袁萍
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脑膜炎球菌病的流行病学及疫苗（待续）被引量：7
- 2012年
- 脑膜炎球菌是唯一能导致全球流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行的病因。全球范围内90％的病例是由A、B、C、Y和W135群所致。欧美国家主要流行菌群为B、C和Y群；亚洲和非洲主要是A、C和W135群。A、C、Y和W135群多糖疫苗能有效控制流脑暴发，但由于在婴儿中免疫原性差，应用并不广泛。发达国家在引进C群结合疫苗后，C群流脑发病数迅速下降。A、C、Y和W135群结合疫苗的研制成功有望控制这些群导致的流脑流行。以外膜囊、外膜蛋白和基因组来源的表面蛋白为目标的B群疫苗研究取得不同程度的进展。
- 袁萍朱为
- 关键词：奈瑟球菌脑膜炎脑膜炎流行病学疫苗
- 脑膜炎球菌表面蛋白fHBP与PorA的融合表达及其免疫原性被引量：2
- 2016年
- 目的构建脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）表面蛋白fHBP重组表达质粒,并与PorA蛋白融合表达,对单抗原fHBP和融合抗原fHBP-PorA的免疫原性进行检测。方法筛选并优化fHBP和PorA基因序列,设计连接片段将PorA连接至fHBPC-端,构建重组表达质粒pET-24b-fHBP和pET-24b-fHBP-PorA,分别转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备抗血清,采用间接ELISA、流式细胞术和微量血清杀菌力试验（serum bactericidal assay,SBA）评价抗原的免疫原性。结果经双酶切和测序鉴定,两个蛋白的重组表达质粒构建正确。重组蛋白fHBP以可溶形式表达,fHBP-PorA以包涵体形式表达,纯化后纯度均在90%以上。抗血清滴度均在1.0×10~5以上。流式细胞术检测显示,抗血清与Nm可发生特异性结合,且fHBP-Por A抗血清显示出一定的交叉反应。fHBP和fHBP-PorA抗血清对Nm29019的杀菌滴度为1∶128。结论 fHBP具有较好的抗原性和免疫原性,具备B群脑膜炎疫苗开发前景。多抗原融合策略需更多的优化考虑。
- 吴根鹏袁萍王月红王晓毕慧黄帼英徐帆洪朱为
- 关键词：脑膜炎球菌免疫原性
- 脑膜炎球菌病的流行病学及疫苗（续）被引量：4
- 2012年
- 脑膜炎球菌是唯一能导致全球流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行的病因。全球范围内90％的病例是由A、B、C、Y和W135群所致。欧美国家主要流行菌群为B、C和Y群；亚洲和非洲主要是A、C和W135群。A、C、Y和W135群多糖疫苗能有效控制流脑暴发，但由于在婴儿中免疫原性差，应用并不广泛。发达国家在引进C群结合疫苗后，C群流脑发病数迅速下降。A、C、Y和W135群结合疫苗的研制成功有望控制这些群导致的流脑流行。以外膜囊、外膜蛋白和基因组来源的表面蛋白为目标的B群疫苗研究取得不同程度的进展。
- 袁萍朱为
- 关键词：奈瑟球菌脑膜炎脑膜炎流行病学疫苗
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素及其突变体的原核表达和免疫学活性被引量：2
- 2014年
- 目的原核表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)α-溶血素(α-hemolysin,Hla)及其突变体,并检测其免疫学活性。方法采用PCR法从S.aureus中扩增hla基因,将该基因克隆至原核表达载体p ET28a中,构建重组表达质粒p ET28a-hla,并利用点突变试剂盒进行突变,获得重组质粒p ET28a-hlaH35L。将两种重组表达质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的重组蛋白经Ni-NTA亲和层析和CM离子交换层析纯化后,检测其溶血活性、免疫血清的抑制溶血活性及HlaH35L蛋白的免疫保护作用。结果重组表达质粒p ET28a-hla经双酶切和测序证明构建正确;重组质粒p ET28a-hlaH35L的测序结果显示,第35位氨基酸突变位点与设计相符。表达的Hla和HlaH35L蛋白相对分子质量约为36 000,均为可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的50%,纯化后纯度均在90%以上。Hla具有溶血活性,溶血比活为152 HU/mg;HlaH35L无溶血活性;抗Hla和抗HlaH35L血清均具有抑制Hla溶血的活性;在小鼠滴鼻攻击模型中,HlaH35L具有一定的保护作用。结论成功在大肠埃希菌中表达了具有良好免疫学活性的Hla及其突变体HlaH35L,为筛选S.aureus候选疫苗组分奠定了实验基础。
- 袁萍王晓吴根鹏王月红徐帆洪朱为
- 关键词：原核细胞溶血活性免疫保护
