高栋
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
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- 一种携带PTD的抗人CD3单链抗体的制备方法
- 本发明公开了一种携带PTD的抗人CD3单链抗体（简称PTD-CD3）复性与纯化的制备方法。首先将形成PTD-CD3单链抗体包涵体溶解在脲溶液中，采用硅胶基质高效疏水相互作用色谱（HPHIC）柱或色谱饼进行PTD-CD3单...
- 王骊丽高栋耿信笃
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- 双功能色谱介质辅助溶菌酶体外复性的方法
- 本发明公开了一种双功能色谱介质辅助溶菌酶体外复性的方法。具体步骤如下：1)制备双功能色谱介质；2)用平衡缓冲液平衡装有双功能色谱介质的色谱柱；3)用变性缓冲液溶解溶菌酶，吸附上样；4)用复性缓冲液进行洗脱复性。本发明的优...
- 高栋王骊丽谭福春王文鹏
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- 使用混合模式层析技术去除抗体聚集体的方法
- 本发明公开了一种使用混合模式层析技术去除抗体聚集体的方法，包括以下步骤：（1）在层析柱中装填混合模式层析介质，该介质在空白基质表面偶联烯丙基的间隔臂，在间隔臂末端偶联配基分子正丁胺或苄胺；（2）将待精细纯化的抗体样品流过...
- 高栋谭福春王骊丽
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- 一种携带PTD的抗人CD3单链抗体的制备方法
- 本发明公开了一种携带PTD的抗人CD3单链抗体（简称PTD-CD3）复性与纯化的制备方法。首先将形成PTD-CD3单链抗体包涵体溶解在脲溶液中，采用硅胶基质高效疏水相互作用色谱（HPHIC）柱或色谱饼进行PTD-CD3单...
- 王骊丽高栋耿信笃
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- 一种从鸡蛋清中分离纯化高纯度溶菌酶的新方法
- 本发明公开一种从鸡蛋清中分离纯化高纯度溶菌酶的新方法。包括(1)以色氨酸分子作为填料的配基，将其修饰于硅胶基质表面合成了一种静电基团调控的新型高效疏水相互作用色谱(HPHIC)填料；(2)该HPHIC填料装填的色谱柱具有...
- 王骊丽杨毅聪高栋谭福春李维敏
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- 一种高效疏水相互作用色谱介质、制备方法及其在提取丹酚酸B中的应用
- 本发明公开一种高效疏水相互作用色谱介质，其结构式如下：<Image file="100004_DEST_PATH_IMAGE001.GIF" he="135" imgContent="drawing" imgFormat...
- 王骊丽张念喆高栋
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- 一种以胆酸为配基的混合模式色谱填料的制备与应用
- 本发明提供一种制备和应用以胆酸为配基的具有高效疏水相互作用/弱阳离子交换混合模式色谱填料的方法。将胆酸作为固定相配基，在硅胶基质表面化学修饰获得了新型的混合模式色谱填料。该填料装填的色谱柱采用盐‑水为洗脱体系，对天然蛋白...
- 王骊丽任怡高栋
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- 重组人干扰素-γ的制备与鉴定被引量：6
- 2008年
- 用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。
- 吴丹高栋白泉耿信笃
- 关键词：复性纯化
- 纳豆激酶集成化分离技术被引量：2
- 2008年
- 综述了纳豆激酶分离纯化技术的研究现状和发展趋势。通过对常规分离技术的分析,重点讨论了集成化分离技术的应用及其优势,包括集成化双水相分配技术、扩张床吸附技术以及耐盐性混合模式吸附技术等分离方法,并指出集成化分离技术在生产纳豆激酶以及其他活性蛋白方面,具有广阔的应用前景。
- 苟金霞高栋
- 关键词：纳豆激酶分离纯化集成化
- 高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质被引量：5
- 2010年
- Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值。为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E.coli)中表达得到的Flt3配体的包涵体进行回收、洗涤,溶解于8mol/L脲后在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)柱上进行rhFL包涵体的复性与同时纯化,并对其保留特征和复性规律进行了研究。结果表明,在连续进样、变性蛋白质质量浓度为8.51g/L、固定相选用端基为PEG800、流动相添加4mol/L脲、1.8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)和0.3mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSH)、pH7.0的优化条件下,复性与同时纯化rhFL包涵体的质量回收率为36.9%,纯度达94.5%以上。本文仅用一步HPHIC法成功地复性与同时纯化了rhFL蛋白质,为获得高活性的rhFL产品奠定了一定的工作基础。
- 贾佳王骊丽高栋耿信笃
- 关键词：复性纯化包涵体
