王志峰
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达
- 目的：构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法：以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV C蛋白编码基因,基因两侧加入起始密码子以及终止密码子。免疫荧...
- 王志峰翟永贞周立夫常彩芳王玉楠冯国和
- 关键词：乙型脑炎病毒编码基因荧光检测重组质粒
- 乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株总RNA为模板,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增JEV C蛋白编码基因,克隆至pMD19-TSimple载体测序。为便于分析JEV C蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEV C蛋白编码基因5′端附加FLAG序列,并亚克隆至pcDNA 3.1(+)载体中,构建重组子pJc并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJc转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞。免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEV C蛋白分布与表达。结果 pJC经BamH I/EcoR I酶切释出的插入子片段(414bp)分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白主要分布于胞质,少量分布于胞膜。结论 pJC成功构建,转染的CHO细胞可表达JEV C蛋白。
- 翟永贞王志峰冯国和
- 关键词：病毒蛋白质类蛋白质CCHO细胞
- 乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达
- 目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV C蛋白编码基因,基因两侧加入起始密码子以及终止密码子。切胶回收P...
- 王志峰翟永贞周立夫常彩芳王玉楠冯国和
- 文献传递
- 乙型脑炎DNA疫苗免疫BALB/c鼠诱导局部肌肉组织树突状细胞浸润的研究
- 2008年
- 目的研究流行性乙型脑炎DNA疫苗接种局部树突状细胞的形态与功能。方法将含流行性乙型脑炎病毒prM、E蛋白编码基因的DNA疫苗(pJME)肌注免疫BALB/c鼠,HE染色观察接种局部肌肉组织内浸润细胞形态学分布,免疫组化检测CD11b^+、CD11c^+树突状细胞浸润特点,流式细胞仪检测浸润的树突状细胞中CD80^+、CD86^+双阳性细胞的百分比。结果pJME肌注组浸润细胞簇分级(3.0^+)、浸润细胞中CD11b^+、CD11c^+树突状细胞百分比分级(2.0^+、2.0^+)均显著高于空载体肌注组和灭活疫苗肌注组(P<0.05)。CD80^+、CD86^+双阳性细胞的百分比pJME肌注组为(0.16±0.20)%,空载体组为(0.12±0.30)%,灭活疫苗肌注组为(0.15±0.25)%,树突状细胞CD80、CD86抗原表达无显著差异(P>0.05)。结论pJME可诱导接种局部多种免疫活性细胞参与,其中有髓样树突状细胞,呈非成熟状态。
- 周言翟永贞李喜梅王志峰常彩芳冯国和
- 关键词：脑炎树突状细胞
- 壳聚糖-pJME／GM-CSF纳米免疫原肌注BALB／c鼠所致树突状细胞分布与功能变化
- 2010年
- 壳聚糖是一种来源广泛、价格低廉、具有良好生物相容性及降解性、安全无毒的阳离子天然高分子聚合物，以纳米颗粒或微球形式与DNA结合后形成聚电解质复合体，后者可优化DNA疫苗的免疫效果。研究证实壳聚糖是一种有效介导DNA疫苗进行皮肤及黏膜免疫的载体物质。
- 周言翟永贞马力王志峰常彩芳冯国和
- 关键词：BALB/C鼠GM-CSF壳聚糖细胞分布树突状
