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谢杰雄: 作品数：12 被引量：38H指数：4; 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目广东省农业攻关项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2013年; 根据GenBank中已登录的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Nsp7基因中的保守区域设计合成了1对特异性引物,通过反应条件的优化,建立了检测美洲型PRRSV的SYBRGreenⅠ实时定量PCR检测方法,同时与商品化荧光定量PCR试剂盒进行比对分析。结果表明,该方法特异性强,灵敏度高,能很好的区分美洲型猪繁殖与呼吸道综合征病毒和其他病毒。使用该方法对14份临床样品进行检测,阳性率85.7%,与商品化试剂盒符合率100%。; 黄震魏春娅闫明菲田悦茹张民泽谢杰雄孙龙张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白7特异性抗体体外抑制病毒复制被引量：3: 2015年; 为进一步探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白7(Nsp7)在病毒复制过程中发挥的生物学作用,本研究在获得Nsp7可溶性重组蛋白的基础上,首先制备了抗Nsp7蛋白兔源多克隆抗体。确定抗体的免疫活性后,将其与PRRSV共同接种Marc-145细胞。孵育1h后弃掉混合物,加细胞维持液继续培养48h,应用TaqMan探针Real Time PCR方法对培养物中病毒拷贝数进行检查。结果显示,本研究制备的多克隆抗体可以和大肠杆菌表达的Nsp7α、Nsp7β重组蛋白发生特异性结合,并有效用于病毒感染Marc-145细胞后其Nsp7蛋白分布情况的原位检测;更为重要的是,与正常家兔血清相比,不同稀释倍数的抗Nsp7多克隆抗体均可对病毒的复制产生抑制作用,其中10-3倍稀释血清的抑制率可达88.4%。结果表明,Nsp7特异性抗体可有效用于PRRSV抑制试验的研究;Nsp7作为PRRSV复制酶多聚蛋白成员之一,在病毒复制过程中发挥着重要作用。; 刘荣昌张桂红崔进谢杰雄宁章勇王衡; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒抑制

当前猪繁殖与呼吸综合症常规疫苗的使用效果与存在问题: 2013年; 猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种主要以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为临床特征,各日龄猪只均可感染的接触性传染病。它具有很高的传染性和致死率,给我国养猪业造成严重危害。因此安全有效的PRRS疫苗一直是研制的焦点,核酸疫苗尤为热点。该论文对当前PRRS疫苗的研究情况进行了阐述,包括常规疫苗(灭活疫苗、弱毒疫苗)和新型基因工程疫苗(核酸疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗)以及疫苗研究过程中面对的问题。; 粟硕谢杰雄张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征疫苗常规疫苗

广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况被引量：17: 2013年; 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是危害世界养猪业的重要细菌性病原菌之一,本研究旨在了解猪链球菌临床分离株的耐药性特点和四环素耐药基因的携带情况,为临床上该病的防控提供科学依据。本试验采用K-B法和CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测猪链球菌广东分离株对18种抗菌药物的耐药性。结果显示,被检菌株对四环素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物表现较强的耐药性,尤其对四环素类药物的耐药率高达98.2%;对头孢菌素类药物比较敏感;菌株都耐受6种或6种以上的抗菌药物,其中以6和14重耐药菌株的数量最多,分别占20%和17%。本试验设计了4对引物检测四环素耐药基因携带情况,结果发现56株菌中以携带tetM基因为最多(85.71%)。结果表明tetM很可能是介导广东SS分离株对四环素产生极高耐药率的主要原因之一。; 黄文明欧阳昀张民泽黄震谢杰雄孙龙张桂红; 关键词：猪链球菌耐药性四环素耐药基因

PRRSV XH-GD株体外传代变化: 本文就2007年分离的xH-GD株在Marc-145细胞上连续传代，得到了122个不同代次的毒株，在此基础上选取13株不同代次的毒株进行序列测定分析及病毒滴度变化研究，结果显示随着代次的增加，病毒的滴度呈现升高趋势，相反...; 谢杰雄曹宗喜张民泽赵孟孟黄震张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒体外增殖病毒滴度生物学特性; 文献传递

PRRSV XH-GD株NSP7缺失感染性克隆的构建: 2014年; PRRSV的非结构蛋白NSP7是病毒的一种高度保守的非结构蛋白,NSP7可以进一步水解产生NSP7α,NSP7β。目前对于NSP7的研究相对较少,对其生物学功能尚不清楚。为了进一步了解PRRSV NSP7对于病毒的复制的作用,本试验通过反向遗传平台在PRRSV XH-GD全长病毒骨架中分别对NSP7α,NSP7β,NSP7编码区进行缺失,构建NSP7以及NSP7部分缺失株的全长cDNA的重组质粒,并对构建的重组质粒进行病毒拯救。结果表明,对NSP7α,NSP7β,NSP7缺失对病毒的拯救是致死性的,推测NSP7对于病毒的复制具有重要作用,本研究结果对于NSP7的相关功能研究提供一定的参考依据。; 谢杰雄崔甜甜陈耀张民泽崔进查云峰孙龙赵孟孟邓胜朝张桂红; 关键词：PRRSV

2株猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因序列分析被引量：4: 2012年; 利用RT-PCR分段扩增的方法,扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中山分离株(ZS-GD株)、珠海分离株(ZH-GD株)覆盖全长基因组的10个片段,分别克隆入pMD18-T载体进行序列测定,获得了PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株基因组全长15320bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株全基因组序列进行了遗传进化分析,结果显示PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株与美洲型参考株的核苷酸序列相似性分别为88.1%～97.8%和88.4%～98.0%;与欧洲型参考株(Lelystad)的核苷酸序列相似性分别为60.6%和60.4%,且在2株毒的Nsp2蛋白上有30个aa的缺失,表明PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株均为美洲型分离株的缺失变异株。; 张民泽闫明菲谢杰雄黄震曹宗喜吴欣伟郭泗虎张桂红; 关键词：PRRSV 基因组

猪伪狂犬病的防治及研究进展被引量：4: 2013年; 2012年以来部分省（包括河南、山东、湖南、湖北、广东，海南）出现了伪狂犬野毒感染，主要表现为母猪流产，仔猪和保育猪出现神经症状、呕吐、腹泻、转圈、呆立，肥猪眼睛肿，用头撞墙等症状。临床剖检见典型伪狂犬病变，犬与病死猪接触后出现奇痒症状，发病犬死亡率高，给养猪业带来重大损失。; 孙龙古洪浪谢杰雄粟硕张桂红; 关键词：猪伪狂犬病神经症状母猪流产临床剖检保育猪养猪业

2株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离、鉴定及遗传进化分析被引量：3: 2014年; 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株的变异特点,本试验从广东省疑似猪繁殖与呼吸综合征发病猪场采集的血清中分离到2株PRRSV,经RT-PCR检测为阳性,通过Marc-145细胞进行传代,能产生明显细胞病变。2株病毒分别命名为LZ-GD和LB-GD株PRRSV。对2株病毒的ORF5和Nsp2高变区进行序列测定和进化分析,结果显示,LZ-GD和LB-GD株的ORF5核苷酸序列与欧洲型代表株Lelystad株的同源性相对较远,分别仅为63.5%和63.8%,与美洲株经典毒株VR-2332的同源性分别为88.7%和89.1%,与中国高致病美洲毒株JXA-1的同源性分别为99.2%和99.3%。在分离病毒的Nsp2上存在30个氨基酸的不连续缺失,与中国高致病性变异株JXA-1的缺失位置一致,且同源性为99.1%和98.9%,结果表明分离的2株PRRSV均属于美洲型的变异株PRRSV。; 孙龙刘宇黄震谢杰雄崔进魏春娅陈耀邓胜朝粟硕张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒进化分析

PRRSV XH-GD株Nsp2部分缺失感染性克隆的构建被引量：4: 2013年; 为研究Nsp2编码区不同区域缺失对病毒体外复制的影响,本研究在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)XH-GD株反向遗传操作平台的基础上构建了pOK-AaBCD、pOK-AbBCD、pOK-AcBCD等3种Nsp2编码区部分缺失的感染性重组质粒。将这3种感染性质粒分别转染Marc-145细胞进行不同Nsp2缺失株的病毒拯救,结果显示,只有在Nsp2编码区缺失105个氨基酸的缺失株XH-GD-Δ105能够在Marc-145细胞中增殖,表明这一缺失区域为病毒复制的非必需,而其他两种感染性质粒则未拯救出相应的缺失重组病毒。本研究为进一步研究Nsp2的基因序列的缺失与PRRSV毒力之间的关系奠定了基础。; 张民泽谢杰雄郭泗虎王衡闫明菲赵孟孟黄震粟硕孙龙张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒感染性克隆

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