秦艳丽
- 作品数:11 被引量:85H指数:4
- 供职机构:复旦大学附属华山医院感染科更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 应用滚环扩增技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的研究被引量:5
- 2010年
- 目的 应用滚环扩增(RCA)技术检测HBV共价闭合环状DNA(cccDNA),观察该方法的特异性和敏感性.方法 以HBV全基因质粒为模板,经酶切、连接、浓缩、胶回收纯化等步骤,构建和制备HBV cccDNA标准品.抽提7例慢性乙型肝炎患者肝组织总DNA,进行滚环扩增.用HBV cccDNA标准品、3.2 kb线性HBV DNA、健康肝组织总DNA及15例慢性乙型肝炎患者血清总DNA作为对照,验证此方法的特异性.将HBV cccDNA标准品进行系列稀释,了解该方法的敏感性.结果 成功构建了HBV cccDNA,并可用RCA方法进行扩增.RCA方法可从2 mg的慢性乙型肝炎患者肝组织中检测到HBV cccDNA,并可检测低至1×102拷贝/μL的HBV cccDNA.RCA方法不能检测3.2 kb线性HBV DNA,在健康肝组织及15例慢性乙型肝炎患者血清中亦检测不到HBV cccDNA.结论 RCA方法操作较方便,具有很高的特异性和敏感性.
- 赵旭刘红艳李新艳秦艳丽邬祥惠翁心华佘会元张继明
- 免疫功能正常的鼻、眼、脑型播散性曲霉病一例被引量:2
- 2016年
- 患者女,70岁,因反复左侧面部麻木、头痛4个月余,于2015年1月21日入住复旦大学附属华山医院。患者2014年8月中旬无明显诱因下出现左侧鼻根部、左眼内眦处、口唇及左侧面部麻木感,伴轻度肿胀。半月后出现左侧头痛,以左头顶部、颞部为主,呈针刺样、持续性疼痛,有麻木感,伴头晕,无发热、恶心、呕吐。
- 朱凤云赵华真王睿莹秦艳丽朱利平
- 关键词:免疫功能持续性疼痛麻木感
- 慢性肝病的抗氧化治疗及其病理生理学基础被引量:1
- 2006年
- 氧化应激是各种肝脏疾病发生和发展的常见病理机制,抗氧化剂(如S-腺苷蛋氨酸、维生素E、多元不饱和磷脂胆碱、水飞蓟等)理论上有可能成为治疗慢性肝病的一种有效方法。目前的一些试验性研究也均获得较为肯定的结果,值得进一步研究,尤其是抗氧化剂联合抗炎和(或)抗病毒治疗等。
- 秦艳丽张继明Medina JMoreno-Otero R
- 关键词:抗氧化治疗慢性肝病病理生理学基础S-腺苷蛋氨酸抗病毒治疗病理机制
- 27例隐球菌性脑膜炎患者的临床分析被引量:9
- 2016年
- 目的探讨隐球菌性脑膜炎的临床特征,以提高该病的诊治水平及预后。方法回顾性分析复旦大学附属华山医院收治的27例诊断为隐球菌性脑膜炎患者的临床资料。结果 88.89%(24例)隐球菌性脑膜炎患者以头痛为首发症状;脑脊液糖(1.81±0.69 mmol/L)降低尤为显著;若并发颅神经损害,多累及视神经和听神经;头颅CT或MR可见脑缺血病灶(37.04%)及软脑膜不同程度强化灶(59.26%);所有患者均有不同程度的颅内压增高,病原学脑脊液墨汁染色阳性患者22例(占81.48%),隐球菌培养阳性患者20例(占74.07%),荚膜多糖抗原检测(乳胶凝集试验)阳性占100%;两性霉素B(Amp B)联合5-氟胞嘧啶(5-FC)治愈好转率100%(17/17),Amp B+5-FC+氟康唑治疗的4例患者中好转3例。结论隐球菌性脑膜炎早期误诊率较高,脑脊液墨汁染色、隐球菌乳胶凝集试验及培养有助于确诊;两性霉素B联合5-氟胞嘧啶仍是目前经典的抗真菌治疗方案,两性霉素B与伊曲康唑联合治疗方案有待大样本的临床验证;早期控制真菌及颅高压是改善预后关键,必要时可尽早外科干预。
- 俞冲秦艳丽朱利平王新宇
- 阿德福韦治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者的耐药率及耐药株进化情况被引量:56
- 2007年
- 目的观察阿德福韦单药长期治疗拉米夫定耐药CHB患者的耐药率,以及阿德福韦耐药相关性HBV变异及耐药株的动态变化。方法23例发生YMDD变异的CHB患者停用拉米夫定,口服阿德福韦10mg,1次/d,治疗68~116周,从患者基线和阿德福韦单药治疗后不同时间点的血清中抽提HBV DNA,采用直接PCR产物测序法进行耐药变异分析;对其中1例发生阿德福韦耐药患者的一系列血清进行基因克隆分析其HBV耐药株的进化情况。结果阿德福韦单药治疗48周的耐药率为4.3%,96周的耐药率为10.5%。HBV耐药株进化分析结果显示:阿德福韦单药治疗后,YMDD变异株比例逐渐下降而rtA181S变异株出现并逐渐增多,随着治疗时间的延长,又出现了rtA181s+N236T联合变异株。阿德福韦变异株(rtA181S和rtA181S+N236T联合变异株)对继起的阿德福韦联合拉米夫定治疗病毒学应答较差,并出现了1例阿德福韦与拉米夫定多药耐药联合变异株(rtM204I+rtN236T)。结论拉米夫定耐药的CHB患者,换用阿德福韦单药长期治疗后,耐药率逐渐增加并可选择出多药耐药联合变异株。
- 秦艳丽张继明黄玉仙毛日成尹有宽章婉琴张清波邬祥惠翁心华
- 关键词:乙型乙型阿德福韦酯拉米夫定耐药
- HBeAg阴性慢性乙型肝炎抗病毒治疗进展
- 2006年
- 乙型肝炎病毒e抗原(HbeAg)阴性慢性乙型肝炎(CHB)在世界范围内逐渐增多,对CHB的治疗提出了新的挑战。本文主要介绍HBeAg阴性CHB的治疗进展,目前临床乙型肝炎病毒(HBV)感染治疗药物主要是α干扰素和核苷类似物。
- 秦艳丽张继明
- 关键词:HBEAG阴性肝炎乙型慢性干扰素核苷类似物
- 恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒株的出现和消失被引量:10
- 2007年
- 目的1例拉米夫定耐药患者在接受恩替卡韦治疗过程中出现恩替卡韦耐药相关性变异,继续治疗后恩替卡韦耐药株自动消失,并发生HBeAg血清学转换,对该例患者HBV耐药株的动态变化进行了动态观察。方法收集该患者的系列血清标本及血清HBV DNA、转氨酶等系列临床数据,采用血清HBV DNA的PCR扩增与直接测序,限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析,RT序列的克隆与测序等方法,检测HBV耐药株的比例及动态变化。结果该患者在应用恩替卡韦治疗前就已经存在拉米夫定耐药株(rtL180M+rtM204V),在恩替卡韦治疗后拉米夫定耐药株一度被抑制,随着治疗时间的延长,拉米夫定耐药株的比例又占主导地位。在此基础上,于恩替卡韦治疗第128周,选择出恩替卡韦耐药株(rtL180M+rtM204V+rtT184L),临床上伴随有ALT和HBV DNA水平的反弹。该例患者在发生恩替卡韦耐药后继续接受恩替卡韦治疗,恩替卡韦耐药株自行消失,HBV DNA转阴(套式PCR方法),ALT复常,并出现HBeAg血清学转换。结论恩替卡韦可有效地治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者,但长期单药治疗可出现恩替卡韦耐药;在出现恩替卡韦耐药后,继续应用恩替卡韦仍然有效,甚至可发生HBeAg血清学转换和HBV DNA的清除。在恩替卡韦治疗过程中,在出现恩替卡韦变异株之前,可能需要先出现拉米夫定耐药株,在此基础上再选择出恩替卡韦耐药株。
- 毛日成张继明尹有宽秦艳丽章婉琴张清波邬祥惠翁心华
- 关键词:乙型肝炎病毒慢性乙型肝炎拉米夫定耐药
- 基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株被引量:1
- 2013年
- 目的建立一种HBV复杂前C区变异株精确定量的检测系统。方法分两步实时PCR完成检测。首先应用野生株阻断探针(WT-blocker probe)进行选择性抑制野生株病毒的扩增,而含量偏低的变异株病毒得以扩增约10000倍,使其在后续反应中易于检出;第二步应用单标记探针(Simple Probe)结合熔解曲线分析系统精确定量检测前C区G1896A、G1899A、G1896A/G1899A变异株。通过PBPPO(primer-blocker-probe partial-overlap)设计减少基因多态性对检测的影响,来提高检测精确度。检验结果经直接测序及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法予以证实。结果 4种标准质粒(G1896/G1899、G1896A、G1899A、G1896A/G1899A)能够很好地被检出并予以区分,突变检测灵敏度达到0.01%;10例HBeAg阳性(直接测序法鉴定前C区变异阴性)患者血清标本中,每例至少1种前C区变异株被检出。结论单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析能够早期灵敏检测前C区变异株,前C区变异株进化过程及机制还需进一步大样本、纵向队列研究予以阐明。
- 涂文辉侯伟张瑾吕莹王瑾瑜张咏梅张轶俊刘红艳朱浩翔秦艳丽毛日成张继明
- 关键词:熔解曲线分析
- 输入性播散型球孢子菌病一例被引量:1
- 2017年
- 患者男,27岁。因双侧臀部疼痛伴咳嗽、咳痰2个月,发热12d,于2015年2月5日入院。患者于2014年12月上旬出现右侧臀部疼痛,以右髋部疼痛为主,呈持续性针刺样痛,自服布洛芬疼痛不能缓解,5d后出现咳嗽、咳白色泡沫黏痰。
- 张偲王睿莹赵华真王璇吴吉芹秦艳丽朱利平
- 关键词:球孢子菌病播散型输入性臀部疼痛髋部疼痛布洛芬
- 应用PCR-RFLP技术检测阿德福韦耐药相关性HBV变异被引量:1
- 2007年
- 目的建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI(SecI)的酶切位点,建立PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法。用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本。将变异株和野毒株配成不同比例,再用此方法检测,以了解该方法的敏感性。结果本研究建立的PCR—RFLP方法可同时检测rt181变异和rt236变异;用此方法检测血清标本,结果与测序及克隆分析一致;此方法可检测出标本中10%的变异株。结论应用PCR- RFLP方法可同时检测rtA181V/T/S和rtN236T变异,具有较高的敏感性,可用于ADV耐药变异的早期诊断。
- 毛日成张继明尹有宽秦艳丽章婉琴邬祥惠翁心华
- 关键词:乙型肝炎病毒聚合酶链反应限制性片段长度多态性