柳勤 作品数:12 被引量:49 H指数:5 供职机构: 广州市天河区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 广州市天河区科技计划项目 广州市医药卫生科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
1起副溶血性弧菌食物中毒的菌型鉴定及同源性分析 2012年 目的对1起副溶血性弧菌引起的食物中毒进行菌型鉴定及同源性分析,为食物中毒疫情处置提供参考。方法采集病例和食物、外环境标本进行菌株型别的分离鉴定,并对菌株同源性进行分析。结果共采集标本17份,其中3份外环境标本和5份病例标本检出副溶血性弧菌,病例菌株血清型均为O3:K6,环境菌株血清型为O4:KUT和O1:KUT。所有菌株trh基因阴性,病例菌株tdh阳性,环境菌株tdh阴性。脉冲场凝胶电泳(PFGE)指纹图谱显示所有病例菌株具有相同的PFGE图谱,与环境菌株的PFGE图谱的相似性为64.1%。结论该起食源性疾病暴发疫情是由O3:K6型副溶血性弧菌引起的食物中毒事件。 柳勤 李柏生 黄燕 张惠文 谭少杰关键词:食物中毒 副溶血性弧菌 脉冲场凝胶电泳 某高校一起诺如病毒感染暴发疫情调查分析 目的分析某高校一起诺如病毒感染暴发疫情原因,进一步探讨校园诺如病毒感染疫情防控措施。方法根据防控方案要求,制定病例定义,在全校范围内搜索病例并进行调查,采用描述性流行病学方法分析疫情特征,对病例肛拭子标本开展病原学检测。... 叶新 刘钢 张宏 江淑仪 冯伊彦 柳勤 李桂怡关键词:诺如病毒 暴发疫情 流行病学 天河区社区卫生服务机构消毒效果监测分析 被引量:5 2017年 目的了解社区卫生服务机构消毒和灭菌质量、医院内感染的重点区域和重要环节,为有效控制和降低院内感染发生提供依据。方法按《消毒管理办法》和《医院感染管理办法》的要求对辖区内的社区卫生服务中心及服务站开展消毒效果监测。结果 2014-2015年对本辖区内44家社区卫生服务机构开展消毒效果监测,共采集各类标本1 047份,平均合格率为94.94%,合格率最高的为物体表面、使用中消毒液和高压蒸汽灭菌效果,均为100.00%;其次为医务人员手(96.61%),空气(95.96%),灭菌器材(95.65%),紫外线灯管(93.67%);合格率最低的为医院污水(50.91%)。结论天河区基层社区医疗卫生机构消毒效果总体达到相关要求,医务人员手、医院污水、灭菌物品和紫外线灯灯管合格率偏低,需加强监督和管理。 柳勤 叶新 林惠芳关键词:社区卫生服务机构 消毒效果 2010年广州市天河区食源性致病菌监测 被引量:8 2011年 目的探讨广州市天河区食品中食源性致病菌的污染状况。方法在2010年1月~2010年12月以无菌方式定期随机采集广州市天河区6个食品污染物监测点内的7类农贸市场的2279份食品,依据国家食源性疾病监测网2010年度工作手册,检测副溶血性弧菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157及空肠弯曲菌等6种致病菌。结果在广州市天河区6个食品污染物监测点内的7类农贸市场的2279份食品中,共检测食源性致病菌492株,食源性致病菌检出率为21.59%,食源性致病菌检出率以生肉(28.71%)为最高,依次为淡水产品(24.86%)、生食蔬菜(23.14%)、生制食品(12.34%)、速冻米面(11.03%)、熟肉制品(10.53%)及熟制食品(9.70%),在492株食源性致病菌中,以副溶血性弧菌为最高(41.16%),其次是单增李斯特菌。结论在广东省广州市天河区的食品食源性致病菌污染较为严重,以生肉污染严重。因此,我们应加强对畜禽类在屠宰、运输、加工过程中的卫生管理和监测,减少食源性疾病的发生。 柳勤关键词:食品 食源性致病菌 5种食源性致病微生物毒力基因重组质粒的构建、克隆表达与表达产物的研究 被引量:4 2014年 目的构建大肠杆菌O157∶H7、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌5种主要食源性致病微生物毒力基因重组质粒载体并鉴定其表达产物,为探讨高通量磁性荧光纳米颗粒标记相应的抗体技术快速检测带毒力基因的致病微生物的可行性奠定基础。方法分别从5种食源性致病微生物毒力岛中选择特异性的毒力基因进行引物设计,分别提取5种目的细菌DNA片段,经PCR扩增、电泳回收目的基因片段,将目的基因片段与原核表达载体pET-23a、pET-28a、pET-32a构建各自的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒载体,构建后的重组质粒进行酶切和测序鉴定,再转化入表达宿主E·coliBL21(DE3)。在0.1 mmol/L的IPTG诱导下,目的质粒载体在E·coliBL21(DE3)株中表达,SDS-PAGE电泳检测表达蛋白。结果实验成功构建大肠杆菌O157∶H7、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌等细菌的毒力基因重组质粒载体pET-23a-eaeA、pET-28a-tdh、pET-28a-enterotoxin B、pET-32a-invA和pET-28a-ipaH,并克隆出969 bp的eaeA基因片段、567 bp的tdh基因片段、798 bp的enterotoxin B基因片段、1 041 bp的invA基因片段和771 bp的ipaH基因片段。重组质粒载体经酶切和测序与目标基因序列一致。在E·coliBL21(DE3)株中有质粒表达蛋白37.5 kDa(eaeA)、26 kDa(tdh)、34.5 kDa(enterotoxin B)、41 kDa(invA)、32 kDa(ipaH)。结论本研究成功构建了5种食源性致病微生物毒力基因重组质粒并在原核细胞中高效表达,为下一步获得相应的毒力基因抗体及快速诊断试剂的研制应用奠定了基础。 向辉 朱海 刘钢 孙世宏 李颖 张汉斌 柳勤 王西丽关键词:克隆 原核细胞 某高校一起诺如病毒感染暴发疫情调查分析 被引量:2 2021年 目的分析某高校一起诺如病毒感染暴发疫情原因,进一步探讨校园诺如病毒感染疫情防控措施。方法根据防控方案要求,制定病例定义,在全校范围内搜索病例并进行调查,采用描述性流行病学方法分析疫情特征,对病例肛拭子标本开展病原学检测。结果本起疫情共发病68例,罹患率为1.49%(68/4570),男生罹患率1.10%(4/365),女生罹患率1.58%(64/4055),男女生罹患率差异无统计学意义(χ^(2)=0.51,P>0.05)。临床症状主要表现为呕吐和腹泻,其中有呕吐症状者(≥2次/d)52例,占76.47%(52/68);腹泻症状者(≥3次/d)28例,占41.18%(28/68);伴有发热症状者23例,占33.82%(23/68)。本起疫情共检出诺如病毒GⅡ阳性标本14份,其中11份为现症学生病例标本、3份为校外餐饮店从业人员标本。首发病例发病时间为2020年11月20日,11月22日为发病高峰,末例病例发病时间为11月27日。结论这是一起由诺如病毒GⅡ型引起的诺如病毒感染暴发疫情,早期学生可能因食用校外餐饮机构食物而感染诺如病毒后回校未被及时发现和隔离,进而出现校内接触传播。经过及时开展隔离病例、场所消毒、健康宣传等疫情控制措施,疫情最终得到全面控制,疫情结束。 叶新 刘钢 张宏 江淑仪 冯伊彦 柳勤 李桂怡关键词:诺如病毒 暴发疫情 流行病学 2015年天河区食品安全风险监测微生物结果与分析 被引量:8 2016年 目的分析2015年天河区食品安全风险监测微生物结果,了解市售食品中食源性致病菌的污染情况,进行食品安全风险评估和预警,为制定有效的监管措施提供依据。方法每季度均匀采样,共采集了熟肉制品20份,培烤食品(蛋糕、面包)32份,中式快餐40份,共92份,根据《2015广州市食品安全风险监测工作手册》提供的方法进行菌落总数、大肠菌群、沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌检测,并按国家标准进行结果判定。结果在监测的3类92份食品中,细菌总数超标率最高(52.17%),其次为大肠菌群(40.22%)、蜡样芽胞杆菌(5.43%),沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌未检出。结论天河区大部分市售食品安全风险低,但抽查的3类食品均存在不同程度的污染现象,存在一定的安全隐患,应加强监管。 柳勤 叶新 黄燕 张惠文关键词:微生物 广州市天河区托幼机构消毒效果监测及分析 被引量:5 2014年 目的监测天河区托幼机构消毒效果,了解托幼机构卫生现状,探讨解决办法。方法收集2012-2013年天河区86间托幼机构监测数据,对消毒效果进行统计分析。结果 2年共采样3 174份,合格2 537份,合格率为79.93%,其中以空气和餐具的合格率最高,其次是物体表面和儿童手,2013年总体合格率较2012年有明显提高。结论天河区托幼机构消毒卫生状况总体偏低,其中以教师和儿童手的合格率较低,应引起重视。 柳勤 叶新关键词:托幼机构 消毒效果 PFGE技术分析03:K6副溶血性弧菌引起的食物中毒 被引量:1 2013年 目的对一起食物中毒的可疑致病菌进行相关的实验室检测及同源性分析。方法对15份剩余食品,10份公用具涂抹样品,2份从业人员手拭子,5份从业人员肛拭子,14份发病人员肛拭子进行致病菌分离鉴定、血清型、毒力基因以及PFGE图谱分析。结果 14份发病人员肛拭子中检出副溶血性弧菌11份,血清型均为03:K6型,PFGE分型图谱完全相同。结论综合流行病学调查资料和实验室检测结果,证实本次食物中毒为同源的03:K6型副溶血性弧菌感染引起。 柳勤 李柏生 黄燕 张惠文关键词:脉冲场凝胶电泳 副溶血性弧菌 食物中毒 磁性荧光纳米颗粒标记免疫层析技术检测副溶血性弧菌热稳定直接溶血素的试验研究 被引量:6 2017年 目的通过抗体与标记的磁性荧光纳米颗粒相结合的免疫层析技术,建立一种快速检测产热稳定直接溶血素(TDH)副溶血性弧菌的方法。方法构建产TDH副溶血性弧菌基因片段并进行扩增,扩增产物与质粒载体(p ET-28a)连接,并在大肠埃希菌中表达,制备抗体。抗体与标记的磁性荧光纳米颗粒偶联后,制成免疫层析检测试纸条。将混有不同浓度标准菌株样品和阴性对照样品分别与荧光纳米颗粒-单抗偶联物和试纸条共同反应5min,紫外光下肉眼观察结果。对试验的敏感性、特异性、重复性进行测试并进行样品模拟试验。结果重组质粒载体在大肠埃希菌BL21(DE3)可稳定高效地表达分子量为26 k D的可溶形式的目的蛋白,并实现了单克隆抗体与磁性荧光颗粒很好的偶联,所得偶联物与最低浓度10 CFU/ml阳性菌株反应,阴性对照菌株无反应。结论试验制备的产TDH副溶血性弧菌毒力基因表达产物与磁性荧光纳米颗粒有机结合,检测操作过程简单,具有灵敏度高、特异性强、重复性好和检测时间短等特点。 向辉 朱海 孙世宏 李颖 王西丽 张汉斌 柳勤关键词:副溶血性弧菌 免疫层析