王瑶
- 作品数：19 被引量：35H指数：5
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人红细胞NADH－细胞色素b5还原酶单克隆抗体的建立被引量：1
- 1995年
- 以重组人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过常规方法将小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出６株阳性克隆。其中两株分泌ＩｇＧ，其余均分泌ＩｇＭ。免疫印迹分析表明，两株ＩｇＧ单克隆抗体对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶有较高的特异性和亲和力。这一研究为开展对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶的研究和遗传性高铁血红蛋白血症的免疫诊断奠定了基础。
- 兰风华唐玉钗黄长晖朱忠勇王瑶
- 关键词：红细胞细胞色素酶还原酶单克隆抗体
- 胃肠多重癌微卫星不稳定性的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨胃肠多重癌发生的分子诊断标志物。方法 用 PCR方法对 1 5例胃肠多重癌患者术后所得肿瘤进行微卫星不稳定性 ( MSI)的检测。结果 1 5例胃肠多重癌中 ,9例胃癌 MSI阳性 ,阳性率为 6 0 .0 % ( 9/1 5) ;1 1例肠癌 MSI阳性 ,阳性率为 81 .2 % ( 1 1 /1 5)。而 1 5例单纯胃癌 MSI阳性表达率仅为 1 3.3% ( 2 /1 5) ,1 5例单纯肠癌 MSI阳性表达率为 2 0 .0 % ( 3/1 5)。多重癌与单纯癌相比有非常显著性差异 ( P<0 .0 0 1 )。结论 胃肠肿瘤 MSI的表达可以作为其多重癌发生的有用的分子诊断标志物 ,对 MSI表达阳性的胃肠肿瘤患者 ,应警惕多重癌发生的可能性。
- 饶本强兰小鹏涂小煌王瑶郑智勇胡还章季天海
- 关键词：微卫星不稳定性分子诊断
- 遗传性高铁血红蛋白血症患者NADH-细胞色素b_5还原酶基因点突变的检测和基因诊断被引量：3
- 1997年
- 为了探讨中国遗传性高铁血红蛋白血症患者的基因突变类型和建立相应的基因诊断方法，从已发现的１例Ⅰ型患者的外周血白细胞中提取ＲＮＡ，应用反转录ＰＣＲ法分析了Ｃｙｔｂ５ＲｃＤＮＡ的全部编码序列的９２１ｂｐ片段。结果显示：Ｃｙｔｂ５ＲｃＤＮＡ基因的第５７位密码子存在有Ａｒｇ→Ｇｌｎ（ＣＧＧ→ＣＡＧ）的错义突变。针对这一突变，用套式ＰＣＲ的方法对已有的３个家系共６名患者进行了基因诊断。结果表明其中两个家系的患者均有此位点的突变，５名患者３名为纯合子，２名为杂合子；而另一家系的患者未检测到，推测可能存在有其它突变类型。提示中国人遗传性高铁血红蛋白血症患者致病的分子基础，并建立了相应的基因诊断方法。
- 王瑶王瑶谢毅黄长晖朱忠勇吴玉水唐玉钗
- 关键词：血红蛋白血症NADH基因诊断
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症二个家系所见 Cytb5R 基因 Arg^(57)→Gln 突变被引量：5
- 1997年
- 目的：探明遗传性高铁血红蛋白血症ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）缺陷的分子机制。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，克隆３个遗传性高铁血红蛋白血症家系Ｃｙｔｂ５Ｒ９２１ｂｐ的ｃＤＮＡ编码序列，并用限制性酶切ＰＣＲ产物分析３个家系的基因组ＤＮＡ。结果：２个家系存在Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变，３个家系均未发现Ｇｌｕ２２２→Ｇｌｙ突变。结论：Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变是中国人遗传性高铁血红蛋白血症的致病原因之一。
- 黄长晖谢毅王瑶王瑶吴玉水朱忠勇
- 关键词：遗传性
- Fas系统与自身免疫性疾病被引量：3
- 1999年
- 细胞凋亡(Apotosis,APO)是真核细胞最广泛的死亡方式,在组织的更新或萎缩;器官的发育或形态改变,以及肿瘤消退过程中均可观察到。细胞凋亡已成为一种维持机体自身稳定所必需的生理性细胞死亡。细胞凋亡在控制免疫系统的免疫活性细胞分化、发育、增殖和应答中发挥着重要的作用。近3年来,通过对细胞凋亡的基础和临床研究已获得了凋亡与某些自身免疫病有关的重要进展。本文对这一领域的进展作一简要综述:
- 王瑶
- 关键词：自身免疫性疾病FAS系统分子结构细胞凋亡
- 一种新的NADH-细胞色素b5还原酶基因点突变被引量：6
- 1999年
- 目的 为了查明中国人遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ） 患者的ＮＡＤＨ细胞色素ｂ５ 还原酶（ｂ５Ｒ） 基因突变类型，探讨ＲＣＭ 发生的分子机制。方法 从已报道的１ 例ＲＣＭⅠ型患者的外周血白细胞中提取ＲＮＡ，应用逆转录聚合酶链反应法（ＲＴＰＣＲ） 扩增了ｂ５ＲｃＤＮＡ（９２１ ｂｐ），测定其ｂ５ＲｃＤＮＡ的全部编码序列。结果 ｂ５ＲｃＤＮＡ基因的第２０３ 位密码子存在（ＴＧＣ→ＴＡＣ）Ｃｙｓ→Ｔｙｒ 的错义突变。经基因组ＰＣＲ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ） 分析证实该突变并非ＰＣＲ过程中的错配。结论 Ｃｙｓ２０３ →Ｔｙｒ 是ＲＣＭ
- 王瑶吴玉水杨文西方国安郑培蒸兰风华朱忠勇唐玉钗
- 关键词：高铁血红蛋白血症基因点突变
- 受精抗原-1基因的克隆和GST融合表达
- 2000年
- 目的:克隆和原核表达小鼠受精抗原-1(FA-1)基因。方法:自行设计引物,用RT-PCR从小鼠睾丸组织总RNA扩增FA-1基因的编码序列。将扩增产物克隆至 GST 融合表达载体pGEX-2T。以IPTG诱导GST融合FA-1的表达。结果:凝胶电泳显示PCR扩增产物的分子量与预期的508bp一致。重组质粒经BamH I/EcoR I双酶切后产生一个约500bp的片段。对重组质粒的序列测定表明,插入片段的序列与发表的FA-1基因编码序列相符。在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量与43kDa相近的产物(预期44.2kDa)。该产物可通过GST融合蛋白纯化试剂盒得到纯化。结论:小鼠FA-1编码序列已被成功地克隆至GST融合表达载体pGEX-2T。
- 兰风华王瑶谢飞郑德柱唐玉钗戴西湖朱忠勇
- 关键词：GST抗原FA受精融合表达载体
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症NADH-细胞色素b5还原酶基因L72P突变被引量：7
- 1998年
- 目的：鉴定导致中国人遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ）的ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（ｂ５Ｒ）基因突变类型，探讨ＲＣＭ发病的分子基础。方法：逆转录－聚合酶链反应产物直接测序和ｃＤＮＡ克隆测序分析先证者的ｂ５Ｒ编码基因；限制性酶切分析其基因组ＤＮＡ。结果：发现一例ＲＣＭ患者ｂ５Ｒ基因第７２密码子存在新的错义突变（ＣＴＣ→ＣＣＣ）。结论：该突变导致ｂ５Ｒ蛋白第７２位亮氨酸被脯氨酸替换（Ｌ７２Ｐ）是该先证者致病的分子基础；进一步证实Ⅰ型ＲＣＭ患者的ｂ５Ｒ基因突变多发生在近５′端部分。
- 吴玉水黄长晖朱忠勇王瑶王瑶郑培蒸
- 关键词：RCM血红蛋白血症细胞色素B5还原酶
- 一种新的NADH-细胞色素b5还原酶基因点突变的发现和基因诊断
- 1999年
- 为了查明中国人遗传性高铁血红蛋白血症(RaVl)患者的NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)基因突变类型,探讨RCM发生的分子机制,从已报道的1例RCM I型患者的外周血白细胞中提取RNA.应用反转录PCR法扩增了b5R cDNA,分析了b5R cDNA的全部编码序列的921bp片段.结果显示,b5RcDNA基因的第203位密码子存在(TGC→TAC)Cys→Try的错义突变.经基因组PCR-RFLP分析证实该突变并非PCR反应过程中的错配,而是一种新的基因突变类型.由于此突变减少了一个对酶功能至关重要的带巯基的半胱氨酸,而引入了一个带酚侧链的氨基酸,致使酶的稳定性及活性下降.
- 王瑶吴玉水郑培蒸兰风华朱忠勇唐玉钗杨文西方国安
- 关键词：基因突变类型基因诊断点突变细胞色素B5错义突变
- 中国人遗传性高铁血红蛋白血症研究进展被引量：7
- 1999年
- 兰风华王瑶黄长晖吴玉水唐玉钗何菊英谢毅俞秀玲朱忠勇
- 关键词：RCM分子基础
