王玉梅
- 作品数：11 被引量：11H指数：2
- 供职机构：大连理工大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程经济管理更多>>
- 一株海洋放线菌L131及其代谢物、代谢物的制法及应用
- 本发明公开了一种海洋链霉菌L131及其抗真菌活性的应用。一种海洋链霉菌L131，分离自海泥样品中，纯化培养基为Bennett培养基，海洋链霉菌L131菌落凸起，表面褶皱，有白色孢子，产淡黄色可溶性色素。本发明海洋放线菌L...
- 赵心清王玉梅吴毅陈德玲谢萌方文晶沈俊涛
- 文献传递
- 一种海洋链霉菌卤化酶基因及其产物,以及其修饰产物的生物合成基因簇
- 本发明涉及基因工程领域。本发明公开一种海洋链霉菌卤化酶基因核苷酸序列，其特征为（a）含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的核酸和SEQ ID NO.2所示氨基酸序列；和（b）与（a）所述核酸具有至少75％序列相同性、...
- 赵心清杨天虹王玉梅陈亮宇
- 文献传递
- 星海链霉菌卤化酶重组蛋白在大肠杆菌中可溶表达
- 2014年
- 大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是表达异源蛋白的良好宿主,但常遇到蛋白表达产物不可溶的困难.在对来自星海链霉菌的卤化酶基因sinH进行大肠杆菌异源表达时,为克服蛋白表达产物可溶性低的问题,探讨了不同载体对蛋白可溶表达的影响.利用pET28a进行SinH表达时不能得到可溶的目标蛋白;使用含有泛素标签及内含肽的载体pHUIE实现了卤化酶蛋白SinH的可溶表达,但纯化后纯度不高;利用带有链霉菌分子伴侣蛋白基因的载体pET28a-SinH与pETcoco-pL1SL2在E.coli BL21(DE3)中共表达,在30℃,0.1mmol/L IPTG诱导条件下表达4h,成功获得大量可溶蛋白,使用亲和层析(Ni-NTA)纯化,获得了较纯的目标蛋白SinH,上述研究结果为在大肠杆菌中进行其他链霉菌蛋白的可溶表达提供了参考.
- 王玉梅赵心清马昱澍魏东芝
- 关键词：可溶表达
- 海洋链霉菌卤化酶基因筛选阳性菌株的活性物质研究
- 海洋放线菌可产生多种结构新颖、功能多样的活性物质，是天然活性产物和新药开发的重要来源，因此日益受到人们的关注。卤化酶修饰对多种天然产物的生理学活性具有重要影响，因此基于卤化酶的基因筛选有助于快速发现新的卤化抗生素，对新型...
- 王玉梅
- 关键词：海洋放线菌基因筛选番茄叶霉菌基因破坏
- 文献传递
- 海洋来源链霉菌M10抗白色念珠菌活性物质研究被引量：2
- 2013年
- 对从大连海域沉积物样品中分离得到的海洋放线菌进行活性筛选,获得了1株对白色念珠菌具有良好拮抗活性的菌株M10.基于16S rRNA的系统发育分析表明,M10菌株与分离自植物根际土壤的模式菌种摩洛哥链霉菌(Streptomyces marokkonensis)DSM 41918T的亲缘关系最近.对M10菌株的发酵产物进行活性追踪,M10菌株拮抗白色念珠菌的活性物质存在于乙酸乙酯相中,在低于60℃时具有较好的热稳定性,在pH值介于3～8之间具有良好的酸碱稳定性,但pH值升至9～12时活性明显下降.采用溶剂萃取、柱色谱层析及制备HPLC等方法对M10菌株发酵液中的有机相活性物质进行了分离,得到2种纯化合物A和B,其最小抑菌浓度分别为0.125、0.250μg/cm3;红外光谱分析表明A和B组分可能是不饱和酮酯类和不饱和苯衍生物.本文首次报道了海洋来源的摩洛哥链霉菌近缘菌株抗白色念珠菌活性物质的分离纯化,可为进一步开发利用海洋来源的新型抗真菌药物库提供参考.
- 矫文策王玉梅陈超董莉方玲玲万春赵心清
- 关键词：微生物学白色念珠菌活性物质
- 抗白色念珠菌的海洋来源链霉菌L131的鉴定及活性物质的初步纯化被引量：1
- 2013年
- 使用卤化酶简并引物对海洋来源的链霉菌进行了基因筛选,共得到了3株阳性菌株,并发现L131和S077菌株具有抗白色念珠菌活性.其中阳性菌株L131的16S rRNA序列与灰白链霉菌(Streptomyces canescens)DSM 40001T具有99%的相似性,但L131菌株在Bennett培养基上菌落凸起,表面褶皱,产白色孢子和淡黄色可溶性色素,不能以阿拉伯糖、果糖作为惟一碳源,与模式菌株存在着明显差异.L131菌株的抗白色念珠菌活性物质在40℃以下,pH值介于5～10范围内活性稳定,且极性大于乙酸乙酯.以AB-8为吸附树脂,首先使用40%(V/V)甲醇洗去未吸附的杂质,然后使用100%(V/V)甲醇进行洗脱,可得到初步纯化的活性物质,其对白色念珠菌的最小抑菌浓度为32.00μg/cm3.上述研究结果可为抗白色念珠菌药物的开发提供参考.
- 王玉梅董莉杨天虹陈德玲赵心清
- 关键词：白色念珠菌抗真菌活性基因筛选
- 基因组挖掘技术在海洋放线菌天然产物研究开发中的应用及展望被引量：7
- 2013年
- 利用微生物的基因组信息预测其合成特定天然产物的潜能,进而进行新化合物分离纯化和结构鉴定的基因组挖掘技术,已经成为国内外研究的热点,并在多种细菌和真菌的天然产物发现中得到成功应用。本文综述了基因组挖掘技术的最新进展,包括生物信息分析和结构预测、基因组指导的天然产物的发现、沉默基因的激活和异源表达技术等,以及我国学者开发的转录组挖掘技术,并重点综述了影像质谱技术在基因组挖掘中的应用。目前对海洋放线菌进行基因组挖掘的研究还比较少,而基因组挖掘技术的发展,将极大地促进对海洋放线菌天然产物的发现和鉴定。未来除了充分挖掘可培养微生物的基因组,对未培养微生物宏基因组的挖掘将进一步深入。此外,除了开发利用基因组中合成天然产物的结构基因和调节基因,还应该充分开发利用其他不同的遗传元件,包括不同转录活性和响应不同环境条件和信号的启动子,以及具有调节作用的RNA等。
- 陈亮宇王玉梅赵心清
- 关键词：海洋放线菌基因簇
- 一株烷源戈登氏菌株及其降解油类的应用
- 一株烷源戈登氏菌株及其降解油类的应用，属于生物技术领域。该菌株S104分离自大连海泥样品中,2010年10月12日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为4224。该菌株S104为革兰氏阳性菌，菌体为棒状，经16S r...
- 赵心清王玉梅陈亮宇陈德玲方文晶
- 文献传递
- 利用基因组挖掘技术研究星海链霉菌的生物合成潜能
- 本实验室在前期研究中分离鉴定了一株新的海洋放线菌，命名为星海链霉菌并进行了全基因组测序。通过比对分析，预测了4个NRPS合成基因簇以及4个PKS类化合物生物合成基因簇。其中，通过一个相似度达到86％的卤化酶sinH,确定...
- 陈亮宇徐小娜王玉梅赵心清
- 关键词：生物合成基因组
- 文献传递
- 一株烷源戈登氏菌株及其降解油类的应用
- 一株烷源戈登氏菌株及其降解油类的应用，属于生物技术领域。该菌株S104分离自大连海泥样品中，2010年10月12日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为4224。该菌株S104为革兰氏阳性菌，菌体为棒状，经16SrD...
- 赵心清王玉梅陈亮宇陈德玲方文晶
