郭志鸿
- 作品数:85 被引量:232H指数:8
- 供职机构:中国科学院寒区旱区环境与工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- DRE顺式作用元件dsDNA芯片制备被引量:2
- 2009年
- DRE顺式作用元件能与DREB转录因子特异结合,在诱导逆境(干旱、高盐、低温)基因表达过程中起重要作用。dsDNA(double strand DNA)微阵列芯片技术能够有效地检测序列特异性DNA结合蛋白质(转录因子)与大量DNA靶点(顺式作用元件)的特异性结合,可有效分析生物分子结合作用。根据DRE顺式作用元件核心序列设计并化学合成含发夹结构的单链DNA探针,采用TaqDNA聚合酶在片延伸,并对其在片延伸体系的反应温度、Mg2+浓度以及单链探针是否变性等条件进行了优化。结果表明,50℃的反应温度,2.5mmol/L的Mg2+浓度和单链不变性是TaqDNA聚合酶在片延伸的最佳条件。优化方法制备的dsDNA芯片将更有利于DRE顺式作用元件与DREB抗逆转录因子相互作用的研究。
- 张玉宝郭志鸿李同祥王亚军谢忠奎
- 关键词:DREB转录因子
- 一种百合隐症病毒和百合斑驳病毒复合胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法
- 一种百合隐症病毒和百合斑驳病毒复合胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法,该试剂卡包括试剂卡槽、衬板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸,其中胶体金结合垫上含有复合金标探针,衬板固定于试剂卡槽中,样品垫、胶体金结合...
- 张玉宝王亚军谢忠奎郭志鸿王若愚何玉惠
- 文献传递
- 细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达被引量:2
- 2008年
- 目的构建CTxB-Eg95(TP)融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95(TP)融合蛋白。方法采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95(TP)并鉴定。分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建pET-CTxB-Eg95(TP)重组质粒。将鉴定为阳性的重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果测序结果表明已成功构建CTxB-Eg95(TP)融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果显示,转染pET-CTxB-Eg95(TP)的E.coliBL21(DE3)菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果一致。结论CTxB-Eg95(TP)融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础。
- 王志力王亚军谢忠奎郭志鸿张玉宝
- 关键词:霍乱毒素B亚单位融合基因原核表达
- 一种特异性检测百合斑驳病毒的试剂盒及其检测方法
- 一种特异性检测百合斑驳病毒LMoV的IC‑RT‑LAMP试剂盒及其检测方法,试剂盒主要包括特异性LMoV抗体IgG、特异性RT反向引物LMoV‑R、特异性LAMP引物组、第一链cDNA合成试剂、LAMP扩增反应试剂、荧光...
- 张玉宝王亚军谢忠奎杨果郭志鸿邱阳何玉惠
- 文献传递
- 利用ihpRNA介导的基因沉默培育抗冷糖化马铃薯被引量:4
- 2007年
- 为培育抗冷糖化的转基因马铃薯材料,克隆了368 bp的马铃薯酸性转化酶(AcInv)基因3′端非翻译区(3′UTR)和281 bp的马铃薯VP1-ABI3-like protein基因的第一内含子,构建了内含子连接的马铃薯AcInv基因3′UTR的发夹型RNA(ihpRNA)载体pBIV;采用微束激光穿刺技术转化马铃薯品种,得到了149个转基因株系,其中139个转基因株系在低温贮藏35 d时块茎还原糖含量低于亲本材料。RT-PCR分析表明还原糖含量降低的转基因植株中检测不到AcInv基因mRNA的积累。本研究结果表明以3′UTR作为RNAi载体的干涉片段可以有效地抑制靶标基因mRNA的积累,通过对AcInv沉默可获得抗低温糖化的马铃薯育种材料。
- 郭志鸿张金文王蒂陈正华
- 关键词:马铃薯酸性转化酶
- 诱导剂OS对切花百合病害及生理生化指标的影响被引量:3
- 2010年
- 为了增强切花百合在生长繁殖过程中的抗病性,本研究利用壳聚糖(oligosaccharide,OS)50mg.L-1、、100mg.L-1、300mg.L-1、500mg.L-1,浸泡切花百合种球根部与鳞片,通过田间种植和鳞片包埋两个试验,测定其生长指标,POD、PAL、PPO等防御酶活性以及病情指数。结果表明,各种浓度的壳聚糖处理百合后,植株叶片防御酶活性增加,病情降低,株高、茎粗等生长性状得到改善,鳞片发子球率增加,病害减少。其中经OS300mg.L-1处理的百合在各个生理生化指标以及抗病性上明显高于对照,而且其他浓度均未对切花百合产生药害,说明壳聚糖是一种对切花百合效果较好的诱导剂。
- 郭芳王亚军谢忠奎郭志鸿高永平
- 关键词:切花百合生理生化指标
- 一种百合斑驳病毒胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法
- 一种百合斑驳病毒胶体金免疫层析检测试剂卡及制备方法,该试剂卡包括试剂卡槽、衬板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸,其中胶体金结合垫上含有金标探针,衬板固定于试剂卡槽中,样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水...
- 张玉宝王亚军郭志鸿谢忠奎王若愚何玉惠
- 砂田退化对土壤温度和蒸发影响的模拟研究被引量:23
- 2010年
- 根据砂田不同耕作年份实地取样,并进行粒径分析,结果表明,砂层中混入的土含量随着砂田耕作年限增加而逐步增加;参照实地取样后粒径分析,以砂层混入土的不同重量百分比梯度设置处理T1-5%、T2-10%、T3-20%、T4-25%、T5-30%、T6-40%,并设对照CK1(纯砂砾覆盖)和CK2(无覆盖裸地),进行温度变化和蒸发效应的模拟研究。结果表明,5cm、10cm的土壤温度在8:00和20:00均随着退化程度的加重而降低,而在中午则呈横置S状;与对照纯砂砾覆盖CK1相比日高温延时性随退化程度加重而逐步减弱,日积温减小且昼夜温差增大;蒸发强度随着砂田退化程度的加重而逐渐增强,无覆盖处理蒸发量约是纯砂砾覆盖蒸发量的3倍,而严重退化的处理T5、T6分别是纯砾石覆盖的2倍,即严重退化砂田年蒸发量要比CK1多110mm。
- 王金牛谢忠奎郭志鸿王亚军
- 关键词:砂田温度土壤水分蒸发
- TIBA对东方百合‘索邦’种球休眠解除及内源激素含量的影响
- 2015年
- 百合具有生理休眠特性,种球采收后处于休眠状态。人工调控休眠进程对于种球繁育及鲜切花生产具有重要的意义。植物激素及激素间的互作对作物的生长发育有调控效应。要实现百合种球的国产化及鲜切花的周年供应,必须了解百合种球的休眠进程及休眠解除机理,才能实现人工调控。试验材料为产自宁夏回族自治区隆德县的东方百合‘索邦’(‘Sorbonne’)。选取周径为16/18cm的种球,用1g·L-1抑霉唑浸泡30min后,分别放入ABA及其合成抑制剂fluridone、GA3及其合成抑制剂paclobutrazol、IAA及其输出抑制剂2,3,5-triiodobenzoic acid(TIBA)溶液中浸泡24 h,清水浸泡相同时间作为对照。晾干后放置在4°C(±0.5°C)冷库中进行贮藏,包埋介质为含水量70%的草炭。从冷库贮藏日起,每隔7d随机取样至70d,每次取5个种球采用HPLC测定芽中激素含量;第28d起,每次随机取样30个种球栽种于以草炭为基的塑料箱中,持续6次。先将种植箱放置于17°C(±0.5°C)的黑暗环境中至出芽,记录萌发时间后将箱转移至温室,记录现蕾、开花时间。第一朵花开时统计株高、叶片数、花蕾数、花蕾长度及花径。结果表明:IAA输出抑制剂2,3,5-triiodobenzoic acid(TIBA)显著提前了出苗时间及现蕾、开花时间,显著增大了花径;显著降低了叶片数和花蕾数,但对株高和花蕾长度没有显著影响。说明TIBA能够促进百合种球休眠的解除,且影响切花的生长和品质。而外源IAA及其他处理对种球休眠没有显著影响。对百合芽中3种植物内源激素(GA3、IAA、ABA)的测定结果表明,TIBA处理后休眠解除过程中芽中的内源GA3先升高后降低、IAA低于对照;外源IAA处理后内源IAA略有降低,GA3无明显变化。内源GA3/IAA的分析结果表明,种球芽的GA3/IAA比值在冷处理过程的前期高、后期降低有利于休眠的解除。说明GA3和IAA的相互作用对百合休眠的调控有重要作用,G
- 杨柳谢忠奎郭志鸿武志江王乐张玉宝
- 关键词:百合TIBA种球休眠解除内源激素
- 一种特异性检测百合黄瓜花叶病毒的试剂盒及其检测方法
- 一种特异性检测百合黄瓜花叶病毒CMV的IC‑RT‑LAMP试剂盒及其检测方法,试剂盒主要包括特异性CMV抗体IgG、特异性RT反向引物CMV‑R、特异性LAMP引物组、第一链cDNA合成试剂、LAMP扩增反应试剂、荧光染...
- 张玉宝王亚军谢忠奎王若愚郭志鸿邱阳何玉惠
- 文献传递