郭永良
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
- 供职机构：湖南中医药大学更多>>
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- RNA干扰诱导肝癌HepG2细胞凋亡对丹参酮ⅡA药物敏感性的影响
- 2009年
- 目的：探讨载体介导的RNA干扰技术诱导HepG2细胞凋亡对丹参酮ⅡA药物敏感性的影响。方法：应用靶向细胞周期E（cyclin E）基因的siRNA真核表达载体转染HepG2细胞诱导凋亡,再以丹参酮ⅡA处理48h（cy-clinE siRNA＋丹参酮ⅡA组）,同时设立cyclinE siRNA组、无义siRNA组、丹参酮ⅡA组以及空白对照组,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,吖啶橙荧光染色检测细胞凋亡形态,Western blot法观察细胞Caspase-3蛋白表达。结果：单用cyclinE siRNA质粒转染或丹参酮ⅡA处理肝癌HepG2细胞,细胞凋亡率显著高于空白对照组（P〈0.01）,2μg/ml剂量凋亡率分别达到21.6%、23.6%。cyclinE siRNA质粒转染预诱导再经丹参酮ⅡA处理,HepG2细胞G0-G1期比例显著增高,S期、G2-M期细胞所占有比例明显下降;与单用cyclinE siRNA质粒转染、丹参酮ⅡA两组比较,细胞凋亡率分别增高了1.81和1.61倍,比两组合计增高0.35倍,Caspase-3蛋白表达水平分别增高了0.91倍和0.66倍。结论：通过cyclinE siRNA质粒转染诱导的HepG2细胞凋亡可提高丹参酮ⅡA药物敏感性,其机制与增强凋亡控制相关基因表达有关。
- 田雪飞陶一明周青孙靖郭永良
- 关键词：肝癌RNA干扰凋亡药物敏感性
- 水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞化疗药物敏感性的影响及机制探讨
- 目的：探讨水蛭提取物(leech extract, LE)对人肝癌HepG2细胞化疗药物敏感性的影响及机制。方法：比较液氮快速冻融法LE和传统水提醇沉法LE对HepG2细胞增殖的抑制作用并确定提取方法。以氟尿嘧啶(5-F...
- 郭永良
- 关键词：肝癌药物敏感性水蛭
- 文献传递
- 水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究被引量：19
- 2009年
- 目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6～15mg/mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义(P<0.01)。吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。
- 郭永良田雪飞肖竺
- 关键词：肝癌HEPG2细胞水蛭提取物增殖凋亡
- 归肝经中药对肝癌HepG2细胞增殖抑制及凋亡诱导作用的研究被引量：7
- 2009年
- 目的观察归肝经中药对体外人肝癌细胞株HepG2增殖及凋亡的影响，初步探讨归肝经中药抗肝癌作用的趋向性。方法归肝经中药选取莪术、水蛭、丹参，非归肝经中药选取白花蛇舌草为对照；制备提取物后体外干预HepG2细胞。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测各中药提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用，并计算半数抑制浓度（IC50）；用细胞计数法、流式细胞仪、吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）双染法分析比较归肝经中药莪术、水蛭、丹参提取物与非归肝经中药白花蛇舌草提取物在IC50药物浓度下对HepG2细胞增殖的影响及诱导凋亡的差异。结果白花蛇舌草提取物IC50药物浓度对应生药量是丹参提取物的11．39倍，水蛭提取物的16．56倍，莪术挥发油的168．67倍。IC50药物浓度作用下，归肝经中药莪术、水蛭、丹参提取物抑制HepG2细胞增殖作用、诱导细胞凋亡率均强于非归肝经中药白花蛇舌草提取物，归肝经中药可阻止HepG2细胞从G0／G1期进入S期，而白花蛇舌草提取物对HepG2细胞周期无明显影响。结论归肝经中药对肝癌HepG2细胞增殖抑制及凋亡诱导作用强于非归肝经中药白花蛇舌草，提示归肝经可能与中药抗肝癌趋向作用有关。
- 田雪飞肖竺郭永良孙婧
- 关键词：肝癌凋亡归经
- 靶向cyclinE小干扰RNA对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:以cyclinE基因编码区为靶位,构建表达小干扰RNA(siRNA)的质粒载体,观察转染后对HepG2细胞的影响.方法:针对cyclinE基因序列构建表达siRNA的真核表达载体pSilencer3.1-H1hygro,利用脂质体Metafectene转染CyclinE基因高表达的肝癌细胞株HepG2.流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR和Western blot法观察转染后细胞cyclinE基因表达.结果:成功构建了表达siRNA的真核质粒载体,转染后cyclinE基因mRNA及蛋白表达水平分别下降了79%和65%.结论:靶向cyclinE基因的siRNA可有效沉默HepG2细胞高表达的cyclinE基因,从而抑制肝癌细胞的增殖并促进凋亡.
- 田雪飞黄燕朱才肖竺郭永良
- 关键词：肝癌细胞周期蛋白ERNA干扰
