杨佳荟
- 作品数：18 被引量：60H指数：4
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮免疫病理过程中的作用机制
- 本课题拟首先通过三色流式细胞术检测SLE患者外周血不同T细胞亚群上ICOS及其受体表达水平与疾病活动程度、病程以及血清抗DSDNA抗体和免疫球蛋白含量之间的关系；进一步采用体外实验证实ICOS共刺激通路在SLE患者T细胞...
- 杨佳荟
- 关键词：可诱导共刺激分子系统性红斑狼疮抗DSDNA抗体流式细胞术
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- 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制作用被引量：11
- 2004年
- 目的 探讨乙酰肝素酶 (HPSE)反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN )对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制活性。方法 设计合成分别互补于HPSEmRNA 5 '未翻译区和起始密码区的AS ODN1、AS ODN2及相应对照NS ODN1、NS ODN 2 ,在脂质体介导下以 2 5 0nmol/L终浓度转染人乳腺癌MDA43 5细胞 ,以RT PCR和Westernblot分别检测HPSEmRNA和蛋白表达 ,以基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭力。结果 AS ODN 2组的HPSEmRNA相对表达量、蛋白表达量和侵袭细胞数(0 .62± 0 .0 4、12 .70± 1.70、61.0 0± 9.0 0 )与脂质体对照组 (1.60± 0 .0 4、3 6.2 0± 2 .10、178.0 0±17.0 0 )和NS ODN2组 (1.48± 0 .0 3、3 5 .5 0± 2 .3 0、174.0 0± 2 0 .0 0 )相比较均显著降低 (P <0 .0 1) ;而AS ODN 1组与脂质体对照组和NS ODN1组相比较差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 互补于起始密码区的HPSEAS ODN可通过下调HPSE表达显著抑制人乳腺癌细胞株MDA43 5的侵袭力。
- 张友磊傅志仁陈学云杨佳荟王元和沈茜
- 关键词：乙酰肝素酶反义寡核苷酸乳腺癌癌细胞株侵袭力
- TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测新型趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-2γmRNA表达水平被引量：3
- 2003年
- 目的 建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法检测新型趋化因子巨噬细胞炎症蛋白 2γ(MIP 2γ)mRNA表达水平 ,并对方法进行评估。方法 TaqMan实时荧光定量RT PCR检测MIP 2γmRNA的表达。结果 线性检测范围达 6个数量级 ,最低检测下限为 6× 10 2 拷贝 ,最高检测上限为 6× 10 7拷贝 ,批间及批内变异 <12 2 %。正常Balb/c小鼠心脏、肝脏、肾脏组织均可检测到MIP 2γmRNA表达 ,以心脏表达水平最高。结论 采用TaqMan实时荧光定量RT PCR检测MIP 2γmRNA表达水平准确、特异、灵敏、快速、操作简便 ,具有临床推广价值。
- 杨佳荟沈茜
- 关键词：TAQMAN实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
- 系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞CD_(80)和CD_(86)的表达被引量：4
- 2004年
- 系统性红斑狼疮(SLE)是自身免疫介导的、以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病.血清中出现以抗核抗体为代表的多种自身抗体和多系统受累是其主要临床特征.CD80(B7-1)和CD86(B7-2)是T细胞活化必需的协同刺激分子.我们研究了SLE患者外周血淋巴细胞(PBLC)CD80和CD86的表达,以期探讨CD80和CD86在SLE发病中的作用.
- 程昉韩星海杨佳荟沈茜
- 关键词：系统性红斑狼疮外周血淋巴细胞CD80CD86
- 小鼠FasL全长cDNA的克隆与FasL腺病毒载体的构建
- 2005年
- 目的: 克隆小鼠FasL全长cDNA, 构建FasL腺病毒载体。方法: 从经ConA(5mg/L)刺激 48h的BALB/c小鼠脾脏单个核细胞中克隆FasL全长cDNA, 构建以CMV启动子转录调控的含小鼠FasL全长cDNA的穿梭质粒mFasL pAdTrack。经PacI酶切后, 与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组。挑选阳性重组子转染HEK- 293细胞, 构建CMV启动子转录调控的mFasL重组腺病毒载体。结果: 成功地克隆小鼠FasL全长cDNA, 经PCR、酶切及荧光检测等证实, 成功地构建了重组mFasL腺病毒载体。结论: 重组FasL腺病毒载体的构建为进一步研究FasL在肿瘤和自身免疫性疾病的作用奠定了基础。
- 杨佳荟沈茜
- 关键词：FASL腺病毒
- 系统性红斑狼疮病人外周血Th细胞和Tc细胞IFN-γ及IL-4表达水平与疾病的关系被引量：10
- 2006年
- 目的:观察SLE病人体内Th1/Th2及Tc1/Tc2比例失衡及其与疾病的关系。方法:SLE病人(活动期病人15例,稳定期病人20例)及正常人20例外周全血经PMA(20 ng/m l)和离子霉素(ionomyc in,1μmol/L)刺激4小时后,采用四色流式细胞术检测CD3+CD8-T细胞(主要为Th细胞)及CD3+CD8+T细胞(Tc细胞)胞浆内IFN-γ及IL-4的表达水平。血清抗dsDNA抗体检测采用ELISA法、血清免疫球蛋白和尿蛋白含量测定采用免疫速率散射比浊法。结果:SLE活动期病人Th细胞中IFN-γ的阳性百分率明显低于稳定期病人及正常人,Tc细胞中IFN-γ的阳性百分率明显低于正常人;IL-4的阳性百分率各组间无明显差异。稳定期病人仅Tc细胞IFN-γ的百分率明显低于正常人。血清抗dsDNA抗体(+)病人Th和Tc细胞IFN-γ的阳性百分率明显低于抗dsDNA(-)病人;免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM中任何一种)异常增高的病人Th及Tc细胞中虽IL-4的阳性百分率无变化,但平均荧光强度明显高于免疫球蛋白水平正常的病人。Th及Tc细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平与尿蛋白含量无明显关系。结论:SLE病人体内存在1型及2型细胞因子的异常表达,并与疾病活动程度存在一定的关系,值得进行深入研究。
- 杨佳荟刘莉郭品娥沈茜
- 关键词：SLEIFN-ΓIL4
- 一种重组融合蛋白及其制备方法及用途
- 本发明涉及可诱导共刺激分子的重组融合蛋白，是功能分子与可诱导共刺激分子融合形成的重组蛋白。本发明可采用基因工程方法、化学方法等常规方法按融合、表达、纯化等基本步骤，即可制备该重组融合蛋白。本发明能特异性地抑制记忆和活化T...
- 沈茜王健张鹏杨佳荟张军
- 文献传递
- ICOS共刺激通路对SLE患者T、B细胞免疫调控的体外研究
- 目的研究ICOS共刺激途径在SLE免疫病理过程中的作用。方法体外研究ICOS共刺激通路在SLE患者外周血T细胞增殖与活化、B细胞克隆性的增生以及T细胞依赖型自身抗体产生过程中的作用。结果ICOS共刺激途径能显著增强正常人...
- 杨佳荟张军王建蔡青赵东宝韩星海沈茜
- 关键词：可诱导共刺激分子T细胞增殖
- 文献传递
- SLE患者外周血T细胞亚群ICOS与CD28共表达水平与疾病的关系被引量：4
- 2005年
- 目的 观察系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus ,SLE)病人外周血CD4 +及CD8+T细胞表面可诱导共刺激分子 (inducibleco stimulator ,ICOS)及CD2 8共表达水平 ,探讨ICOS和CD2 8共表达水平与SLE疾病的关系。方法 采用三色流式细胞术检测SLE病人 (n =51 )及正常人 (n =30 )外周血CD4 +及CD8+T细胞表面ICOS与CD2 8共表达水平 ,并结合SLE病人疾病活动程度、临床表现等进行分析。结果 与正常人相比 ,SLE活动期和稳定期病人外周血CD4 +T细胞中仅表达ICOS不表达CD2 8(即CD2 8- ICOS+)的细胞比例明显升高 ,但活动期病人和稳定期病人之间并无差异 ;活动期病人外周血CD8+T细胞上同时表达CD2 8和ICOS的细胞 (即CD2 8+ICOS+细胞 )和CD2 8- ICOS+细胞比例都明显升高 ;同一SLE病人在疾病活动期CD4 +和CD8+T细胞中CD2 8+ICOS+的细胞比例和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例明显高于该病人经过治疗病情稳定时 ;初发未治疗SLE病人仅CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞的比例比复发病人明显升高 ;血清抗dsD NA抗体 ( + )病人和血清免疫球蛋白含量 (IgG、IgA和IgM中任何一种 )异常升高的病人外周血CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( )和血清免疫球蛋白含量正?
- 杨佳荟沈茜
- 关键词：CD28ICOS外周血T细胞亚群共表达SLE患者SLE活动期
- 流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群被引量：20
- 2004年
- 目的 建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法 ,探讨两者在流式细胞仪检测方面的不同。方法 采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞 ,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8表达的变化 ;采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL 4和IFN γ的表达。结果 在PMA和离子霉素共同刺激后 4h ,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降 ,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降 ;采用多色分析技术可以有效的检测Th1细胞和Th2细胞 ;采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞 ;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞。结论 人Th细胞检测宜采用 4色染色分析技术 ,小鼠Th细胞检测采用 3色染色技术即可。
- 刘莉张军方超平杨佳荟李闻捷沈茜
- 关键词：小鼠TH细胞亚群TH1细胞TH2细胞CD8
