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陶磊: 作品数：103 被引量：147H指数：7; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>

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罗米司亭中聚山梨酯80含量高效液相色谱-电喷雾检测器检测方法的建立、验证及初步应用: 2024年; 目的建立重组蛋白药物罗米司亭中聚山梨酯80含量高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-电雾式检测器(charged aerosol detector,CAD)检测方法,并对方法进行验证及初步应用,以期为重组蛋白药物制剂的质量控制提供参考。方法通过对流动相的筛选以及方法洗脱梯度和CAD参数的优化建立聚山梨酯80含量的HPLC-CAD方法,并对方法的专属性、重复性、准确性进行验证,确定方法的检测限、定量限和线性范围。采用建立的方法检测2批次罗米司亭样品中的聚山梨酯80含量。结果方法优化后的色谱条件如下:色谱柱为Acclaim Surfactant Plus(150 mm×4.6 mm,3μm);流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的异丙醇;洗脱梯度为0 min 80%A,1.8 min 80%A,2.0 min 66.5%A,3.0 min 66.5%A,3.5 min 0%A,8.5 min 0%A,9.0 min 80%A,15.0 min 80%A;流速为0.6 mL/min;进样量为10μL;柱温为25℃;CAD雾化温度为50℃,幂律函数值(power function value,PFV)为1.25。该方法样品基质和空白溶液中无其他色谱峰干扰;检测低(10 mg/L)、中(50 mg/L)、高(80 mg/L)浓度聚山梨酯80峰面积的RSD分别为4.32%、1.97%和3.46%,平均加标回收率分别为95.7%、99.0%和98.9%;聚山梨酯80在浓度5.0~100.0 mg/L范围内具有良好的线性关系(R^(2)=1.0000),方法的检测限和定量限分别为1.0和2.0 mg/L。采用建立的方法检测2批次罗米司亭样品中聚山梨酯80含量分别为33.20和32.28 mg/L。结论建立的罗米司亭中聚山梨酯80含量HPLC-CAD检测方法灵敏度高,专属性、重复性、准确性良好,可用于重组蛋白药物质量控制过程中聚山梨酯80含量的检测。; 郭莹李响毕华裴德宁李学普秦玺陶磊史新昌杨靖清周勇; 关键词：高效液相色谱法聚山梨酯80

血管内皮生长因子抑制剂结合活性试验两种结果分析方法比较: 2019年; 目的:对血管内皮生长因子抑制剂(VEGF Trap)结合活性试验两种结果分析方法进行比较,以考察两者的差异。方法:采用固定剂量的VEGF与系列稀释的VEGF Trap处理之后,检测未结合的VEGF的量,分别以未结合的VEGF量对VEGF Trap浓度梯度和未结合的VEGF检测板的OD值对VEGF Trap浓度梯度进行四参数方程拟合,两种方法计算该产品的结合活性。结果:两种方法均满足试验有效性条件,且血管内皮生长因子抑制剂供试品和标准品的半数抑制浓度(IC50)均分别为3.68和3.6pmoL·L-1,供试品的结合活性为102%。结论:证明了两种分析方法得到的结果完全一致。为同类产品结合活性计算方法的选择提供借鉴。; 毕华李永红范文红陶磊裴德宁丁有学饶春明; 关键词：血管内皮生长因子抑制剂结合活性半数抑制浓度

流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品的建立: 目的:建立流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。方法：采用免疫印迹，糖蛋白染色，edman N端测序方法确定甲流H1N1疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，Lowry蛋白定量与SDS-PAGE密度扫描的方法确定神经...; 徐康维李长贵邵明刘书珍陶磊王军志; 关键词：神经氨酸酶流感疫苗 SDS-PAGE 免疫印迹; 文献传递

2种重组人干扰素α-2b相关蛋白分析方法的应用比较被引量：10: 2014年; 目的:对用于重组人干扰素α-2b相关蛋白分析的欧洲药典方法和自建方法进行实际应用效果的比较。方法:采用欧洲药典和自建2种分析方法对今年在国家药品评价性抽验工作中获取的8个企业生产的24批重组人干扰素α-2b产品分别进行分析,对二者的分离效果和得到的相关蛋白含量等进行比较。结果:自建方法能分离出欧洲药典方法不能分离的N端甲硫氨酸化蛋白,在24批产品中有15批产品检测出N端甲硫氨酸化蛋白,其含量为(23.15±8.50)%。用欧洲药典7.0版所载方法分析,24批产品的相关蛋白总含量为(11.53±8.31)%,相关蛋白峰数量为(6.1±1.9)个;用自建方法分析,相关蛋白总含量为(30.99±17.84)%,相关蛋白峰数量为(12.8±2.6)个。结论:自建方法对重组人干扰素α-2b的相关蛋白的分离效果更好,能对产品的质量进行更好的控制。; 李永红韩春梅裴德宁陶磊郭莹饶春明; 关键词：重组人干扰素Α-2B 高效液相色谱相关蛋白

治疗性重组蛋白药物的异质性与分析评价被引量：1: 2019年; 治疗性重组蛋白药物在我国经历了近30年的发展,分析技术的不断进步与质量标准的不断提高共同保证了我国重组蛋白药物的安全有效。由于重组蛋白药物本身的结构不稳定性及生产工艺复杂性,异质性成为其基本特性。异质性主要来源于工程菌/细胞的表达过程以及后续的生产储存过程,可能对产品的安全有效产生不利的影响。国际技术指南及各国药典均包含重组蛋白药物异质性分析的相关规定。随着技术的进步和发展,人们对重组蛋白药物异质性的分析能力也不断提高,对药物特性的理解也会更加深入。; 陶磊饶春明王军志; 关键词：重组蛋白

基因治疗制品质量控制通用技术要求考虑要点被引量：1: 2022年; 本文旨在为基因治疗产品研发者开展制品研发和生产等活动提供必要质量控制原则,适用于以病毒为载体的基因治疗制品,也适用于溶瘤病毒类制品。本文通过借鉴类似制品成熟的、有效的、实用性被证明的策略和方法阐述基因治疗制品质量控制生物通用技术要求,希望对整个行业的发展提供帮助。基因治疗制品制造和质量控制应依照风险评估、全过程控制和全生命周期管理理念,以保障制品质量为最终目的,并通过对各个制造环节的控制实现制品的低安全风险的稳定生产。; 史新昌秦玺于雷王光裕陶磊李响裴德宁李永红周勇; 关键词：病毒载体

重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒GM-CSF的质量研究: 目的：研究建立肿瘤溶瘤基因治疗产品——重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒GM-CSF的检测方法与质控标准。方法：采用限制性内切酶酶切与PCR法结合，对重组病毒载体携带的GM-CSF基因、以及ICP 34.5、ICP6、ICP47...; 高凯付志浩陶磊毕华袁力勇李永红饶春明; 关键词：基因治疗

人源化抗表皮生长因子受体抗体质控方法和质量标准研究: 目的：建立人源化抗表皮生长因子受体抗体的质控方法。　　方法：应用体外细胞生长抑制实验测定该抗体的生物学活性;电喷雾(ESI)质谱法与还原SDS-PAGE 法测定其准确分子量;去封闭后用Edman 降解法测定其N-末端氨基...; 陶磊饶春明王兰韩春梅李响高凯王军志; 关键词：表皮生长因子受体人源化抗体电喷雾质谱法

不同细胞培养水疱性口炎病毒的效果比较: 2020年; 目的比较鸡胚成纤维细胞、非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)和人羊膜细胞(WISH细胞)培养水疱性口炎病毒(vescular stomatitis virus,VSV)的效果。方法将VSV分别按250、300、350 TCID50/0.1mL感染鸡胚成纤维细胞、Vero细胞和WISH细胞,比较3种细胞培养的VSV的滴度及液氮中保存3、6、12个月的稳定性。结果鸡胚成纤维细胞、Vero细胞和WISH细胞培养的VSV的滴度分别为(10^6.21±10^0.07)、(10^5.21±10^0.07)和(10^4.88±10^0.12 )TCID50/0.1mL。用鸡胚成纤维细胞培养的VSV放置12个月稳定性较高,而用Vero细胞和WISH细胞培养的VSV稳定性较低,滴度分别为(10^5.75±10^0.12)、(10^4.08±10^0.07)和(10^3.62±10^0.12 )TCID50/0.1mL。结论使用鸡胚成纤维细胞培养的VSV具有较高的滴度和稳定性,是实验室培养VSV的首选方法。; 裴德宁史新昌秦玺陶磊饶春明; 关键词：水疱性口炎病毒病毒培养滴度稳定性

重组白介素22-Fc融合蛋白质控方法与质量标准研究被引量：1: 2015年; 目的:研究建立重组人白介素22-Fc融合蛋白的质控方法。方法:通过刺激COLO 205细胞产生白介素10并测定其含量的方法测定该融合蛋白生物学活性;采用SDS-PAGE及高效液相色谱法测定其纯度;采用实时荧光定量PCR方法测定外源DNA残留量;其余项目按中国药典三部(2010年版)要求进行。结果:该制品3批原液及成品的平均生物学活性分别为参考品的100.6%与103.1%;定量PCR测得3批原液的外源DNA残留量均小于100 pg·剂量-1;其他各项指标均符合中国药典三部(2010年版)要求。结论:研究建立的质控方法和质量标准可用于重组人白介素22-Fc融合蛋白的常规质量控制。; 陶磊韩春梅陈伟杨靖清丁有学毕华饶春明王军志; 关键词：融合蛋白生物学活性

陶磊

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