李闰婷
- 作品数:11 被引量:19H指数:3
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌traP分型及TraP与Rap的体外相互作用研究
- RNAIII激活蛋白的靶蛋白(target of RNAIII-activiting protein,TraP)是一种由167个氨基酸残基构成的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus...
- 李闰婷
- 关键词:金黄色葡萄球菌相互作用结合位点
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素基因表达及溶血活性检测被引量:2
- 2009年
- 目的为了进一步研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)α-溶血素(Hla)的分子致病机理及其抗原性,对S.aureusHla进行了表达纯化。方法用聚合酶链式反应(PCR)技术,从S.aureuswood46株中扩增出hla基因,将该基因经BamHI和SalI双酶切后克隆到表达载体PET-32a中,获得重组质粒pET-32a(+)/hla,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测分析,然后进行纯化和用溶血试验检测其活性。结果扩增的hla基因序列与已发表的hla基因序列同源性为100%,构建的重组表达质粒pET-32a(+)/hla在E.coliBL21(DE3)中得到表达,重组α-溶血素蛋白为53kDa,纯化后的溶血活性为5000HU。结论成功表达并获得了有活性的重组Hla蛋白。
- 李闰婷朱战波崔玉东
- 关键词:金黄色葡萄球菌基因表达溶血活性
- 金黄色葡萄球菌ITC融合蛋白及制备方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌ITC融合蛋白,是由IsdB免疫优势片段(IsdB<Sub>id</Sub>)和Trap以及ClfA免疫优势片段N3区域(ClfA<Sub>N3</Sub>)融合而成的蛋白,其氨基酸序列如SE...
- 崔玉东朱战波于立权陈龙欣李闰婷
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌wood46株eno基因的克隆及原核表达被引量:3
- 2014年
- 为获得Eno的重组蛋白,采用PCR法从金黄色葡萄球菌wood46株基因组扩增eno基因,并连接到pMD18-T载体上,转化至BL21感受态细胞中;重组质粒经PCR及酶切鉴定后,送上海生工测序。将鉴定正确的质粒酶切回收产物与原核表达载体pET-32a连接,然后转化至BL21感受态细胞,对平板筛选的阳性质粒进行PCR和酶切鉴定。对鉴定正确的重组菌进行诱导表达并纯化。实验结果表明成功构建了pET32a-eno表达载体,并获得了该纯化蛋白。该实验结果为S.aureus亚单位疫苗研究奠定了一定的基础。
- 曹宏伟李冬野刘哲崔玉东宋佰芬肖翠红王桂华李闰婷
- 关键词:金黄色葡萄球菌克隆
- 金黄色葡萄球菌ITC融合蛋白及制备方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌ITC融合蛋白,是由IsdB免疫优势片段(IsdB<Sub>id</Sub>)和Trap以及ClfA免疫优势片段N3区域(ClfA<Sub>N3</Sub>)融合而成的蛋白,其氨基酸序列如SE...
- 崔玉东朱战波于立权陈龙欣李闰婷
- 文献传递
- 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子及荚膜基因的PCR检测被引量:5
- 2009年
- 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)的基因型特征,本实验利用聚合酶链式反(PCR)方法,对S.aureus的3个标准株和30个临床分离株的凝集因子A、凝固酶、溶血素等33种致病因子进行了检测。结果表明各分离株在毒力因子方面存在一定差异。这些差异的检测将为进一步研究S.aureus的致病性和有效防治提供参考。
- 迟佳琦李闰婷朱战波曹宏伟崔玉东
- 关键词:奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子PCR检测
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龚刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌TraP蛋白单克隆抗体制备被引量:2
- 2012年
- 研究通过骨髓瘤细胞SP2/0与经金黄色葡萄球菌(S.aureus)TraP蛋白免疫的小鼠脾细胞融合,并进一步筛选和单克隆化,获得了11株稳定分泌抗TraP蛋白的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,其中8株McAb(2A1、3A6、3B1、1B4、2C5、4C7、5C3和2D8)亚类为IgG1,3株McAb(2A7、3A1和1C4)亚类为IgM,轻链均为κ链。8株IgG1型McAb的小鼠腹水的抗体效价均达到1∶128 000,交叉实验结果显示这8株McAb不与S.aureus的ClfA、ClfB、Cna、FnbPA和IsdB蛋白以及链球菌的GapC蛋白反应,具有良好的特异性,Western-blotting结果显示这8株McAb识别的都是TraP的线性表位。
- 周雪范志勇汤炜张丽萌李闰婷周瑜崔玉东
- 关键词:金黄色葡萄球菌TRAP单克隆抗体
- 金黄色葡萄球菌凝集因子A的免疫原性被引量:7
- 2009年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)凝集因子A(ClfA)免疫原性及免疫保护作用,应用PCR方法扩增出金黄色葡萄球菌Newman、Wood46和HLJ23-1株的clfa基因并进行序列分析,再将Newman株的clfa基因插入到pQE-30载体上,导入宿主菌Escherichia coli M15(pREP4)并诱导表达和纯化ClfA重组蛋白。用纯化的ClfA免疫小鼠,检测血清中抗体和细胞因子水平,首次免疫后35 d时用金黄色葡萄球菌Wood46、HLJ23-1、Newman株对小鼠攻毒。结果发现:clfa基因序列高度保守;ClfA重组蛋白在E.coli M15中获得表达;在首次免疫后35 d时血清抗体效价和细胞因子浓度与对照组相比,均显著升高(P<0.05);攻毒结果为蛋白免疫组小鼠获得一定的免疫保护。由此表明,ClfA重组蛋白有较好的免疫原性和免疫保护力。
- 冯昊刘乐锋迟佳琦王宁李闰婷佟春玉马金柱朱战波崔玉东
- 关键词:金黄色葡萄球菌免疫原性
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龑刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递