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连海: 作品数：79 被引量：131H指数：8; 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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联合应用新城疫病毒及其HN基因对小鼠Lewis肺癌抑制效应研究: 自从20世纪50年代Caslary发现新城疫(Newcastle disease,ND)病毒使农场主晚期胃癌的转移受到抑制以来,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的抗肿瘤作用一直被人们所...; 李霄金宁一连海陈立刚管国芳孙丽丽; 文献传递

流感病毒多表位核酸疫苗的合成、表达及抗原性研究: 流行性感冒(简称流感,Influenza)是由流行性感冒病毒(简称流感病毒,Influenza virus,Ⅳ)引起的一种古老的疾病。1997年首次证实AIV(H5N1)可直接感染人类。1999年证实了禽源H9N2感染人...; 贾雷立金宁一金扩世夏志平金洪涛连海郑敏李昌王瑞林陈毅锋金明兰鲁会军; 关键词：流感表位核酸疫苗; 文献传递

重组鸡痘病毒vFVHN对结肠癌细胞HCT-8抑制机制的研究: ＜正＞近年来新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）等溶瘤性病毒作为潜在的抑瘤制剂受到广泛关注。NDV编码的HN蛋白是一种74kDa的膜Ⅱ型糖蛋白,定位于病毒囊膜或宿主细胞膜上,在病毒吸附过程...; 李霄金宁一连海李雪梅管国芳孙丽丽陈立刚郑洪玲; 文献传递

抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达被引量：2: 2004年; 人工合成了能广泛识别HIV—1 gp120的单链抗体(SeFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因，将SEA基因第227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT，并对两基因进行密码子优化。构建原核温控型表达质粒pBV—120和pBV—SL120，经条件优化，pBV—120和pBV—SL120分别在E．coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达，表达量分别占菌体总蛋白的27．673％和32．519％。目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV—1抗原条发生良好的结合反应。; 王宏金宁一金洪涛张立树江文正徐一鸣连海; 关键词：GP120 原核抗HIV-1 BV 密码子表达载体构建

流行性乙型脑炎多克隆抗体的制备及其囊膜E蛋白ELISA方法的建立被引量：1: 2010年; 为了建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,试验用纯化的乙型脑炎病毒免疫健康新西兰白兔制备多克隆抗体,并对多克隆抗体进行纯化和效价测定;以纯化原核表达的乙型脑炎重组结构蛋白(E蛋白)为包被抗原,通过对检测方法相关条件的优化,建立了检测乙型脑炎病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明:该抗原不与猪其他疾病的阳性血清反应,具有良好的特异性;在批内重复试验中,变异系数小于10%。; 张宁金洪涛丁壮张瑞岩刘雯李勇连海夏志平; 关键词：乙型脑炎病毒 E蛋白 ELISA方法

新城疫病毒对Hep-2肿瘤细胞的抑制效应被引量：4: 2005年; 目的探讨新城疫病毒(newcastlediseasevirus,NDV)对Hep-2肿瘤细胞的杀伤效应及其免疫刺激作用。方法采用考马斯亮兰染色法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞细胞骨架的影响。运用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)染色法检测NDV感染致Hep-2肿瘤细胞死亡的杀伤率。通过免疫荧光结合流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测Hep-2肿瘤细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(majorhistocompabilitycomplexclassImolecules,MHC-I)的表达情况。另外,分离人外周血淋巴细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)作为效应细胞,以NDV感染的Hep-2肿瘤细胞作为靶细胞,同时设空白细胞对照,通过特异性细胞毒T淋巴细胞实验,探讨NDV所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的细胞骨架发生改变,对体外培养Hep-2肿瘤细胞的杀伤率达77.7%,可上调其表面MHC-I类分子的表达,并且能够刺激增强人外周血淋巴细胞中肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)活性,杀伤率为23.54%。结论NDV可有效杀伤Hep-2肿瘤细胞,并刺激产生特异性抗肿瘤免疫反应。; 管国芳金春顺金宁一米志强李霄连海孙丽丽文连姬; 关键词：新城疫病毒细胞免疫法肿瘤细胞死亡 HEP-2 特异性细胞毒性T淋巴细胞人外周血淋巴细胞

pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用被引量：13: 2003年; 用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性 .RT PCR、DNALadder、TUNNEL染色检测VP3基因的表达及表达产物诱导OS732细胞凋亡作用 .酶切鉴定证实成功地构建了两个核酸疫苗 ,并能在真核细胞内表达 .含HN的核酸疫苗pVHN表达后具有血凝活性并致肿瘤细胞表面唾液酸含量降低 (P <0 0 5 ) .pVVP3的转染能导致OS732细胞凋亡 ,凋亡率可达87% .试验结果表明。; 米志强金宁一龚伟薛立娟连海解丽华李萍; 关键词：鸡新城疫病毒 HN基因抗肿瘤

核酸疫苗及基因治疗用质粒的回收纯化研究进展: 1 基因治疗和核酸疫苗基因治疗是一种将核酸导入宿主细胞的治疗方法,用于治疗的核酸是按治疗要求经过遗传修饰过的。为了将有效地将核酸导入宿主细胞,目前已开发了病毒和非病毒(质粒DNA)两种载体系统。病毒载体的应用调控是一个...; 李霄金宁一连海管国芳

鸡痘病毒野毒感染对肝癌细胞SMMC-7721作用研究: 鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)为痘病毒科禽痘病毒属成员。病毒粒子有复杂的砖型结构,由脂蛋白膜包裹着,其核心为无感染性的双股线状DNA,含有一个由若干9.5 kB的反向重复序列连接的中央编码区,包括260个...; 李霄金宁一米志强管国芳连海孙迎春李萍孙丽丽; 文献传递