李剑
- 作品数：22 被引量：181H指数：7
- 供职机构：第四军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 亮氨酸脑啡肽对脂多糖促血管平滑肌细胞增殖效应的抑制作用被引量：1
- 1998年
- 目的：观察亮氨酸脑啡肽（L－Enk）和脂多糖（LPS）对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响，并观察两者之间的相互作用及阿片受体阻滞剂纳络酮（Nal）的影响．方法：实验以离体培养的SD大鼠胸主动脉VSMC为模型．用四唑盐比色实验（MTT）法及3H－TdR掺入技术观察VSMC的增殖、DNA合成量的变化．结果：研究发现10-7kg／L～10－5kg／LLPS可显著促进VSMC的增殖及DNA的合成（P<0．05）．10-5mol／L～10-4mol／LL－Enk对VSMC的增殖及DNA的合成有抑制作用（P<0．01）．10－8mol／L～10－5mol／LNal对VSMC的增殖及DNA的合成无显著影响．L－Enk可抑制LPS促VSMC增殖的作用，此抑制作用可被Nal阻断．结论：LPS促进VSMC的增殖和DNA合成，L－Enk可抑制LPS的促VSMC增殖作用，该抑制作用是通过阿片受体介导的．
- 林树新李剑李莹赵贺玲张莉莉
- 关键词：亮氨酸脑啡肽纳络酮脂多糖血管平滑肌细胞增殖
- 一种新的抑癌候选基因——NDR2在人类正常组织及相应肿瘤中的表达被引量：50
- 2002年
- 为观察NDR2基因在人类正常组织及相应肿瘤组织中的表达分布特点 ,收集人脑与胶质瘤、肺与肺癌、胃与胃癌、结肠与结肠癌组织标本 ,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取 ,应用免疫组化方法和RT PCR技术检测NDR2蛋白质及mRNA表达水平 ,并通过DNA测序验证PCR产物的正确性 .免疫组化结果表明 ,在上述各组织均有NDR2蛋白不同程度的表达 .RT PCR结果显示 ,在人脑和胶质瘤组织、肺与肺癌组织、胃与胃癌组织、结肠与结肠癌组织中均有NDR2mRNA表达 ,其表达水平以脑组织为最高 .NDR2mRNA在正常脑和肺组织的表达水平分别显著高于胶质瘤与肺癌组织 ,而结肠与结肠癌组织 ,胃与胃癌组织NDR2mRNA表达水平则无显著差别 .以上结果表明 ,NDR2基因可能广泛表达于人体正常组织内 ,而在胶质瘤与肺癌中的表达较相应正常组织减低 ,提示该基因可能与神经系统及呼吸系统肿瘤的发生发展有关 ,为进一步探讨该基因功能提供了线索 .
- 李剑刘新平林树新邓艳春孟庆军张文红李树钧聂晓燕药立波
- 关键词：肿瘤免疫组织化学MRNA表达
- 冠状动脉狭窄的电子束CT诊断
- 2003年
- 目的 :评价电子束CT(EBCT)及其三维血管成像对冠状动脉狭窄诊断的准确性及局限性。方法 :3 7例经E BCT冠状动脉增强扫描和三维重建的患者 ,均又经常规心血管造影检查 (CAG)。由两名不知其它检查结果的放射科医师将冠状动脉左主干 (LM )和左前降支 (LAD)、左回旋支 (LCX)、右冠状动脉 (RCA)的近、中段评价后与造影结果逐段对照 ,并作统计学分析。结果 :在CAG结果≥ 2mm的 2 49个冠状动脉节段中 ,EBCT可评价的有 2 2 8( 91.6% )个 ,无法评价的 2 1( 8.4% )个 ,影响因素最主要为广泛钙化遮蔽管腔。EBCT诊断冠状动脉各主干近、中段≥ 5 0 %狭窄总的敏感性、特异性和阳性预测值、阴性预测值分别为 80 .1%、91.3 %、72 .4%、92 .5 %。其中左主干均为 10 0 % ,前降支分别为 90 .4%、94.2 %、84.5 %和 96.1%。结论 :EBCT是较好的无创性冠状动脉成像技术 ,对冠状动脉左主干和前降支近、中段狭窄的评价具有极高的准确性 ,虽然无法替代CAG ,但极具临床应用潜力。局限性是空间分辨率低 ,价格昂贵。
- 郑敏文孙立军宦怡赵宏亮葛雅丽白桂琴李剑
- 关键词：冠状动脉狭窄电子束CT影像学诊断三维重建冠状血管造影术
- 红景天甙抑制兔缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖的作用被引量：25
- 2000年
- 目的 观察红景天甙 (salidroside,Sal)对缺氧状态下兔肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖、DNA合成和细胞周期的影响 ,并初步探讨其作用机制 .方法 应用离体培养的PASMC,采用四唑盐 (MTT)比色法实验、3H-胸腺嘧啶核苷(3H- Td R)参入和流式细胞仪技术 ,观察 PASMC的增殖、DNA合成和细胞周期的变化 .结果 缺氧 2 4h可直接刺激PASMC,使其3H- Td R的参入量显著增加 (P<0 .0 1 ) ,MTT吸光度 (A)增加 (P<0 .0 5 ) ;钙通道阻滞剂 verapamil可抑制缺氧的这种刺激作用 ;流式细胞仪分析显示缺氧 2 4h PASMC的 G2 /M期细胞比例与常氧对照组相比明显增加 (P<0 .0 1 ) ,G0 /G1 期细胞比例明显减少 ;在缺氧的 PASMC培养液中加入 Sal(0 .2～ 3.2 μmol· L- 1 ) ,PASMC的 3H- Td R参入量与 MTT的 A值与单纯缺氧组相比显著下降 ,Sal(6 .4μmol· L- 1 )可增加 G0 /G1 期细胞比例 ,减少 G2 /M期细胞比例 (P<0 .0 5 ) ;缺氧状态下 ,Sal与 verapamil合用并不增加对PASMC的抑制效应 .结论 缺氧可直接刺激 PASMC的增殖及 DNA合成 ,其作用机制可能与 PASMC内 Ca2 +浓度增加有关 ,Sal可抑制缺氧对 PASMC的增殖及
- 赵贺玲林树新贾斌李剑张莉莉张世范
- 关键词：缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖红景天甙
- 抗血管紧张素原多克隆抗血清的制备及鉴定
- ＜正＞ 血管紧张素原（angiotensinogen,AGT）是局部肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin sys-tem,RAS）主要成份之一,也是合成血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）的唯一前体,不可或缺。...
- 孟庆军张立藩李剑张乐宁马进
- 文献传递
- 影响双源CT冠状动脉成像的因素
- 目的:双源CT采用两套数据采集系统,采集图像的时间分辨率达到83ms,被认为可以在任意心率下成像。文章探讨在不用β～阻滞剂时,双源CT冠脉成像中影响冠状动脉显示及狭窄准确性评价的因素。
- 尤志军石明国李剑
- 文献传递
- 从人T细胞淋巴瘤cDNA文库中筛选含PH结构域编码序列的新基因被引量：2
- 2002年
- 目的从Ｔ细胞中获得更多含ＰＨ结构域编码序列的新基因。方法 采用低严谨核酸杂交技术，根据Ｔ细胞中已知的ＰＨ结构域的分子设计探针，对人Ｔ细胞淋巴瘤ｃＤＮＡ文库进行筛选。结果 在筛选过程中得到了４个新基因，各ｃＤＮＡ长度依次为：１７３３ｂｐ、２３０８ｂｐ、２１３０ｂｐ和１６４７ｂｐ，分别编码含２２９、３７６、２１１ 和 １４３个氨基酸残基的多肽。经生物信息学分析，在基因数据库中未发现与此４种ｃＤＮＡ序列类似的基因。该４个基因均已被ＧｅｎＢａｎｋ收录，登录号分别为：ＡＦ３３４５８８ＡＦ１３４５８９、ＡＦ３３４５９０和 ＡＦ３３４７９２。结论 这些新基因的获得及进一步研究，可能会为深人探讨Ｔ细胞激活机制提供新的线索。
- 李剑刘新平药立波林树新季少平聂晓燕
- 关键词：T细胞淋巴瘤CDNA文库PH结构域
- 抗血管紧张素原多克隆抗血清的制备及鉴定被引量：5
- 2003年
- 为深入研究血管紧张素原 (angiotensinogen ,AGT)的表达和组织分布特征 ,我们以原核表达的AGT蛋白C末端片段为免疫原免疫家兔 ,制备了针对AGT的多克隆抗血清 ,并对其进行了ELISA、Western印迹分析及免疫组化鉴定。结果发现 ,经多次免疫后获得的多克隆抗血清不仅效价高 (1∶2 5 60 0 ) ,而且能特异性地针对组织内源性及原核表达的AGT蛋白 ,同时在人和大鼠组织AGT之间会发生交叉反应。以此抗血清进行免疫组化染色 ,观察到人胰腺的胰岛细胞及肝内胆管上皮细胞胞浆均有AGT蛋白表达。以上结果提示 ,利用大肠杆菌融合表达的AGT蛋白可有效刺激家兔产生AGT抗体。本工作为进一步研究AGT乃至局部RAS的生理。
- 孟庆军李剑张文红张乐宁张立藩
- 关键词：血管紧张素原原核表达抗血清特异性
- 红景天甙对缺氧状态下鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和〔Ca^(2+)〕i的影响被引量：19
- 2004年
- 目的研究红景天甙 (Salidroside)对缺氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖、DNA合成和〔Ca2 +〕i的影响 ,探讨其防治缺氧的可能作用机制。方法应用离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,采用四唑蓝比色试验 (MTT)测定细胞生长数 ,3H -胸腺嘧啶核苷 (3H -TdR)掺入测定DNA合成 ,和fura - 3/AM测定细胞内钙离子浓度〔Ca2 +〕i。PASM的缺氧培养采用自制缺氧装置 (含 5 %CO2 + 95 %N2 混合气体 ) ,并置于 37℃培养箱内。结果红景天甙可显著抑制缺氧状态下PASMC的增殖和DNA的合成 ,以单纯缺氧组为对照 ,加入 32× 10 - 5mol·L- 1红景天甙后 ,PASMC的吸光值下降 4 5 % ,3H -TdR掺入量下降 2 8% ;常氧状态下PASMC细胞内〔Ca2 +〕i为(14 8± 14 )nmol·L- 1,当培养液充以 5 %CO2 + 95 %N2 气体时 ,细胞内荧光强度明显增强 ,PASMC内〔Ca2 +〕i迅速上升为 (42 2± 2 4 )nmol·L- 1,此时 ,加入红景天甙 6 4× 10 - 5mol·L- 1可见细胞内荧光强度变弱 ,〔Ca2 +〕i迅速下降到 (2 98± 18)nmol·L- 1。结论红景天甙可抑制缺氧状态下鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖和DNA合成 ,其机制可能与抑制PASMC内〔Ca2 +〕i有关。
- 赵贺玲林树新李剑
- 关键词：平滑肌细胞细胞增殖红景天甙
- 红景天苷对大鼠血管平滑肌细胞ACE基因表达的影响被引量：27
- 2002年
- 目的 检测红景天苷对大鼠血管平滑肌细胞 ACE基因表达的影响。方法 离体培养 SD大鼠 VSMC,应用 RT- PCR方法 ,检测红景天苷对血管平滑肌细胞 ACE基因表达的影响。结果 随红景天苷用药浓度的增加(0 .3～ 0 .5 mmol·L-1) ,ACE m RNA表达逐渐降低。结论 红景天苷可抑制血管 ACE的表达 。
- 甄志军李志华李剑
- 关键词：红景天苷VSMC血管紧张素转化酶MRNART-PCR
