分裂中期核型及染色体C带特征。结果表明:①三种稻螟均由XX/XY型性别决定,K染色体为近中着丝点,Y染色体具端着丝点;②二化螟和三化螟的Y染色体均与X染色体长臂部分同源区配对,纵卷叶螟的Y染色体则与X染色体短臂全长配对;③二化螟核型2n=12:5AA+XX(♀)/XY(♂),5对常染色体(5AA)中,有一对中着丝点染色体,其余为端着丝点;④三化螟核型2n=14:6AA+XX(♀)/XY(♂),常染色体均为端着丝点;⑤纵卷叶螟核型2n=10:4AA+XX(♀)/XY(♂),常染色体具端着丝点。从而初步建立了3种稻螟染色体组C带带型。; 方继朝杜正文张德玉; 关键词：二化螟纵卷叶螟核型染色体C带

小麦抗白粉病基因定位及其分子标记的研究进展被引量：13: 1994年; 本文综述了小麦近缘种属对白粉病的抗性、小麦抗白粉病基因定位、小麦的ＲＦＬＰ分析、ＲＡＰＤ分析和白粉病抗性基因的研究概况，为我国小麦抗病遗传基础理论的研究提供了有价值的参考资料。; 张德玉钟少斌姚景侠; 关键词：小麦白粉病基因定位抗病性

小麦－簇毛麦杂种染色体的DNA原位杂交研究被引量：10: 1994年; 以生物素标记的簇毛麦基因组ＤＮＡ作探针与小麦－簇毛麦杂种双二倍体及异附加系染色体进行原位杂交，旨在探索一种鉴定小麦中簇毛麦染色质的分子细胞遗传学方法。首先试验了标记的簇毛麦ＤＮＡ与小麦ＤＮＡ之含量比对原位杂交效果的影响，发现探针混合液中不加未标记的小麦ＤＮＡ时，获得的原位杂交结果较理想。在八倍体小麦－簇毛麦双二倍体（２ｎ＝５６）中，１４对簇毛麦染色体出现明显的棕褐色原位杂交信号，而小麦染色体不显标记，使这２个物种的染色体很易相互区分开来。进一步用生物素标记的簇毛麦ＤＮＡ与小麦－簇毛麦６Ｖ染色体附加系体细胞杂交，也可检测出其中１对附加的６Ｖ染色体。由于该方法标记的簇毛麦ＤＮＡ覆盖各簇毛麦染色体的整个染色体臂，由此，用其鉴定小片段小麦－簇毛麦染色体易位是有效的。; 钟少斌张德玉李浩兵姚景侠; 关键词：小麦杂交杂种染色体

麦类作物原位杂交影响因素的研究被引量：8: 1995年; 为了更好地利用原位杂交技术进行麦类作物外源染色体的检测和基因定位，对麦类作物原位杂交的影响因素进行了研究。（１）利用缺口转译法对克隆的ＤＮＡ片段进行生物素标记，即节省时间，又可以获得较高的标记效率；对麦类作物的基因组ＤＮＡ，宜采用随机寡核苷酸引物标记法进行生物素标记，适当延长标记时间可以提高标记效率。（２）共变性法比较适宜麦类作物的原位杂交，分别变性法如掌握不当易使染色体产生膨胀现象，变性温度过高也会使黑麦（Ｓｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌ）染色体的轮廓模糊不清。（３）应根据麦类作物亲本之间的亲缘关系决定封阻ＤＮＡ的使用浓度，并利用生物素标记的簇毛麦（Ｈａｙｎａｌｄｉａｖｉｌｌｏｓａ）基因组ＤＮＡ为探针，从普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）－簇毛麦双二倍体的染色体中识别了簇毛麦的染色体。（４）麦类作物的原位杂交受洗脱强度的影响很大，利用甲酰胺进行洗脱可以获得背景清晰的原位杂交带型。随着原位杂交技术分辨率的不断提高。; 张德玉钟少斌李浩兵姚景侠; 关键词：生物素麦类作物外源染色体原位杂交

用原位杂交技术检测小麦异源染色质及定位核糖体DNA被引量：16: 1991年; 本研究以六倍体小黑麦品系“Badger”(Triticale)1B/1R 易位系“宁8026”和1R(1D)代换系“84056-1-36-1”为材料制备染色体样本,以生物素标记的整个黑麦基因组 DNA 和小麦核糖体 DNA(rDNA)作探针进行原位杂交,结果如下:(1)利用整个黑麦基因组 DNA 作探针时,棕色的杂交信号分布于整个黑麦染色体上,使其与 Wrights 染色的小麦染色体明显不同,从而把“Badger”中的黑麦染色体与小麦染色体区分开来,并且确定了“宁 8026”中的1B/1R 易位染色体及易位断裂点。(2)在“Badger”和“84056-1-36-1”中分别检测出6个和8个含核糖体 DNA 的杂交位点,分布在1B、6B、1R 和5D上。(3)用原位杂交发现小麦核糖体 DNA 基因在细胞分裂间期的表达行为。; 钟少斌张德玉周楠蒋建东姚景侠A.RLeitchI.JLeitch; 关键词：小麦黑麦原位杂交核糖体DNA

球茎大麦在大麦育种上的应用研究 Ⅱ.球茎大麦向栽培大麦的种质转移被引量：2: 1999年; 本文介绍栽培大麦（2x）与球茎大麦（4x）种间杂种的产生及其细胞学鉴定结果。二者杂交成胚率平均可达48.43％,胚培成苗率平均可达25.64％。杂种F_1染色体数为21,通过C-带鉴定表明,7条为母本栽培大麦染色体、14条为父本球茎大麦染色体。F_1花粉母细胞中染色体构型:单价体4～7个、三价体l～3个,其余为二价体。杂种植株形态为父本球茎大麦型,冬性强、发育慢、分蘖多。以杂种F_1胚培苗花粉能育单株为父本,以苏啤1号为母本进行回交,得到7个回交一代株系BC_1—1～BC_1—7,将 BC_1F_2种子播种在大麦黄花叶病病圃中进行抗病鉴定,结果 BC_1—2F_2的2个株系和BC_1—5F_2的2个株系高抗黄花叶病。对BC_1—2F_3的同功酶分析和C-带鉴定,表明抗病株系中确有来自球茎大麦的遗传物质,对抗病株系的抗性基因的遗传规律的研究表明,抗性由一对显性基因控制,并与栽培大麦中已知的抗性基因不等位,可能为一种新的基因。; 李浩兵张德玉仲裕泉黄友圣许如根吕超黄志仁; 关键词：栽培大麦球茎大麦种间杂种种质大麦育种

栽培大麦染色体结构变异及其电脑图象自动分析被引量：3: 1997年; 以栽培大麦与球茎大麦种间杂种回交后代的２个抗病姐妹株（ＢＣ１－２、ＢＣ１－５）为材料，以其母本栽培大麦苏啤１号为对照，对它们的Ｃ－带染色体图象进行电脑技术处理：建立母本标准模式图，检测并绘制２个姐妹株的Ｃ－带染色体图象。结果表明，ＢＣ１－２Ｆ３的Ｃ－带带型与其母本基本相同，而ＢＣ１－５Ｆ３中有两对栽培大麦染色体发生了结构变异，其第三、四染色体长臂发生了互换，形成３／４易位。这种易位是栽培大麦染色体组间，而不是异源染色体间的易位。通过杂种早代花粉母细胞联会四价体Ｃ－带带型的电脑分析，进一步验证了这一结果。; 李浩兵仲裕泉仲裕泉钟少斌吕玉琦钟少斌姚景侠; 关键词：大麦易位系栽培品种染色体

大豆球蛋白A_(1b)B_2基因表达的分子基础探讨被引量：1: 1993年; 通过对大豆品种松浦和A_(1b)B_2基因突变体凡实的染色体DNA进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,克隆了一个只存在于大豆品种松浦中,而不存在于大豆突变体凡实中的大小为2.2Kb的DNA片段,并利用pUC19为载体,对该片段进行了亚克隆,利用多种限制性内切酶进行了酶切分析,得到了该片段的酶切图谱。根据两个大豆品种在多种限制性内切酶酶切时都表现出显著差异,推断大豆球蛋白A(1b)B_2基因之所以不能在大豆品种凡实中表达,是由于该品种染色体DNA发生了倒位或缺失所致,而不仅仅是个别碱基对的突变。; 张德玉管丽丽伊藤义文深泽亲房; 关键词：大豆突变体

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张德玉

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