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连易水: 作品数：27 被引量：82H指数：5; 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金河北省科技支撑计划项目河北省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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从噬菌体展示十二肽库中筛选钠泵α_1亚基M1-M2膜外区特异性结合肽: 2010年; 目的获得人钠泵α1亚基M1-M2膜外区的特异性结合肽,以阻断或拮抗哇巴因对钠泵的抑制作用,为高血压的治疗提供理论和实验依据。方法以人工合成的钠泵α1亚基M1-M2膜外区多肽(ATEEEPQNDN-LGGGS)为靶分子,从噬菌体随机12肽库淘选能与之特异性结合的多肽,通过双夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和浓度依赖性实验鉴定噬菌体阳性克隆,提取DNA测序,推导其氨基酸序列,并检测其对哇巴因的竞争性拮抗作用。结果从噬菌体12肽库中筛选出4个阳性噬菌体克隆,测序后其氨基酸序列完全一致,均为:WHWRNPDF-WYLK。哇巴因竞争性抑制试验显示,获得的噬菌体展示肽可以与哇巴因竞争钠泵α1亚基M1-M2膜外区结合表位,阻止哇巴因与钠泵结合。结论获得了人钠泵α1亚基M1-M2膜外区的特异性结合肽,它能竞争性抑制哇巴因与钠泵的结合,为进一步探讨钠泵的作用机制及高血压的治疗奠定了基础。; 刘志文连易水李蝉张玥王永利王伟赵兴茹崔京霞; 关键词：钠泵噬菌体随机肽库结合肽

黑素瘤相关抗原-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义被引量：8: 2015年; 目的:探讨黑素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院手术切除的食管癌组织及距癌组织边缘5 cm以上且病理诊断证实为正常组织的癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和-A11蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为45%(27/60)和66.67%(40/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级相关(P<0.05);MAGE-A11蛋白表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、组织学分级、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-A9(P=0.037)和-A11(P=0.039)蛋白表达阳性的食管鳞状细胞癌患者和贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者。Cox多因素分析提示,MAGE-A9(P=0.026)和MAGE-A11(P=0.038)蛋白表达、组织学分级(P=0.026)、临床分期(P=0.008)及淋巴结转移(P=0.010)可作为整体生存的独立预后因素。结论:MAGE-A9和-A11蛋白是食管鳞状细胞癌的特异性抗原,似可作为食管鳞状细胞癌预后不良的预测指标。; 谷丽娜桑梅香刘飞范晓杰连易水杜彦艳于凡单保恩; 关键词：食管鳞状细胞癌抗原

黑色素瘤相关抗原-As在食管鳞状细胞癌和贲门腺癌组织中的表达及其意义: 2016年; 目的:探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在食管鳞癌和贲门腺癌组织中的表达,分析其与食管鳞癌和贲门腺癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院患者手术切除的食管鳞癌和贲门腺癌组织及距离癌组织边缘5 cm以上且外观正常的相应癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞癌和贲门腺癌组织及相应癌旁组织中MAGE-As蛋白的表达。结果:食管鳞癌和贲门腺癌组织中MAGE-As蛋白表达率分别为68.33%(41/60)和58.33%(35/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-As蛋白的表达。MAGE-As蛋白的表达与食管鳞癌患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05);MAGE-As蛋白表达与贲门腺癌患者的性别、年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-As蛋白表达阳性的食管鳞癌(P=0.036)和贲门腺癌(P=0.045)患者的生存期均显著低于表达阴性的患者。结论:MAGE-As蛋白是食管鳞癌和贲门腺癌的相关抗原,可作为食管鳞癌和贲门腺癌预后不良的指标。; 谷丽娜桑梅香尹丹静刘飞刘世娜黄卫娜范晓杰连易水单保恩; 关键词：食管鳞癌贲门腺癌抗原

肿瘤抗原MAGE-A11促进ER介导的乳腺癌细胞的增殖: 目的：探讨黑色素瘤抗原(melanoma antigen gene,MAGE)-A11 对雌激素受体(Estrogen receptor,ER)介导的乳腺癌细胞增殖的影响。; 桑梅香连易水刘飞谷丽娜单保恩; 关键词：乳腺癌 ER 细胞增殖

肿瘤抗原MAGE-A11在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响: 目的探讨黑色素瘤抗原基因(melanoma antigen gene,MAGE)-A11蛋白在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响。方法应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织和相应的癌旁乳腺正常组织中MAGE-A...; 周欣亮连易水桑梅香丁春艳单保恩; 文献传递

肺腺癌组织中黑色素瘤相关抗原-As的表达及其临床意义被引量：2: 2017年; 目的探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在肺腺癌组织中的表达,并分析其与肺腺癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法选取住院手术切除的肺腺癌组织及相应癌旁组织标本各80例,应用免疫组织化学法检测各组织中MAGE-As蛋白的表达,同时选取5例前列腺癌患者术后的睾丸组织作为阳性对照。结果肺腺癌组织中MAGE-As蛋白的阳性表达率为46.25%(37/80),而相应的癌旁组织未发现MAGE-As蛋白的表达。MAGE-As蛋白的表达与肺癌患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05)。Log rank检验显示,MAGE-As蛋白表达阳性的肺腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者(P=0.007)。多因素分析结果显示,MAGE-As表达、年龄和临床分期是肺腺癌患者较差预后的独立危险因素。结论MAGE-As蛋白是肺腺癌的相关抗原。MAGE-As蛋白可能作为肺腺癌预后不良的指标。; 谷丽娜桑梅香刘飞吴云艳刘世娜黄卫娜王芃堉连易水单保恩; 关键词：肺腺癌组织芯片预后

PCR-SSCP分析方法的优化被引量：8: 2008年; 目的:优化PCR-SSCP分析方法。方法:选择野生型Kir2.3质粒和突变型Kir2.3(I2123L)质粒为样本,其PCR结果的鉴定采用2%的琼脂糖凝胶EB显色,SSCP分析采用12%的非变性聚丙烯酰胺凝胶DNA银染显色。PCR产物变性比较了三种方法:即碱变性、SDS变性、直接变性。聚丙烯酰胺凝胶根据丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺及甘油的比例设计了六个实验组,每组采用两种条件电泳,即:30mA恒流快速电泳和100V恒流过夜电泳。结果:选择直接变性的PCR产物作为变性上样液,并确定了三种凝胶配及该条件下适用的电泳条件。即:丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为49比1,凝胶中含1%甘油,4℃,500V高压电泳3min接着30mA恒流快速电泳3h;丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为49比1,凝胶中含5%甘油,4℃,500V高压电泳3min接着30mA恒流快速电泳3h;丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29比1,凝胶中不含甘油,4℃,500V高压电泳3min接着100V恒流过夜电泳12h。结论:条件优化的PCR-SSCP是一种筛查基因突变简便、有效的实验方法。; 王娜连易水刘砚星; 关键词：SSCP 突变聚丙烯酰胺凝胶银染

香加皮杠柳苷对人食管癌细胞TE-13生长抑制作用被引量：21: 2008年; 目的:分析中药香加皮醇提物杠柳苷(periplocin from cortex periplocae,CPP)对食管癌细胞株TE-13的生长抑制作用,探讨其诱导细胞周期阻滞的机制。方法:应用MTT法检测CPP对TE-13细胞的抑制作用;Gimsa染色法分析TE-13细胞的形态学变化;FCM法检测细胞周期分布和凋亡率;Western印迹法检测TE-13细胞经药物处理前后细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、CDK2蛋白表达的变化。结果:CPP对TE-13细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),并呈时间和浓度依赖性,药物浓度越大,作用时间越长,抑制效应越强,CPP作用48h时,对TE-13细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.61μg/mL。经2μg/mL的CPP作用48h后,TE-13细胞发生明显的凋亡形态学变化;G0/G1期细胞明显增多(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),G2/M期细胞没有明显变化(P>0.05)。不同浓度CPP作用48h后能降低TE-13细胞中CDK4蛋白的表达(P<0.01),对CDK2蛋白的表达则没有明显影响(P>0.05)。结论:CPP能显著抑制TE-13细胞的增殖,其作用机制可能与CPP诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关。; 赵连梅单保恩艾军任凤芝连易水宋小天; 关键词：食管肿瘤香加皮细胞周期蛋白质依赖激酶类

肿瘤抗原MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌组织中的表达及意义: 目的:黑色素瘤抗原A(MAGE-A)家族是一组具有明显特征的癌睾丸抗原,它们具有高度的肿瘤特异性,并表达于多种肿瘤组织。但是,MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌患者体内的表达情况尚不清楚。我们的研究旨在探究乳腺癌...; 桑梅香连易水丁春艳周欣亮范晓杰单保恩; 关键词：乳腺癌; 文献传递

靶向沉默p65基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响被引量：12: 2011年; 目的利用miRNA靶向沉默p65基因,观察其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响。方法以脂质体LipofectamineTM2000为载体,将针对特异靶点p65基因的miRNA转染入MDA-MB-231细胞。RT-PCR和Western blot法检测p65 mRNA和蛋白表达的变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡;Western blot法检测凋亡相关因子表达的变化。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示,p65miRNA转染组p65 mRNA及蛋白表达量较对照组显著下降(P<0.05);MTT检测结果显示,沉默p65基因后,细胞出现了生长抑制现象;FCM检测结果发现,p65miRNA转染组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Western blot进一步检测发现,转染组细胞中caspase-3的前体蛋白条带变细,裂解片段条带加深;PARP蛋白出现裂解片段。结论 miRNA靶向沉默p65基因可抑制人乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,推测p65基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。; 王玲单保恩桑梅香连易水王彬丁春艳; 关键词：乳腺癌基因沉默 MIRNA P65

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