许晓楠
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 供职机构：大连理工大学生命科学与技术学院生物科学与工程系更多>>
- 发文基金：卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 卵黄免疫球蛋白配基亲和纯化碱性磷酸酶被引量：1
- 2004年
- 以卵黄免疫球蛋白(immunoglobulin yolk,IgY)为配基,对小牛肠组织来源的碱性磷酸酶进行免疫亲和纯化。采用1.5mol·L-1的NaCl进行洗脱,可使酶的纯化倍数达到64倍,活力回收率达到90%。IgY抗体对碱性磷酸酶亲和力的测定结果显示固有亲和力和相对亲和力分别为6.275×10-7 mol·L-1和5.0 μg·ml-1。
- 王山许晓楠包永明王翔宇安利佳
- 关键词：卵黄免疫球蛋白配基碱性磷酸酶
- 蛇毒类凝血酶基因转染人外周血淋巴细胞的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶 (Gloshedobin ,GSB)基因转染人外周血淋巴细胞而达到溶栓和防栓的效果。方法 应用PCR及PCR重组技术 ,将GSB基因克隆入逆转录病毒载体pLNCX ,以脂质体介导转染人外周血淋巴细胞 ,并借助于IL 2的分泌通路 ,使GSB分泌至胞外。转染后从mRNA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果 转染后 2 4h、48h、72h ,mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达 ;蛋白质SDS PAGE在 30kD左右出现一条带 ;转染上清于 40 5nm波长处测得精氨酸酯酶的OD值为 0 332～ 0 349。结论 GSB基因在人外周血淋巴细胞中表达 ,并分泌至胞外 ,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。
- 张红梅文姝许晓楠杨桦安利佳
- 关键词：蛇毒类凝血酶基因转染人外周血淋巴细胞逆转录病毒
- 基因治疗中载体的研究进展被引量：3
- 2001年
- 许晓楠张红梅安利佳
- 关键词：基因治疗
- 阿片受体拮抗剂对移植排斥反应的作用及机制分析
- 2001年
- 目的 在以往工作基础上进一步观察选择性δ-阿片受体拮抗剂 naltrindole对移植排斥反应的影响及其作用机制。方法 整体实验以小鼠异体异位心肌组织移植为模型 ,离体实验以体外混合淋巴细胞反应作为观察指标。另外 ,取不同培养时间段的混合淋巴细胞 ,以同位素标记 [α-32 P]-PPE c DNA为探针做 Northern blot分析。结果 naltrindole对移植排斥的抑制作用较纳曲酮更强。δ-阿片受体激动剂 D-Ser2 -Lue-脑啡肽可以促进体外混合淋巴细胞反应 ,该作用能够被 naltrindole拮抗。Northern blot结果提示 ,在混合培养一定时间的淋巴细胞中有脑啡肽前体 PPE m RNA的表达。结论 δ-阿片受体拮抗剂 naltrindole能显著抑制移植排斥反应。移植排斥反应中的免疫细胞激活后可能表达有脑啡肽。 naltrindole抑制移植排斥反应的作用是由 δ-受体介导的 。
- 许晓楠梅林邵黎丁桂凤范少光
- 关键词：阿片受体NALTRINDOLE拮抗剂移植排斥反应
- 蛇毒类凝血酶基因真核表达载体的构建被引量：3
- 2003年
- 目的 构建大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin,GSB)基因真核表达载体,试图借助IL-2的分泌通路,使GSB分泌至胞外而达到溶栓和防栓的目的。方法 应用PCR重组技术,将GSB的5’端和3’端分别与IL-2基因的信号肽和poly A尾相连接,将此重组基因克隆入逆转录病毒载体 pLNCX,以脂质体介导转染人外用血淋巴细胞,并以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因检测转染效率、确定DNA和脂质体的比例。转染24h后从mR-NA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果 mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达;SDS-PAGE显示在相对分子质量 30 000左右出现一条带,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。结论 构建的真核表达载体可表达具有活性的GSB,为GSB基因治疗血栓的体内研究打下基础。
- 张红梅文姝许晓楠安利佳
- 关键词：基因治疗淋巴细胞真核表达载体血栓病
