柯屾
- 作品数:4 被引量:6H指数:1
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 利用噬菌体随机肽库技术分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的表位被引量:1
- 2002年
- 目的 :分析患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法 :用ProteinA亲和层析柱从患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体 ;以此对噬菌体表面展示的随机 6肽库进行亲和筛选。结果 :经具有良好富集效果的三轮筛选后 ,从第三轮挑选出的 12个克隆进行结合试验 ,发现 8个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清反应 ;测序表明阳性克隆的外源肽具有一定的相似性。用阳性噬菌体克隆检测 2 0例患者血清 ,有程度不等的阳性反应。结论 :用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中筛选得到了有一定功能的模拟表位。
- 柯屾戚中田温新宇施明胡美茹沈倍奋
- 关键词:噬菌体随机肽库丙肝血清抗HCV抗体表位
- 从随机9肽库中筛选HCV抗原表位被引量:1
- 2002年
- 目的 :用患者血清中抗HCV抗体从随机 9肽库中筛选HCV抗原表位。方法 :将病人血清用硫酸铵粗提后 ,用ProteinA亲和层析柱纯化和制备抗HCV多克隆抗体 ;以此为筛选配基 ,对噬菌体表面展示的随机 9肽库进行亲和筛选。结果 :三轮筛选的投入产出比逐轮升高至 5 0× 10 - 3 、假阳性率逐轮降低至 0 2 % ,提示具有良好的富集效果。从第三轮挑选出的 15个克隆进行结合试验 ,发现 7个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清反应 ;测序表明 6个克隆的外源肽含有核心序列SPVAXVLXT。用阳性噬菌体克隆检测 2 0例病人血清 ,有程度不等的阳性反应。结论 :用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中筛选得到了有一定功能的模拟表位。
- 柯屾戚中田温新宇施明赵平沈倍奋
- 关键词:噬菌体随机肽库抗原表位丙型肝炎病毒HCV
- 用抗HCV多抗从随机15肽库中筛选抗原表位被引量:5
- 2003年
- 目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3×10-3,假阳性率逐轮降低至0.2%,提示具有良好的富集效果。对从第3轮挑选出的16个克隆进行结合试验,发现9个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清起反应。测序表明,8个克隆的外源肽含有核心序列WPWS。用阳性噬菌体克隆检测20例丙肝患者血清,有程度不等的阳性反应。结论:用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中,筛选到有一定功能的模拟表位。
- 柯屾朱继萍温新宇施明贺永怀沈倍奋赵平姚志建
- 关键词:噬菌体随机肽库抗原表位丙型肝炎病毒